均勻設計優選藏藥如達胃寧的組方Δ

賴先榮，吳秦西，向永臣，王蘭，李勝容，楊仕軍

（1.成都中醫藥大學，成都市 610075；2.成都市第五人民醫院，成都市 611130；3.重慶市中藥研究院制藥廠，重慶市 400065；4.四川省江源天然產物有限公司，洪雅市 620360）

消化性潰瘍（簡稱潰瘍病），臨床表現以腹痛為主，疼痛限于上腹部，有慢性、周期性和節律性3個特點，嚴重影響人們的工作及生活質量[1]。藏藥如達胃寧根據藏醫傳統醫藥理論組方，以沙棘、川木香作為組方藥味，用于治療潰瘍病。

沙棘為胡頹子科植物沙棘Hippophae rhamnoides L.的干燥成熟果實，功能消食化滯、活血散瘀，用于治療消化不良、食積腹痛、瘀血等證[2]，藏醫用于培根病、消化不良、胃潰瘍等病癥的治療[3]；沙棘果肉油具有抑制胃總酸排出量及增加胃黏液分泌量的作用[4]。

川木香為菊科川木香屬植物川木香Vladimiria souliei（Franch.）Ling 及灰毛川木香 Vladimiria souliei（Franch.）Ling var.cinerea Ling的干燥根，功能行氣止痛，用于治療脘腹脹痛、肝膽疼痛等癥[3，5]；在藏醫經典名著《月王藥診》、《四部醫典》、《晶珠本草》中也有記載，功能清培根熱、化瘀止痛、健脾消積，治培根熱癥、氣血量不和所致的胃腹脹痛、脅痛等癥[6]。川木香中分離得到的乙酸乙酯部位，具有抑制實驗性胃潰瘍形成的作用[7]。

筆者以潰瘍指數及潰瘍抑制率為指標，采用均勻設計方法對藏藥如達胃寧的組方比例進行篩選和優化，為進一步探索其防治潰瘍病的作用機制提供理論基礎。

1 材料

1.1 儀器

BS110型電子天平（北京賽多利斯天平有限公司）；游標卡尺（無錫錫工量具有限公司）。

1.2 試藥

沙棘（壓榨離心法制成沙棘果油提取物，提取物收率為10%，批號：20070401）、川木香（乙醇回流提取-醋酸乙酯萃取法制成川木香提取物，提取物收率為6%，批號：20070401）均由成都中醫藥大學民族醫藥研究所提供；鹽酸雷尼替丁膠囊（西南合成制藥股份有限公司，批號：061003）；利血平注射液（廣東邦民制藥廠有限公司，批號：060308）；甲醛溶液（37%～40%，成都市科龍化工試劑廠，批號：20060124）；聚乙二醇400（成都市科龍化工試劑廠，批號：20060306）。

1.3 動物

普通級昆明種小鼠170只，♀♂兼半，體質量18～22 g，由四川省醫學科學院實驗動物研究所提供（動物合格證號：SCXK（川）2004-15）。

2 方法與結果

2.1 篩選實驗方法與結果

采用均勻設計試驗設計篩選實驗，選用混合水平的試驗表U6（6×3）[8]進行試驗，同時采用單因素試驗方法考察組方各藥味抑制潰瘍形成的作用。

取小鼠130只，隨機分13組，每組10只，分別為正常（給予同體積生理鹽水）、模型（給予同體積含水聚乙二醇-400溶液）、雷尼替?。ńo予50 mg·kg-1雷尼替丁的含水聚乙二醇-400溶液）、組方設計各劑量（按表1設計劑量給予藥物的含水聚乙二醇-400溶液）、各給藥劑量（按表2設計劑量給予藥物的含水聚乙二醇-400溶液）組。ig給藥（0.2 mL·20 g-1），連續7 d，實驗前禁食不禁水24 h，各組再給藥1次，1 h后sc利血平10 mg·kg-（1正常組sc等量生理鹽水），6 h后頸椎脫臼處死動物，解剖取胃，結扎胃的賁門部和幽門部并經胃壁向胃腔內注入1%甲醛2 mL，將胃取出浸入1%甲醛溶液中，30 min后沿胃大彎剪開，洗凈胃內容物，將胃黏膜展開，游標卡尺測定胃黏膜損傷的程度（計分方法：無損傷為0分，瘀血點為1分，線狀瘀血長度＜1 mm為2分，1～2 mm為3分，2～3 mm為4分，＞3 mm為5分），計算潰瘍指數、潰瘍抑制率。數據以±s 表示。各組潰瘍指數數據處理采用SPSS 10.00統計軟件，各組實驗數據方差齊性，采用單因素方差分析的兩兩比較方法進行統計分析。因素水平見表1；均勻設計試驗結果見表2。潰瘍抑制率（%）＝（模型組平均潰瘍指數－各給藥劑量組平均潰瘍指數）/模型組平均潰瘍指數×100%。

表1 因素水平Tab 1 Factors and levels

表2 均勻設計試驗結果Tab 2 Results of uniform design

各均勻設計組數據處理采用DPS統計軟件，進行二次多項式逐步回歸分析，進行數學模型最優化的尋優處理。

顯著水平P＝0.06（P＜0.1）；相關系數R＝0.95

顯著水平P＝0.06（P＜0.1）；相關系數R＝0.95

由表2可知，與模型組比較，均勻設計組、各單味藥組均能顯著降低潰瘍指數（P＜0.01），具有顯著抑制潰瘍形成的作用。回歸方程（1）、（2）的尋優結果表明，藏藥如達胃寧組方的優化比例為沙棘（X1）1.5份、川木香（X2）9份。

2.2 驗證實驗方法與結果

取小鼠40只，隨機分4組，每組10只，分別為正常（給予同體積生理鹽水）、模型（給予同體積含水聚乙二醇-400）、雷尼替丁（50 mg·kg-1雷尼替丁的含水聚乙二醇-400溶液）、優化比例（按藏藥如達胃寧組方的優化比例給予藥物的含水聚乙二醇-400溶液）組。按“2.1”項下方法，依法計算潰瘍指數、潰瘍抑制率。驗證實驗結果見表3。

表3 驗證實驗結果Tab 3 Results of verifying test

由表3可知，與模型組比較，雷尼替丁及優化比例組（沙棘1.5份、川木香9份）均能顯著降低潰瘍指數（P＜0.01或P＜0.05），具有顯著抑制潰瘍形成的作用。

3 討論

本研究表明，藏藥如達胃寧組方的優化比例為沙棘1.5份、川木香9份，能顯著降低潰瘍指數（P＜0.01），為進一步深入探索藏藥如達胃寧防治潰瘍病的作用機制建立了良好基礎。

潰瘍病防治的關鍵在于改善潰瘍愈合質量，降低潰瘍復發率。沙棘和川木香均可用于潰瘍病的治療。沙棘消食化滯、活血散瘀，可以抑制胃蛋白酶的活性和降低游離酸，針對潰瘍病發病的愈合期和疤痕期（如脾胃虛弱、血瘀等證），緩則治其本；川木香行氣止痛，保護胃黏膜，兼有止痛作用，急則治其標，針對潰瘍病發病的活動期（如胃脘疼痛等癥）。通過均勻設計試驗探索藥物組方優化比例，表明沙棘油提取物與川木香提取物以一定比例配伍配比后，能提高抗潰瘍作用，具有協同增效作用，二者合用，急則治其標、緩則治其本，治療作用互補、標本兼治，共同用于潰瘍病的治療。

均勻設計試驗結果表明，復方抑制潰瘍形成作用中川木香的貢獻較大，發揮了行氣止痛作用，為傳統藏醫藥理論中應用川木香“生肌脂”、“愈潰瘍”提供了理論證據，有利于拓展藏藥在潰瘍病治療上的用途。

[1]陸星華，于中麟，江鴻志，等.潰瘍病的流行病學研究——北京地區358644例胃鏡分析[J].中華消化雜志，1996，16（3）：152.

[2]國家藥典委員會編.中華人民共和國藥典（一部）[S].2005年版.北京：化學工業出版社，2005：25、127.

[3]羅達尚主編.中華藏本草[M].北京：民族出版社，1997：162、265.

[4]邢建峰，董亞琳，王秉文，等.沙棘果肉油對大鼠胃液分泌的影響及抗胃潰瘍作用[J].中國藥房，2003，14（8）：461.

[5]王戰國，賴先榮，肖瑩瑩，等.川木香的研究進展[J].中國藥房，2006，17（4）：303.

[6]賴先榮，孟保華，江志堯，等.川木香對實驗性胃潰瘍形成的抑制作用研究[J].現代生物醫學進展，2008，8（1）：34.

[7]賴先榮.川木香有效組分抗消化性潰瘍的研究進展[J].第四軍醫大學學報，2006，27（增刊）：45.

[8]方開泰.均勻設計與均勻設計表[M].北京：科學出版社，1994：98.