復方丹參片與丹參片對冠狀動脈粥樣硬化患者血小板活化抑制作用的比較

姬曉鵬，蔣 斌，潘 琳，黃 河，宋其貴，馮中培

（四川大竹縣人民醫院，大竹縣 635100）

血小板活化在冠心病、心肌缺血、動脈粥樣硬化的發生、進展、轉歸中具有重要作用。冠狀動脈內血栓主要由血小板組成，其不僅可以減少冠狀動脈內血流或造成缺血，而且對缺血后梗死范圍的擴展及預后有著不可忽視的作用。血小板活性的增加是引起動脈粥樣硬化和造成斑塊不穩定的重要危險因素[1，2]。環磷酸腺苷（cAMP）、血栓素A2（TXA2）、前列腺環素（PGI2）與血小板功能密切相關，丹參可提高cAMP、PGI2含量，降低TXA2含量[3]，抑制血小板聚集。目前，臨床上廣泛使用的丹參制劑主要有復方丹參片、復方丹參滴丸和丹參片等。本試驗擬觀察復方丹參片和丹參片對冠狀動脈粥樣硬化患者血小板活化的作用并進行比較，為臨床合理用藥提供試驗依據。

1 臨床資料

1.1 病例選擇

90例入選病例來自本院心血管內科2007年1月～2009年7月住院患者，有明確癥狀、體征，并經冠狀動脈CT血管造影確診為冠狀動脈粥樣硬化。分為復方丹參片組、丹參片組和對照組。3組年齡、性別、病情程度、伴發疾病及既往史的評分差異無顯著性（P＞0.05），具有可比性。剔除了腫瘤、病危和藥物不能耐受者。另設正常組30例，系本院健康體檢者，未發現心、肺、肝、腎及內分泌或新陳代謝疾病。本試驗經過本院學術委員會批準。

1.2 治療方法

復方丹參片組：口服復方丹參片（四川省某制藥有限公司，規格：每片600 g，國藥準字Z20020119）3 片，tid；丹參片組：口服丹參片（河南省某制藥股份有限公司，規格：每片0.48 g，國藥準字Z20073141）3 片，tid；對照組：給予安慰劑。療程為2個月。

1.3 檢測儀器與方法

低溫離心機（美國Sigma公司）；Light CyclerⅡ型實時熒光定量基因擴增系統（德國Roche公司）；放射免疫計數器（成都中宇儀器有限公司）。試劑Trizol（德國Roche公司）；Rnasin（寶生物工程（大連）有限公司）；逆轉錄試劑盒、熒光定量Realtime PCR試劑盒（上海東洋坊科技有限公司）；cAMP、TXA2、PGI2放免試劑盒（南京凱基生物技術有限公司）。

方法采用realtime RT-PCR法檢測全血中前列腺環素I2合酶（PTGIS）信使核糖核酸（mRNA）的表達及放射免疫法檢測血清中cAMP、TXA2、PGI2的表達[4]。

1.4 統計學方法

2 結果

2.1 復方丹參片與丹參片對冠狀動脈粥樣硬化患者血漿中cAMP、TXA2、PGI2表達的影響

本試驗采用放射免疫法測定血漿中cAMP、TXA2、PGI2的表達。結果如表1所示，與正常組比較，對照組冠狀動脈粥樣硬化患者血漿中cAMP、PGI2表達明顯降低，TXA2明顯升高；復方丹參片和丹參片能明顯升高冠狀動脈粥樣硬化患者血漿中cAMP、PGI2表達，明顯降低血漿中TXA2中的表達（P＜0.01）；復方丹參片組的升高和降低幅度均明顯大于丹參片組（P＜0.01）。

表1 復方丹參片與丹參片對冠狀動脈粥樣硬化患者血漿中cAMP、TXA2、PGI2表達的影響（±s，n＝30）Tab 1 Effect of Compound danshen tablets and Danshen tablets on the expression of cAMP，TXA2，PGI2in patients with coronary atherosclerosis（±s，n＝30）

表1 復方丹參片與丹參片對冠狀動脈粥樣硬化患者血漿中cAMP、TXA2、PGI2表達的影響（±s，n＝30）Tab 1 Effect of Compound danshen tablets and Danshen tablets on the expression of cAMP，TXA2，PGI2in patients with coronary atherosclerosis（±s，n＝30）

與正常組比較：＊P＜0.01；與丹參片組比較：#P＜0.01；與對照組比較：ΔP＜0.01vs.normal group：＊P＜0.01；vs.danshen tablets group：#P＜0.01；vs.control group：ΔP＜0.01

PGI2/pg·mL-1 474.31±84.08185.63±38.51＊298.31±70.36#Δ 241.38±58.79Δ組別正常組對照組復方丹參片組丹參片組cAMP/pg·mL-1 17.23±3.344.26±1.08＊9.87±2.13#Δ 7.16±1.62Δ TXA2/pg·mL-1 11.39±2.9534.95±7.62＊20.72±5.06#Δ 25.74±6.11Δ

2.2 復方丹參片與丹參片對冠狀動脈粥樣硬化患者全血中PTGIS mRNA表達的影響

本試驗采用realtime RT-PCR法檢測全血中PTGIS mRNA的表達。結果如表2所示，與正常組比較，對照組冠狀動脈粥樣硬化患者全血中PTGIS mRNA表達明顯降低；復方丹參片和丹參片能明顯升高冠狀動脈粥樣硬化患者全血中PTGIS mRNA表達，2組分別升高了171.19%、86.44%（P＜0.01）。

表2 復方丹參片與丹參片對冠狀動脈粥樣硬化患者全血中PTGIS mRNA的影響（±s，n＝30）Tab 2 Effect of Compound danshen tablets and Danshen tablets on the mRNAexpression of PTGIS in patients with coro nary atherosclerosis（±s，n＝30）

表2 復方丹參片與丹參片對冠狀動脈粥樣硬化患者全血中PTGIS mRNA的影響（±s，n＝30）Tab 2 Effect of Compound danshen tablets and Danshen tablets on the mRNAexpression of PTGIS in patients with coro nary atherosclerosis（±s，n＝30）

與正常組比較：＊P＜0.01；與丹參片組比較：#P＜0.01；與對照組比較：ΔP＜0.01vs.normal group：＊P＜0.01；vs.danshen tablets group：#P＜0.01；vs.control group：ΔP＜0.01

組別正常組對照組復方丹參片組丹參片組PTGIS/-actin 0.28±0.0480.059±0.0092＊0.16±0.033#Δ 0.11±0.029Δ

3 討論

急性冠狀動脈綜合征（ACS）是由于冠狀動脈內粥樣斑塊破裂、血小板聚集和血栓形成導致冠狀動脈完全或不完全阻塞引起的一組臨床綜合征，是嚴重危害人類健康的一大類疾病。大量的研究結果表明，冠脈缺血后血小板聚集和黏附功能增強，血小板功能變化最明顯的是 TXA2-PGI2系統[5，6]。TXA2、PGI2均為花生四烯酸（AA）的代謝產物，TXA2可使冠脈收縮和血小板聚集；PGI2的作用則可使冠脈擴張、血小板解聚；PGI2/TXA2的平衡是維持正常血小板功能和血液凝固的重要機制，也是保護內皮細胞免疫損傷的重要環節。cAMP作為血小板的第二信使對血小板功能的調節起重要作用。激活血小板的物質如凝血酶、TXA2、前列腺素內過氧化物（PGH2、PGG2）等可抑制腺苷環化酶（AC），降低血小板內cAMP水平，而升高cAMP的藥物能抑制誘聚劑誘導的血小板聚集。cAMP主要通過降低細胞內Ca2+水平、抑制血小板肌球蛋白磷酸化、促進PGE2和PGI2的合成、抑制TXA2合成以及抑制凝血酶與其受體結合等抑制血小板的活化。

丹參（Salvia miltiorrhiza）為唇形科鼠尾草屬多年生草本植物，具有擴張微血管，降低血液黏稠度，改善血液黏、濃、聚、滯狀態，從而改善微循環的作用。復方丹參片主要由丹參、三七和冰片組成。丹參活血化瘀、清心安神、通脈止痛，為君藥；三七活血化瘀、通經止痛，為臣藥；冰片辛香走竄，能通竅止痛、醒神化濁、引經入藥，為佐使藥，三藥共奏活血化瘀、理氣止痛之功。復方丹參片有抗心肌缺血、改善血流變學、抗動脈硬化、抗心律失常、抗腦缺血損傷等作用。本試驗發現，相對于正常組，冠狀動脈粥樣硬化患者血漿中cAMP、PGI2、PTGIS mRNA表達明顯降低，TXA2表達明顯升高。說明冠狀動脈粥樣硬化患者血小板的活化程度比正常人高，這與既往研究結果相符。復方丹參片組和丹參片組能明顯升高冠狀動脈粥樣硬化患者血漿中cAMP、PGI2、PTGIS mRNA表達，降低血漿中TXA2的表達，且復方丹參片組的升高和降低幅度均明顯大于丹參片組。說明二者均能抑制血小板的活化，對ACS的發病均具有防治作用，但復方丹參片抑制血小板的活化強于丹參片。總之，復方丹參片能更好地防治冠狀動脈粥樣硬化患者ACS的發生。

[1]Hamilton JR，Cornelissen I，Mountford JK，et al.Atherosclerosis proceeds independently of thrombin-induced platelet activation inApoE-/-mice[J].Atherosclerosis，2009，205（2）：427.

[2]Schafer A，Bauersachs J.Endothelial dysfunction，impaired endogenous platelet inhibition and platelet activation in diabetes and atherosclerosis[J].Curr Vasc Pharmacol，2008，6（1）：52.

[3]范衛明，張金鳳，王連文，等.復方丹參滴丸預防治療TIA的臨床觀察及對血漿cAMP、cGMP的影響[J].中西醫結合心腦血管病雜志，2003，1（10）：571.

[4]Matsumoto H，Naraba H，Murakami M，et al.Concordant induction of prostaglandin E2synthase with cyclooxygenase-2 leads to preferred production of prostaglandin E2over thromboxane and prostaglandin D2in lipopolysaccharide-stimulated ratperitoneal macrophages[J].Biochem Biophys Res Commun，1997，230（2）：110.

[5]Struthmann L，Hellwig N，Pircher J，et al.Prothrombotic effects of diclofenac on arteriolar platelet activation and thrombosis in vivo[J].J Thromb Haemost，2009，7（10）：1727.

[6]Maugeri N，Baldini M，Rovere-Querini P，et al.Leukocyte and platelet activation in patients with giant cell arteritis and polymyalgia rheumatica：a clue to thromboembolic risks[J].Autoimmunity，2009，42（4）：386.