小青龍湯中藥提取物配方顆粒湯劑與傳統湯劑的比較研究

任大偉 ，王淑君 ，李 平 ，劉 瓊

（1.上海綠谷制藥有限公司，上海 201203；2.鄭州大學第一附屬醫院，河南鄭州 450052）

單味中藥提取物配方顆粒是以中藥材經炮制后的飲片為原料，按照藥物性質選擇不同方法進行大工業提取，并經適當濃縮、干燥、制粒等工序精制而成并定量包裝顆粒劑，使用時按處方當量調劑后熱開水沖兌即可，既保留了中藥飲片的藥性藥效，又不需煎煮，易于調劑、使用方便、質量可控，符合現代消費與生活需求，是傳統飲片湯劑現代化改革的一種形式[1]。筆者曾對四逆湯配方顆粒進行了研究，取得了滿意的結果，為進一步探討單味中藥提取物配方顆粒的制備方法及成分變化情況，筆者對小青龍湯配方顆粒與傳統飲片湯劑進行了比較研究。

小青龍湯始載于《傷寒雜病論》，為治療風寒感冒的重要方劑，由麻黃、桂枝、芍藥、細辛、半夏、五味子、干姜、甘草共八味藥組成，其中麻黃含麻黃堿，芍藥含芍藥苷，甘草含甘草次酸等有效成分，本研究根據有效成分的性質及方劑特點進行了單味中藥提取物配方顆粒的制備，用薄層色譜法對單味中藥提取物配方顆粒湯劑和傳統湯劑化學成分進行定性定量比較，現將實驗結果報道如下：

1 儀器與試藥

CS-930雙波長薄層掃描儀（日本島津）；麻黃、桂枝、芍藥、甘草、細辛、干姜、半夏、五味子生藥飲片均購自河南省藥材公司，經河南省藥材公司侯惠鳴副主任中藥師鑒定為正品。試劑為分析純，芍藥苷、甘草次酸、麻黃堿標準品均購自中國藥品生物制品檢定所。

2 方法與結果

2.1 樣品制備

2.1.1 單味中藥提取物配方顆粒及其湯劑的制備 麻黃、桂枝、細辛、干姜、五味子分別提取揮發油后，殘渣按 1∶20，1∶10加水提取兩次，分別為3、1.5 h，合并提取液，80℃以下濃縮至適當濃度，噴霧制粒，60℃干燥，加入揮發油，定量包裝即可；芍藥、甘草、半夏直接按上比例加水，煎煮時間分別為4、3 h，煎煮液在80℃以下濃縮至適當濃度，噴霧制粒，定量包裝，備用。

按處方量取單味中藥提取物配方顆粒，以80℃熱開水沖兌。本實驗為方便起見，沖兌成1 000 ml，制成配方顆粒湯劑，備用。

2.1.2 傳統湯劑的制備 取小青龍湯處方量調劑，按1∶20、1∶10加水煎煮兩次，12層紗布過濾后，合并煎出液，定容到1 000 ml，備用。

2.2 單味中藥提取物配方顆粒湯劑與傳統湯劑的比較

2.2.1 兩種湯劑中麻黃堿的成分比較[2]

2.2.1.1 麻黃堿的含量測定 分別精密量取飲片湯劑及顆粒湯劑各60 ml，用10%Na2CO3調節 pH至 12～13，置分液漏斗中分別以乙醚萃取6次，合并萃取液于三角燒瓶中，回收乙醚后，用95%乙醇定容至1 ml量瓶中，備用。取上述兩種溶液6μl、1.895 mg/ml的麻黃堿對照品溶液 3μl，分別點于同一硅膠 G 薄層板上，以正丁醇∶乙醇∶水∶40%乙醛（16∶1∶4∶2）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以0.20%茚三酮乙醇液，110℃烘10 min，兩種湯劑顯示相同顏色的斑點，表明成分的一致性。在CS-930型薄層掃描儀上對麻黃堿掃描定量（掃描條件：雙波長反射法鋸齒形掃描，λs 500 nm，λR為 700 nm，Sx＝3，靈敏度：中，狹縫：1.2 mm×1.2 mm），折算為一個處方量中含量，結果見表1。

表1 傳統湯劑及配方顆粒湯劑中麻黃堿含量比較Tab.1 Comparison of the ephedrine content between Traditional Decoction and Dispensing Granule

2.2.1.2 麻黃堿回收率試驗 采用加樣回收法。精密取已知含量的樣品，分別精密加入一定量的麻黃堿對照品，按上述方法制備樣品，按麻黃堿的測定項下薄層掃描條件進行掃描測定，結果見表2。

表2 麻黃堿回收率試驗Tab.2 Recovery test of the ephedrine

由表2可知，傳統湯劑與單味中藥提取物配方顆粒湯劑相關成分薄層層析圖譜一致；單味中藥提取物配方顆粒湯劑麻黃堿含量高于傳統湯劑，且含量較為穩定。

2.2.2 兩種湯劑中芍藥苷的成分比較[3]分別精密量取飲片湯劑和顆粒湯劑各60 ml，用10%HCl調pH至2～3，置分液漏斗中分別用乙醚萃取6次，合并萃取液于三角燒瓶中，水浴揮發乙醚后，用95%乙醇定容至1 ml量瓶中，備用。取上述兩種溶液各6μl及1.956 mg/ml的芍藥苷對照品溶液9μl，分別點于同一硅膠 G 薄層板上，以氯仿∶甲醇∶乙酸乙酯（8∶3∶1）為展開劑，展開，取出，晾干，碘蒸氣顯色。在與對照品溶液色譜相應位置上，兩種湯劑顯相同的黃色斑點，以CS-930型薄層掃描儀對芍藥苷進行掃描定量（掃描條件：雙波長反射法鋸齒形掃描，λS為 415 nm，λR為 650 nm，Sx=3，狹縫：1.2 mm×1.2 mm，靈敏度：中），折算為一個處方量中含量，結果見表3。

由表3可知，傳統湯劑與單味中藥提取物配方顆粒湯劑相關成分薄層層析圖譜一致；單味中藥提取物配方顆粒湯劑芍藥苷含量明顯高于傳統湯劑，且含量較為穩定。

2.2.3 兩種湯劑中甘草次酸的成分比較[4]

2.2.3.1 甘草次酸含量測定 精密吸取飲片湯劑及顆粒湯劑各80 m1，加鹽酸6 ml，回流提取1 h，置分液漏斗分別以氯仿萃取4次，合并氯仿液水浴回收氯仿至干，殘渣以乙醇溶解并定容至2 ml，在同一硅膠G薄層板上分別點樣8μl、2.036 mg/ml的甘草次酸標準品溶液8μl，用石油醚 （30～60℃）∶苯∶乙酸乙酯∶冰醋酸（10∶20∶7∶0.5）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%磷鉬酸乙醇液，在105℃烘5 min，兩種湯劑顯相同顏色的斑點，以CS-930型薄層掃描儀上對甘草次酸進行掃描定量（掃描條件：雙波長反射法鋸齒形掃描，λs=665 nm，λR=400 nm，Sx=3，靈敏度：中，狹縫：1.2 mm×1.2 mm），折算為一個處方量中含量，結果見表4。

表3 傳統湯劑及配方顆粒湯劑中芍藥苷含量比較Tab.3 Comparison of the paeoniflorin content between Traditional Decoction and Dispensing Granule

表4 傳統湯劑及配方顆粒湯劑中甘草次酸的含量比較Tab.4 Comparison of the cyrrhetinate content between Traditional Decoction and Dispensing Granule

2.2.3.2 回收率試驗 采用加樣回收法。精密取已知含量的樣品，分別精密加入一定量的甘草次酸對照品，按上述方法進行樣品制備和含量測定，結果見表5。

表5 甘草次酸回收率實驗Tab.5 Recovery test of cyrrhetinate

由表5可知，傳統湯劑與單味中藥提取物配方顆粒湯劑相關成分薄層層析圖譜一致；單味中藥提取物配方顆粒湯劑甘草次酸含量明顯高于傳統湯劑，且含量較為穩定。

2.3 結果

2.3.1 傳統湯劑與單味中藥提取物配方顆粒湯劑薄層層析圖譜一致。

2.3.2 單味中藥提取物配方顆粒湯劑中有效成分均高于傳統湯劑，但不同成分高出的倍數不盡一致。

2.3.3 單味中藥提取物配方顆粒湯劑有效成分含量穩定，RSD值小，表明其重現性好。

3 討論

單味中藥提取物配方顆粒湯劑的成分含量與傳統湯劑差別較大，代替飲片湯劑應進行處方調劑當量的研究。

本研究為保持與傳統湯劑以水為提取溶媒的一致，采用提取揮發油后再水提的配方顆粒制備方法。配方顆粒制備應通過研究確定不同的方法。

單味中藥提取物配方顆粒湯劑制備時以熱開水沖兌，盡量提高溫度，有利于接近制備飲片湯劑的高溫條件，使兩者盡量趨于一致。

配方顆粒湯劑與傳統湯劑的等效性應從成分的比較、藥效的比較和臨床療效的比較3個方面進行綜合評價[5]，本研究僅對小青龍湯配方顆粒湯劑與傳統湯劑的成分進行了比較，藥效和臨床療效的比較有待進一步研究。

臨床療效問題是制約配方顆粒湯劑臨床推廣的關鍵因素之一，而質量穩定才能保證療效，因此，中藥配方顆粒質量標準的研制和發展，是臨床大規模推廣使用的基礎和前提[6-8]。

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