四君子湯對脾虛犬體重及部分血清生化指標的影響*

石達友,李盛強,朱華君,鄒導夫,龍耀鎵,郭世寧

(華南農業大學獸醫學院,廣東廣州 510642)

四君子湯對脾虛犬體重及部分血清生化指標的影響*

石達友,李盛強,朱華君,鄒導夫,龍耀鎵,郭世寧

(華南農業大學獸醫學院,廣東廣州 510642)

通過皮下注射利血平復制犬脾虛證動物模型,觀察犬臨床體征、體重及部分血清生化指標變化情況,研究四君子湯對脾虛犬體重及血清生化水平的影響。結果顯示,在犬出現脾虛證候后,體重與血清總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLO)水平均顯著低于空白對照組(P＜0.05);用四君子湯治療7 d后,脾虛犬體重與血清TP、ALB、GLO均恢復到與空白對照組水平接近,而未經治療的脾虛試驗組犬各項指標未恢復到與空白對照組接近,與空白對照組和四君子湯治療組比較呈顯著性差異(P＜0.05)。試驗結果表明,通過皮下注射利血平可以復制犬脾虛證動物模型,用四君子湯治療犬脾虛證具有明顯的療效。

脾虛;血清;生化指標;四君子湯

脾虛證模型是中醫動物模型中最重要的一種,眾多文獻研究報道顯示,脾虛證具有許多中醫證候所共有的模糊的、全身的、慢性的、虛性的、與正常體質呈漸變關系的病理特點。因此,研究中醫脾虛證動物模型,將有助于對中醫最重要的兩類臟腑虛證之一的脾虛證有更加深入的認識。從中國研究脾虛動物30多年時間以來,圍繞中醫脾虛證動物模型研究的文獻報道非常多,所涉及的研究領域和研究內容也非常廣泛,主要包括從動物臨床體征[1]、免疫功能[2-3]、神經內分泌功能[2,4]、胃腸組織學[5-6]、細胞線粒體功能[7]和機體自由基代謝方面研究[8-9]。在中醫脾虛證動物模型建立中采用小鼠、大鼠、兔等實驗動物比較常見,而采用犬作為實驗動物的文獻目前未見公開報道。由于犬的生理結構比小鼠、大鼠、家兔等醫學常用實驗動物更接近人類自身,因此本試驗中采用犬來復制中醫脾虛證動物模型,以求進一步為中醫脾虛證動物模型的研究提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實驗動物 廣州增城本地犬,3月齡大小,體重在2.5 kg～3 kg之間,購回之后進行常規免疫與驅蟲等,自由采食與飲水,隔離飼養觀察7 d,確定為健康犬只后方用于試驗。

1.1.2 主要儀器與器材 SYSMEX-1800i型全自動生化分析儀為日本希森美康公司產品,TDL-40B型水平轉子離心機為上海安亭科學儀器廠產品。

1.1.3 試劑 總蛋白(T P)、白蛋白(ALB)試劑盒,購于南京建成生物工程研究所;利血平注射液:規格為1 mL和1 mg,購自廣東邦民制藥廠有限公司。

1.2 方法

1.2.1 中藥制備 四君子湯口服液制備,根據文獻報道[10],用人參(用西洋參代替)、茯苓、白術、甘草按2∶2∶2∶1組方,先用水浸泡 2 h后,一起在水中煎沸2次,每次40 min,合并濾液,80℃常壓濃縮為0.5 g/mL的藥液,4℃保存備用;

1.2.2 試驗分組及處理 15只犬,隨機分為3組,分別為第1組、2組和3組,5只/組。第1組為空白對照組,第2組為脾虛自然恢復組,第3組為脾虛中藥治療組。用利血平進行脾虛造模成功后,用含生藥1 g/mL的四君子湯煎液按5 mL/kg體重給第3組犬灌胃,灌藥持續7 d,待第3組試驗犬臨床體征恢復正常后停止試驗;第1組、2組采用等量生理鹽水灌胃。

1.2.3 脾虛模型造模方法 根據文獻報道[11],用犬進行預試驗后,確定每日按0.15 mg/kg劑量給2組、3組試驗犬皮下注射利血平,脾虛動物的主要臨床癥狀和體征,主要包括精神倦怠,嗜臥,懶動,拱背,扎堆 ,眼瞇 ;毛枯 ,甚至稀少 ;耳 、尾色白 ;嚴重者在受驚動時無神,抓取時掙扎無力,腹面被毛憔悴;軟便,便溏或泄瀉,受激排便率增高;體重增長減慢或體重下降;體溫不變或略有降低;食量減少等臨床癥狀[12]。

1.2.4 試驗犬體重變化與血液生化分析 分別在實驗動物脾虛造模前、造模成功后和治療結束后,對試驗犬空腹稱重并記錄結果。從犬前肢靜脈采血2 mL于離心管,靜置后以2 500 r/min離心5 min,析出血清,分裝于1.5 mL塑料離心管中,用SYSMEX-1800i型全自動生化分析儀測定血清生化總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLO)水平。

1.2.5 數據分析 應用SPSS13.0統計分析軟件對數據進行單因子方差分析和相關性分析,再進行多重比較。

2 結果

2.1 犬臨床體征變化情況

用利血平給犬注射約10 d,臨床上表現出食欲不振、消瘦、糞便溏泄、倦怠乏力、毛發不榮、萎靡嗜睡、瞇眼等癥狀,判定試驗犬出現中醫脾虛證候[12-13]。經四君子湯治療7 d后,第3組的臨床癥狀基本上消失,而第2組犬的脾虛癥狀部分消失,表明四君子湯對中醫脾虛證有較好的治療效果。

2.2 犬體重變化情況

由表1可見試驗犬3次體重測量結果顯示,在脾虛造模試驗前,3個組試驗犬體重差異不顯著(P＞0.05),而在脾虛造模成功后,第2組和第3組犬體重均顯著低于1組(P＜0.05);在經過四君子湯治療結束后,第2組犬體重均顯著低于第1組和第3組,同時第3組組犬也顯著低于第1組(P＜0.05)。在各試驗組內的3次體重結果顯示,第1組犬體重試驗期間一直呈顯著性增長(P＜0.05);四君子湯治療組犬體重在第1、2次測定結果比較無顯著差異(P＞0.05),但四君子湯治療結束后,其體重顯著高于前兩次(P＜0.05);而第1組犬體重在3次稱重結果之間無顯著差異(P＞0.05)。

2.3 犬血清總蛋白、白蛋白、球蛋白變化情況

由表2～表4結果顯示,第2組、3組犬在脾虛造模成功后,其血清總蛋白、白蛋白、球蛋白均顯著低于第1組(P＜0.05);在四君子湯治療結束后,第2組犬血清三項蛋白含量均顯著低于第1組、3組(P＜0.05)。組內結果比較顯示,第3組試驗犬經治療后,其血清三項蛋白含量基本上恢復到造模前正常水平,而第2組犬血清三項蛋白含量未完全恢復到正常水平,與造模前比較差異不顯著(P＞0.05)。

表1 各組犬體重變化Table 1 Weight changes in each g roup of caninekg

表2 各組犬血清總蛋白變化Table 2 Changes of seral total protein in each g roup of canineg/L

表3 各組犬血清白蛋白變化Table 3 Changes of seral abumin in each g roup of canine g/L

表4 各組犬血清球蛋白變化Table 4 Changes of seral globulin in each group of canine g/L

3 討論

中醫理論認為,脾主運化,為氣血生化之源,脾虛化源不足,不能充達肢體、肌肉,故肢體倦怠,神疲少力,形體消瘦;脾虛水谷精氣化生不足,宗氣亦虛,故少氣懶言。近30多年的研究文獻報道顯示,在研究中醫脾虛實質的工作中使用適量利血平可以在大鼠、家兔、豚鼠等多種動物中制成中醫脾虛證動物模型,其表現癥狀與人類常見的的消化機能紊亂為主,或伴有某些植物神經功能障礙的脾虛證很相似,可靠性和重現性強,簡單易行。

在現代中醫學研究試驗中,不少學者從動物脾虛臨床體征與血清生化等指標方面進行研究,并用四君子湯進行佐證,均取得了較好的效果。四君子湯由人參、白術、茯苓、甘草組成,有益氣健脾之功。方中以人參為君,甘溫大補元氣,健脾養胃;以白術為臣,苦溫健脾燥濕;佐以茯苓,甘淡滲濕健脾;苓術合用,健脾除濕之功更強,促其運化;使以炙甘草,甘溫調中。研究報道顯示[14],四君子湯多糖具有顯著的免疫調節作用,是中藥治療脾虛證的有效方劑。

在本試驗中脾虛組犬臨床體征表現看,比較符合中醫關于脾虛肢體倦怠、神疲少力的理論;而且從外觀看,動物倦怠少動,形體消瘦,便溏,皮毛無光澤,說明脾虛模型建立成功[13]。同時,兩脾虛實驗組犬體重與空白對照組比較顯著下降,脾虛犬血清總蛋白、白蛋白、球蛋白水平顯著降低。究其原因,一是由于慢性腹瀉可使較多的營養素隨糞便排出,二是由于脾虛證犬的小腸對營養素的吸收功能減退,從而導致肝臟合成蛋白的功能障礙。在本試驗中,脾虛組犬在經四君子湯治療后,其體重與血清生化水平恢復到接近空白對照組水平,而未經四君子湯治療的脾虛犬的體重與血清生化水平均均顯著低于空白對照組水平(P＜0.05)。結果表明,四君子湯對犬脾虛證有較好的療效。

[1]賈甄偉,趙 寧,張皖東,等.理中丸和四君子湯對利血平脾虛大鼠自主活動的影響[J].中國中醫藥信息雜志,2006,13(5):34-35.

[2]溫慶祥,張 蕾,何俊仁,等.四君子湯對脾虛大鼠神經內分泌免疫網絡功能的影響[J].中國中西醫結合消化雜志,2005,13(13):124-125.

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[5]趙 寧,張皖東,賈紅偉,等.四君子湯對利血平所致脾虛大鼠腸道黏膜TG F-β和 TNF-α表達的影響[J].中國中醫基礎醫學雜志,2007,13(1):44-46.

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[8]司方方,涂劍鋒,劉天龍,等.四君子湯超微粉對脾虛小鼠總抗氧化能力和NO的影響[J].動物醫學進展,2006,27(3):75-77.

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[13]趙 寧,賈紅偉,張皖東,等.四君子湯和理中丸對脾虛證影響的研究[J].江西中醫學院學報,2005,17(2):66-68.

[14]劉玉紅.四君子湯中多糖的提取和含量測定[J].亞太傳統醫藥,2009,5(2):43-44.

Effects of Decoction of Four Mild Drugs on the Body Weight and the Part of
Seral Biochemical Indicators in Dogs with Syndrome of Splenic Asthenia

SHI Da-you,LI Sheng-qiang,ZHU Hua-jun,ZHOU Dao-fu,LONG Yao-jia,GUO Shi-ning

(College of Veterinary Medicine,South China Agricultural University,Guangzhou,Guangdong,510642,China)

A splenic asthenia model was made by subcutaneous injection of reserpine in dogs.The effects of Decoction of Four Mild Drugs on clinical symptom,body weight and seral biochemical indicators were observed.The results showed that the body weight,the level of seral total protein(TP),seral albumin(ALB)and seral globulin(GLO)obviously decreased(P＜0.05)after the dog appeared syndrome of splenic asthenia.After treating the dog with syndrome of splenic asthenia by Decoction of Four Mild Drugs for 7 days,the observed indexes recovered close to the blank control group level.The other splenic asthenia dogs were not treated,so the observed indexes did not recover to the blank control group level(P＜0.05).The finding showed that animal model of spleen deficiency can be replicated by subcutaneous injection of reserpine in dogs,and Decoction of Four Mild Drugs had obvious effect on treating the dog with syndrome of splenic asthenia.

splenic asthenia;serum;biochemical index;decoction of four mild drugs

S859.3

A

1007-5038(2010)09-0029-04

2010-03-02

廣東省自然科學基金項目;國家科技支撐計劃子課題(9151008002000003;2008BADB4B01-6)

石達友(1977-),男,四川成都人,講師,博士研究生,主要從事中獸醫醫藥教學與科研工作。