非小細胞肺癌外周血內皮細胞關系初步探討

程偉雄 吳北林

目前,內皮細胞(endothelial cells,ECs)相關的血管再生及損傷血管修復已經成為腫瘤等疾病中的研究熱點[1-7]。本研究觀察NSCLC患者外周血中CECs改變,并與臨床相關指標進行綜合分析，進一步論證其在肺癌病變發生發展中的作用以及臨床價值。

1 材料與方法

1.1 標本來源 選擇2006年5月～2009年4月我院40例住院患者,全部患者均經病理組織學證實為NSCLC, 40例NSCLC患者根據臨床資料分為Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期，每期各10例。并根據治療前后分組。同時收集腫瘤標記物NSE、CYFRA 21-1、β2-MG、FIB等。NSCLC組40例，其中男25例，女15例，年齡(45.2±12.3)歲；對照組10例，為正常老年人，其中男6例，女4例，年齡(45.2±12.3)歲。兩組一般情況具有可比性。

1.2 CECs的檢測 細胞表面標志采用CD 45-Cy 5，CD31-FITC標記。內皮細胞(ECs): CD31+/CD45-。

1.3 檢測方法 采用熒光抗體標記,流式細胞儀檢測。抽取外周血3m l，抗凝，血標本用PBS液2倍稀釋，Ficoll分離，1800r/m in離心20m in，PBS洗2次。將細胞加入96孔板中，每孔5×105個細胞，加入抗體5μl，4℃孵育30～60m in，用PBS液洗滌標本2次，100μl的1%多聚甲醛固定，流式細胞儀檢測。

1.4 統計學分析 統計數據采用SPSS11.0統計軟件包，用均數±標準差(±s)表示，t檢驗分析兩組數據間均數的差異,方差分析法分析多組數據間均數的差異。采用Person相關系數進行相關性分析。

2 結果

2.1 肺癌組與對照組患者外周血中CECs變化情況

肺癌組外周血中CECs的含量治療前Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期分別為(0.126±0.004)、(0.187±0.007)、(0.225±0.010)、(0.273±0.008)。治療后Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期分別為(0.152±0.006)、(0.235±0.008)、(0.256±0.010)、(0.307±0.020)。對照組為(0.061±0.011)。肺癌患者外周血中的ECs含量均高于正常對照組(P＜0.05)，Ⅰ期與對照組比較無統計學差異(P＞0.05)，Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期與對照組比較有統計學差異(P＜0.05)。肺癌患者治療前后兩組比較無統計學差異(P＞0.05)，見表1。

表1 肺癌患者治療前后兩組外周血中CECs變化情況比較

2.2 肺癌患者治療前外周血中ECs與腫瘤標記物NSE、CYFRA 21-1、β2-MG、FIB相關性分析 在肺癌患者中，ECs數值與β2-MG、FIB有正相關性，(r值分別為0.218，0.224，P＜0.05)，與腫瘤標記物NSE、CYFRA 21-1、無相關性。

3 討論

腫瘤是一個異常細胞生長和擴散的增殖性疾病, 腫瘤的新生血管很大程度上和內皮細胞的功能紊亂有關，所以抑制腫瘤新生血管是治療腫瘤的一個策略，也是目前研究熱點[1-7]。目前，化療和抑制血管生成抑制劑聯合應用已成為腫瘤治療的新方法。這一新方式使得受損腫瘤內皮細胞沒有時間康復,因此剝奪了腫瘤生長與轉移所必需的營養支持。那么,如何評定血管生成抑制劑對于血管內皮的療效？目前，許多研究方法檢測內皮細胞的產物或調控因子，較理想的方法是用EC的水平來估計新生血管抑制的程度和功能紊亂情況，隨著內皮細胞免疫標志的證實，用流式細胞儀快速、準確測定內皮細胞本身成為可能[4-6]。本研究通過觀察治療前后EC水平的變化，并與對照組比較，發現內皮細胞在肺癌患者中數目增多，與文獻報道一致。由于實際困難，未能使用更準確的CD146標記[8]。但隨著對內皮功能的深入研究，以及對內皮抑素臨床實驗的完成，EC作為一個腫瘤新標記以及在藥物療效監測、治療靶點等多方面的作用將越來越顯現。

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