復(fù)方利血平片中鹽酸異丙嗪的含量測(cè)定及含量均勻度考察

辛俊衡

（廣西壯族自治區(qū)梧州食品藥品檢驗(yàn)所，廣西 梧州 543002）

復(fù)方利血平片曾用名為復(fù)方降壓片，主成分為利血平、氫氯噻嗪、維生素B6、混旋泛酸鈣、三硅酸鎂、氯化鉀、維生素B1、硫酸雙肼屈嗪、鹽酸異丙嗪。現(xiàn)行國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)尚未收載有關(guān)該片劑中各主要成分的含量測(cè)定方法，已有文獻(xiàn)[1-4]報(bào)道了采用高效液相色譜（HPLC）法測(cè)定，但鹽酸異丙嗪的含量及含量均勻度考察尚未見(jiàn)報(bào)道。本試驗(yàn)采用HPLC法測(cè)定鹽酸異丙嗪的含量及含量均勻度，結(jié)果滿意，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

安捷倫1200型高效液相色譜儀，包括G1311A四元泵，G1329A全自動(dòng)進(jìn)樣器，G1314B紫外檢測(cè)器，Chemstation色譜工作站；島津UV-2450型紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)；Sartorius BP211D型電子天平（d=0.01 mg，80 g）。對(duì)照品鹽酸異丙嗪（批號(hào)為 100422-200501）、利血平（批號(hào)為100041-200311）、氫氯噻嗪（批號(hào)為10030P-200001）、維生素B6（批號(hào)為100116-200502）、泛酸鈣（批號(hào)為100370-200301）、維生素B1（批號(hào)為100390-200502）、硫酸雙肼屈嗪（批號(hào)為100514-200301），均由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供；淀粉（梧州市冰泉實(shí)業(yè)有限公司，批號(hào)為081028）；乙腈為色譜純；硬脂酸鎂、三硅酸鎂、氯化鉀、十二烷基硫酸鈉、三乙胺、磷酸均為分析純；復(fù)方利血平片（每片含鹽酸異丙嗪2.1 mg，市售品）。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱：Agilent TC C18柱（250 mm ×4.6 mm，5 μm）；流動(dòng)相：乙腈-0.3%十二烷基硫酸鈉溶液-磷酸（60∶40∶0.02，用三乙胺調(diào)pH 至 3.3）；流速：1.0 mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：250 nm；進(jìn)樣量：20 μL。

2.2 溶液制備

精密稱取鹽酸異丙嗪對(duì)照品42 mg，置100 mL量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照品貯備液；精密量取該貯備液5 mL，置50 mL量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，即得對(duì)照品溶液。取樣品20片，精密稱定，研細(xì)，取約1片的量，精密稱定，置50 mL量瓶中，加流動(dòng)相適量振搖30 min使溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得供試品溶液。按處方比例配制不含鹽酸異丙嗪的陰性對(duì)照樣品，照供試品溶液制備方法配制陰性對(duì)照品溶液。

2.3 方法學(xué)考察

系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：分別取對(duì)照品溶液、供試品溶液、陰性對(duì)照品溶液注入液相色譜儀，記錄色譜圖（見(jiàn)圖1）。結(jié)果陰性對(duì)照品溶液在對(duì)照品溶液的色譜峰相應(yīng)位置無(wú)干擾峰，對(duì)照品峰保留時(shí)間約11 min，理論塔板數(shù)為11 624。

圖1 高效液相色譜圖

線性關(guān)系考察：精密吸取鹽酸異丙嗪對(duì)照品貯備液3.0，4.0，5.0，6.0，7.0 mL，分別置50 mL量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，分別精密吸取上述溶液20 μL注入液相色譜儀，記錄峰面積。以峰面積 Y對(duì)進(jìn)樣量 X（μg）進(jìn)行線性回歸，得回歸方程為Y=5 319 X+5，r=0.999 9（n=5）。結(jié)果表明鹽酸異丙嗪進(jìn)樣量在0.504～1.176 μg范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系。

精密度試驗(yàn)：取對(duì)照品溶液20 μL，連續(xù)進(jìn)樣6次。結(jié)果峰面積的 RSD為0.2%（n=6），表明儀器精密度良好。

重現(xiàn)性試驗(yàn)：取同一批樣品（批號(hào)為080107）6份，按樣品含量測(cè)定方法測(cè)定。結(jié)果含量為96.8%，RSD=0.4%（n=6），表明方法重現(xiàn)性良好。

穩(wěn)定性試驗(yàn)：取同一供試品溶液（批號(hào)為 080107），于 0，2，4，6，8 h時(shí)分別進(jìn)樣，依法測(cè)定峰面積。結(jié)果的 RSD=0.3%（n=5）。

加樣回收試驗(yàn)：分別精密稱取已知含量的樣品（批號(hào)為080102，含量98.0%，平均片重0.110 2 g）9份，置50 mL量瓶中，精密加入對(duì)照品貯備液（0.42 mg/mL）2.0，2.5，3.0 mL，按供試品溶液制備方法制備，依法測(cè)定含量，計(jì)算回收率。結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 加樣回收試驗(yàn)結(jié)果（n=9）

2.4 樣品含量測(cè)定

取對(duì)照品溶液與供試品溶液，各進(jìn)樣 20 μL，依法測(cè)定，記錄峰面積，按外標(biāo)法計(jì)算含量。結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 樣品含量測(cè)定結(jié)果（n=3）

2.5 樣品含量均勻度考察

取樣品1片，置50 mL量瓶中，按供試品溶液含量測(cè)定方法測(cè)定含量，考察含量均勻度，結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 樣品含量均勻度測(cè)定結(jié)果

3 討論

取鹽酸異丙嗪對(duì)照品溶液進(jìn)行全波段掃描，結(jié)果在250 nm波長(zhǎng)附近有最大吸收，故選取250 nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)。參照文獻(xiàn)進(jìn)行流動(dòng)相選擇，分別比較了甲醇-乙腈-水[2]、乙腈-水[3]、庚烷磺酸鈉溶液-乙腈-甲醇-三乙胺[4]等流動(dòng)相，結(jié)果它們與本法的分離效果都比較好，甲醇、乙腈系統(tǒng)有些拖尾，加三乙胺掃尾，最后采用本法的流動(dòng)相。

制劑中鹽酸異丙嗪為抗組胺藥物，是制劑中主要成分之一，但在制劑中含量低，故考察了3批不同廠家產(chǎn)品中鹽酸異丙嗪的含量及含量均勻度。結(jié)果含量均在一般片劑的限度（標(biāo)示量的90.0%～110.0%）內(nèi)，但含量均勻度的 A+1.80 s有2批接近最高限度15.0，說(shuō)明含量均勻度不是很好。標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)鹽酸異丙嗪不作定性和定量檢驗(yàn)，故在生產(chǎn)中為了提高投料準(zhǔn)確性和混料均勻性，應(yīng)進(jìn)行這兩項(xiàng)質(zhì)量控制。本法專屬?gòu)?qiáng)，準(zhǔn)確度高，可參照使用。

[1]趙雪梅，張淑琴.反相高效液相色譜法測(cè)定復(fù)方利血平片中6個(gè)組分的含量[J]. 藥物分析雜志，2003，23（5）：335-338.

[2]靳寶峰，溫麗萍，劉 偉，等.高效液相色譜法用于復(fù)方降壓片含量的測(cè)定[J]. 沈陽(yáng)部隊(duì)醫(yī)藥，1994，7（1）：50-51.

[3]方東偉.高效液相色譜法測(cè)定復(fù)方利血平片中氫氯噻嗪含量[J].中國(guó)藥業(yè)，2005，l4（9）：51.

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