醫(yī)院感染光滑念珠菌臨床分布及其耐藥性分析

黃健宇 賴在真 杜玲 徐鴻緒

隨著免疫抑制劑在臨床的廣泛使用，以及免疫缺陷人群的增多，光滑念珠菌在臨床的檢出率明顯增加，在某些地區(qū)光滑念珠菌已成為僅次于白色念珠菌的第2位或第3位的常見念珠菌［1］。為了解我院光滑念珠菌的臨床分布特點及耐藥情況，現(xiàn)對2007年～2009年醫(yī)院感染患者留取的標本中分離出的光滑念珠菌的臨床分布和耐藥性進行回顧性分析?，F(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 標本來源 2007年1月至2009年12月醫(yī)院各臨床科室送檢的疑似感染標本，包括ICU，內(nèi)科，外科，產(chǎn)房，器官移植，耳鼻喉科，綜合科室。標本類型分別有痰，尿液，大便，分泌物等。

1.2 試劑 沙保羅培養(yǎng)基和科瑪嘉顯色培養(yǎng)基由廣州迪景微生物科技有限公司提供;法國生物梅里埃公司生產(chǎn)的API 20C AUX酵母菌鑒定板條;ATB FUN GUS3真菌藥敏板條。

1.3 質(zhì)控菌株 白色假絲酵母菌ATCC 90028，克柔假絲酵母菌ATCC 6258，近平滑假絲酵母菌ATCC 22019，熱帶假絲酵母菌ATCC 750，光滑假絲酵母菌ATCC 90030。

1.4 鑒定培養(yǎng) 從沙保羅培養(yǎng)基中挑取單個菌落接種在科瑪嘉顯色培養(yǎng)基，在33～34℃環(huán)境中培養(yǎng)24～48 h，根據(jù)菌落顏色的差別和用法國生物梅里埃公司生產(chǎn)的API 20C AUX酵母菌鑒定到種。

1.5 藥敏試驗 從沙保羅培養(yǎng)基中挑取單個菌落于3 ml 0.85%NaCl Medium中，調(diào)制成2個麥氏濁度的菌懸液，再將其取出20μl加入到7 ml ATB F2 Medium中混勻，最后向ATB FUN GUS3真菌藥敏板條(含兩性霉素B、伏立康唑、5-氟胞嘧啶、氟康唑、伊曲康唑)各杯中加入135μlATB F2 Medium菌懸液，在33～37℃環(huán)境中培養(yǎng)24～48 h，然后讀取藥敏結(jié)果。

1.6 統(tǒng)計學分析 按照美國臨床和實驗室標準化研究所(CLSI)制定的藥敏試驗結(jié)果解釋標準，采用Whonet 5.3軟件統(tǒng)計分析結(jié)果。

2 結(jié)果

2.1 標本來源 光滑念珠菌分離鑒定的標本來源構(gòu)成中，痰液標本檢出率最高，其次是尿液，第三是大便(表1)。

2.2 真菌的鑒定結(jié)果 2007～2009年院臨床送檢標本中，共分離出真菌3436株，其中光滑念珠菌的檢出率呈逐年上升的趨勢，其分布構(gòu)成比分別為15.6%、16.3%、21.8%。

2.3 藥敏結(jié)果 光滑念珠菌對5種抗真菌藥物(兩性霉素B，伏立康唑，5-氟胞嘧啶，氟康唑，伊曲康唑)的藥敏結(jié)果，平均敏感率兩性霉素B 100%敏感，伏立康唑95.8%敏感，5-氟胞嘧啶97.9%敏感，氟康唑87.3%，伊曲康唑55.4%敏感。見表2。

表1 2007～2009年光滑念珠菌的標本來源與構(gòu)成比(%)

表2 2007～2009年光滑念珠菌對4種抗真菌藥物的敏感率(%)

3 討論

近年來，白色念珠菌在臨床真菌感染中有所下降，而非白色念珠菌感染有所升高，其中，由光滑念珠菌引起的感染明顯增加，由其所致的黏膜和系統(tǒng)性感染不斷增多，光滑念珠菌已成為臨床常見的念珠菌［2］。2007年～2009年我院微生物實驗室接收的臨床標本當中，光滑念珠菌的檢出率呈逐年遞增的趨勢，至2009年達21.8%，僅次于白色念珠菌，與文獻報道基本一致［1］。3年內(nèi)分離出的618株光滑念珠菌，2007年167例，2008年193例，2009年258例。內(nèi)科檢出的光滑念珠菌最多，分別占43.7%，48.2%，46.9%;其次是ICU 26.9%，25.9%，26.0%，主要原因可能跟這兩個科室的患者由于病情需要大量使用廣譜抗生素，免疫抑制劑以及各種介入性醫(yī)療手段增加有關。皮質(zhì)類固醇的應用導致炎性反應抑制，使吞噬細胞功能減弱，易誘發(fā)真菌感染。住院時間長、大劑量廣譜抗菌藥物的應用，是感染的直接誘因。嚴重的創(chuàng)傷患者急性應激反應，較大的創(chuàng)面特別是在醫(yī)療設備消毒不徹底的情況下均增加感染機會［3］。

2007～2009年光滑念珠菌在痰液中檢出率均最高，分別為40.7%、38.9%、31.0%，這與深部真菌感染部位以呼吸道為主有關。真菌在受損的呼吸道黏膜易于定植，一旦菌群失調(diào)及內(nèi)環(huán)境紊亂，則造成內(nèi)源性感染［4］。我們的分析結(jié)果顯示，尿液標本中光滑念珠菌的檢出率所占比例也較高，這跟患者長期留置導尿管有關。有文獻報道，光滑念珠菌是引起念珠菌血癥的第2位常見病原菌［5］，但由于本院血培養(yǎng)送檢率低，統(tǒng)計菌株較少，未見相關發(fā)現(xiàn)。

真菌感染的患者通常已患有一種或以上的嚴重基礎疾病，濫用抗真菌藥物會引起真菌感染類型的變遷和導致對抗真菌藥物的耐藥性增強［6］，因此對臨床標本分離培養(yǎng)出的真菌進行體外抗真菌藥物敏感試驗和進行真菌耐藥性監(jiān)測是非常重要的。本研究藥敏結(jié)果顯示，我院2007～2009年分離出的光滑念珠菌對兩性霉素B，伏立康唑，5-氟胞嘧啶這幾種常用的抗真菌藥物的敏感性較好，三年平均敏感率分別為100%、95.8%、97.9%，但兩性霉素B的腎毒性大，臨床應用受到限制。其次為氟康唑，三年平均敏感率87.3%，伊曲康唑的抑菌效果則較差，僅為55.4%。從我們體外藥敏情況看，光滑念珠菌的耐藥情況雖然并不嚴重，但是在治療上頗為棘手，因為感染的患者通常病情復雜且嚴重，有較高的死亡率，抗真菌藥物可選擇范圍不大，因此臨床微生物室必須做好光滑念珠菌的分離培養(yǎng)及藥敏實驗，重視真菌耐藥性監(jiān)測［7］。

目前認為光滑念珠菌感染的危險因素包括:糖尿病、長時間住院、手術、導尿、靜脈留置導管以及使用過氟康唑等。因此，應加強對光滑念珠菌的研究以進一步明確光滑念珠菌感染的危險因素和耐藥變化趨勢。根據(jù)藥敏實驗合理使用抗菌藥物，盡可能避免長時間使用多種廣譜抗菌藥物，減少不必要的創(chuàng)傷性檢查，提高院內(nèi)繼發(fā)真菌感染的意識等措施，減少真菌感染的機會。

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［3］張春和，金艷，陳東科.臨床無菌體液標本中真菌分離及耐藥性分析.中華醫(yī)院感染學雜志，2008，18(10):1489-1491.

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［5］Trick WE，F(xiàn)ridkin SK ，Edwards J R ，et al.Secular trend of hospital-acquired candidemia among intensive care unit patients in the United States during 1989-1999.Clin Infect Dis，2002，35(5):627-360.

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［7］楊繼勇，趙慧.酵母菌引起深部感染的病愿學特征.中華醫(yī)院感染學雜志，2003，13(3):284-285.