從葛根素的異常毒性實驗看藥用輔料的重要性

周永標，潘衛松

（廣州市藥品檢驗所，廣東廣州 510160）

傳統上認為輔料應是非活性的，所以出現藥物不良反應時，人們往往歸之于活性成分。事實上，輔料并非惰性，藥用輔料所引發的藥物不良反應屢見報道[1]。葛根素是一有效的β-腎上腺受體阻滯劑。臨床驗證有肯定的抗急性心肌梗死，抗高腎素型高血壓、抗心律失常療效。葛根素注射液臨床使用較為廣泛，主要用于輔助治療冠心病、心絞痛、心肌梗死、視網膜動、靜脈阻塞、突發性耳聾及缺血性腦血管病、小兒病毒性心肌炎、糖尿病等。傳統醫學認為葛根無毒。已有報道小鼠的靜脈注射葛根素的LD50為738.1 mg/kg，95%的可信限為604.0～901.8 mg/kg[2-3]。

目前國內生產的葛根素注射液在生產工藝中通常系以50%丙二醇作為增溶劑。丙二醇（1,2-二羥丙烷，propylene glycol，1,2-dihydroxy propan）廣泛用于制藥、食品和化妝品工業中，在藥品中常用作增溶劑、潤濕劑、保濕劑、防腐劑等。人體對于丙二醇的安全范圍并無明確界定，丙二醇對小鼠靜脈注射的LD50為66 301 mg/kg[4]。筆者在進行注射劑標準提高的研究中，發現葛根素注射劑的毒性反應與丙二醇的含量存在相關性。為了證實丙二醇的含量影響葛根素注射劑的毒性反應，特進行了如下實驗研究。

1 儀器與試藥

1，2-丙二醇[批號：20060901-1，分析純，密度（g/ml，20℃）：1.036~1.039，廣州化學試劑廠]；滅菌注射用水（批號：0701090202，廣東神州制藥有限公司）；氯化鈉注射液（批號：D061224，湖南科倫制藥有限公司）；葛根素注射液（規格：2 ml∶100 mg，內含 50%丙二醇）；注射用葛根素（規格：0.2 g/瓶，凍干粉針，輔料主要是甘露醇、碳酸氫鈉）；葛根素氯化鈉注射液（規格：250 ml，內含葛根素0.4 g與氯化鈉 2.25 g）；葛根素葡萄糖注射液（規格：250 ml，內含葛根素0.3 g與葡萄糖12.5 g）；SPF 級 KM 小鼠（體重：18～20 g，雌雄兼用，廣東省醫學實驗動物中心，實驗動物許可證號：2007A012）。

2 方法與結果

2.1 方法

2.1.1 葛根素注射制劑的異常毒性

參照《中國藥典》2005年版附錄Ⅺ C異常毒性檢查法，按照尾靜脈注射給藥法試驗。葛根素注射液分別用氯化鈉注射液配制成50.0、40.0、20.0 mg/ml的系列溶液，分別給藥；注射用葛根素分別用氯化鈉注射液配制成55.6、50.0、40.0 mg/ml的系列溶液，分別給藥；葛根素氯化鈉注射液和葛根素葡萄糖注射液分別以制劑原液（50.0 mg/ml）給藥。

2.1.2 丙二醇的異常毒性

2.1.2.1 50%丙二醇溶液的配制 取50 ml丙二醇加滅菌注射用水到100 ml，置200 ml三角燒瓶中，搖勻，121℃加壓30 min后，放涼，備用。

2.1.2.2 20%丙二醇溶液的配制 取上述50%丙二醇溶液2.0 ml，加氯化鈉注射液到5.0 ml，置5 ml量瓶中，搖勻，121℃加壓30 min后，放涼，備用。

2.1.2.3 異常毒性檢查 取上述兩種溶液參照《中國藥典》2005年版，附錄ⅪC異常毒性檢查法，分別給藥，給藥容量分別為1.00、0.50、0.30、0.25、0.20 ml。 同時將葛根素注射液分別以氯化鈉注射液配制成為50 mg/ml和20 mg/ml的溶液作為對照試驗組，進行平行給藥試驗。

2.2 結果

本次試驗分別對國內9個廠家兩種劑型3種規格共17批樣品進行考察，結果見表1、2。

由表1、2可知，不同劑型的葛根素制劑毒性反應情況為葛根素注射液＞注射用葛根素＞葛根素氯化鈉注射液和葛根素葡萄糖注射液；50%丙二醇＞20%丙二醇。而動物毒性反應表現與丙二醇毒性反應基本相同。當稀釋藥物濃度即降低藥物中丙二醇的含量時，藥物的毒性反應隨之減輕，而無加丙二醇作助溶劑的其中3種劑型動物異常毒性無反應或較輕。以上結果表明葛根素注射液的毒性反應與其中丙二醇的含量呈正相關。

表1 葛根素注射劑不同劑型的異常毒性試驗結果

表2 葛根素注射液和不同濃度丙二醇溶液異常毒性試驗結果

3 討論

有文獻報道，WHO根據代謝和毒理試驗數據，將丙二醇的日攝取量定為每千克體重25 mg；丙二醇大量攝取會引起中樞神經不良反應[4-6]。因此，注射劑的異常毒性和加入輔料的量有相當密切的關系，臨床使用中根據實際情況選用不同的劑型進行治療，這也是一種減少臨床出現不良反應的手段之一。

注射劑的毒性和輔料的關系很大。藥用輔料是藥品的一個重要組分，其質量優劣直接影響到藥品的質量及使用。亮菌甲素的二甘醇事件，國家食品藥品監督管理局認定聚山梨酯-80為導致臨床魚腥草注射液發生過敏反應的致敏原，臨床上靜脈注射含吐溫-80的注射液，如依托泊苷注射液和多西紫杉醇注射液，常發生急性超敏反應。這些事件都提示注射劑中一部分的不良反應是由輔料所導致的。我國專家已經越來越意識到輔料對于保障臨床用藥安全有效的重要性[7-12]。

美國目前藥劑輔料已達1 000種以上，共分40多類。其中《美國藥典》1980年收載的法定藥劑輔料為260種；1988年版則增加為330種；1900年版再增加為345種。我國目前藥用輔料標準數量少，標準項目不齊全，許多常用輔料沒有藥用標準，嚴重影響了輔料的管理和使用。我國己經制訂并公布的藥用輔料標準占所使用的藥用輔料總數的比例還不到30%，遠遠不能滿足實際需求。

目前，世界制劑輔料發展更為迅速，新輔料不斷問世。近十年來，開發的新輔料已達300多種，其中新劑型、新系統及其他制劑用輔料就達100多種。不但品種大幅度增加，而且型號多、規格全。如丙烯酸樹脂有數十個不同規格、型號的產品，卡波姆有5個產品，聚乙二醇有23個不同規格和型號。因此對輔料要進行風險評估、輔料和活性成分的相互作用的評估，建立藥用輔料的標準，關注輔料可能的不良反應，已經成為保障臨床用藥安全有效的重要部分。

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