高效液相色譜法測定鹽酸利多卡因膠漿的含量

董 煜

（遼寧省大連市藥品檢驗所，遼寧 大連 116021）

鹽酸利多卡因膠漿是局部麻醉藥，臨床上用于消化道內窺鏡檢查時的局部麻醉。藥典中[1]采用有機溶劑提取蒸干后電位法測定含量。本試驗采用高效液相色譜（HPLC）法測定鹽酸利多卡因含量，具有簡單、靈敏度高、專屬性強、準確可靠等優點，報道如下。

1 儀器與試藥

Waters2695型高效液相色譜儀（二極管陣列紫外檢測器）。鹽酸利多卡因膠漿（A1，A2，市售品）；鹽酸利多卡因對照品（批號為100341-200301，含量為93.5%，中國藥品生物制品檢定所）；乙腈為色譜純，其他試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 色譜條件及系統適用性試驗

色譜柱：Alltima C18不銹鋼柱（250 mm ×4.6 mm，5 μm）；流動相[1]：磷酸鹽緩沖液（取1 mol/L磷酸二氫鈉溶液1.3 mL和0.5 mol/L磷酸氫二鈉溶液32.5 mL，置1 000 mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，用磷酸調 pH至 8.0）-乙腈（50∶50）；檢測波長：254 nm；流速：1.0 mL/min；柱溫：30 ℃；進樣量：20 μL。在此色譜條件下，鹽酸利多卡因峰的保留時間約為13 min，理論塔板數按鹽酸利多卡因峰計為7 000。高效液相色譜圖見圖1。

2.2 溶液制備

精密稱取樣品1 g（約相當于鹽酸利多卡因20 mg），置10 mL量瓶中，加流動相適量溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，即得供試品溶液。另取對照品適量，精密稱定，用流動相溶解并定量稀釋每1 mL約含2 mg的溶液，作為對照品溶液。

2.3 方法學考察

線性關系考察：取鹽酸利多卡因對照品約53.00 mg，精密稱定，置25 mL量瓶中，加流動相適量，振搖使溶解并稀釋至刻度，搖勻。在上述色譜條件下，分別進樣 10，16，20，24，30 μL（n=3），記錄色譜圖，以質量濃度 X為橫坐標、峰面積 Y為縱坐標繪制標準曲線，線性回歸方程為 Y=2 685 764 X+65 301，r=1.000 0（n=6）。結果表明質量濃度在0.991～2.973 mg/mL范圍內與峰面積線性關系良好。

加樣回收試驗:取已知含量的樣品6份（A1），精密稱定，按2.2項下方法制備供試品溶液，精密量取續濾液5.0 mL，各精密加入對照品溶液5.0 mL，搖勻，分為3組，按2.1項下色譜條件測定，3 組樣品分別進樣 16，20，24 μL（相當于標示量的 80% ，100% ，120%），計算回收率。結果見表1。

圖1 高效液相色譜圖

表1 鹽酸利多卡因加樣回收試驗結果（n=6）

穩定性試驗：取同一供試品溶液，分別于0，1，2，4，8 h時進樣。結果峰面積基本不變，表明溶液穩定性良好，能滿足測定要求。

精密度試驗：取同一對照品溶液，連續5次進樣測定。結果峰面積的 RSD為0.9%（n=5）。

2.4 樣品含量測定

取樣品，依法制備供試品溶液并測定，按外標法以峰面積計算含量，與電位法[1]測定結果比較，見表2。

表2 樣品含量測定結果

3 討論

采用有機溶劑提取蒸干后電位法測定含量，操作煩瑣、費時、誤差大。采用HPLC法測定其含量，簡單、靈敏度高、專屬性強、準確可靠。

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（二部）[M].北京：化學工業出版社，2005：518.