毛細管氣相色譜法測定丙酸倍氯米松中3種有機溶劑殘留量

葉海青，傅應華

（1.浙江余姚市人民醫院，余姚市 315400；2.嘉興學院醫學院，嘉興市 314001）

丙酸倍氯米松系一種強效外用糖皮質激素類藥物，為《中國藥典》2005年版二部收載的品種[1]，劑型主要有氣霧劑和乳膏劑，其中氣霧劑可用于預防和治療常年性及季節性的過敏性鼻炎和血管舒縮性鼻炎。目前，丙酸倍氯米松質量標準尚未收載殘留溶劑檢測項目，文獻也未見報道。為了提高藥品質量及用藥安全，本文依據《中國藥典》2005年版[1]，對其生產工藝中使用的正己烷、乙酸乙酯和二氧六環等有機溶劑，參考有關文獻[1～3]，建立了毛細管氣相色譜法同時測定上述3種溶劑殘留量的方法。結果表明，該方法簡單、靈敏、準確。

1 材料

1.1 儀器

6890N氣相色譜儀，配置氫火焰離子化檢測器（FID）、7683B自動進樣器、10μL微量注射針、ChemStation色譜工作站（美國安捷倫公司）；AE240電子天平（瑞士梅特勒-托利多儀器有限公司，精度：±0.01 mg）。

1.2 試藥

丙酸倍氯米松原料藥6批（某藥廠提供，批號：080115、080118、080121、080211、080215、080220，按干燥品計算，含量分別為99.3%，98.9%，100.2%，99.6%，99.8%，101.1%）；正己烷、乙酸乙酯均為分析純，二氧六環、二甲基亞砜（DMSO）均為色譜純。

2 方法與結果

2.1 色譜條件

HP-INNOWAX（PEG-20M）毛細管柱（30 m×0.32 μm×0.25 μm）；柱溫：程序升溫，初始溫度60 ℃，保持5 min，并以45 ℃·min－1速率升溫至200 ℃，保持3 min；載氣：高純氮氣，流速1.5 mL·min－1；FID：250 ℃；進樣口溫度：200 ℃；進樣方式：分流進樣，分流比1∶1；燃氣：氫氣，流速30 mL·min－1；助燃氣：空氣，流速400 mL·min－1；尾吹氣：氮氣，流速25 mL·min－1；進樣量：1μL。

2.2 對照品溶液制備

分別精密稱取正己烷5.80 mg、乙酸乙酯100.0 mg、二氧六環7.60 mg，置于加有適量DMSO的20 mL容量瓶中，用DMSO稀釋至刻度，搖勻，作為殘留溶劑貯備液；再精密量取1 mL，置于10 mL容量瓶中，用DMSO稀釋至刻度，搖勻，作為混合對照溶液。

2.3 專屬性考察

分別取“2.9”項下樣品溶液（批號：080121）和混合對照溶液，注入氣相色譜儀，結果見圖1。

圖1 氣相色譜圖A.混合對照溶液；B.樣品溶液；1.正己烷；2.乙酸乙酯；3.二氧六環Fig 1 GC chromatographyA.mixture control；B.sample；1.n-hexane；2.ethyl acetate；3.dioxane

圖1結果表明，各殘留溶劑分離較好。

2.4 精密度

精密量取混合對照溶液1μL，注入氣相色譜儀，重復進樣6次，測定峰面積，計算正己烷、乙酸乙酯、二氧六環的RSD分別為2.6%、1.1%、1.4%，表明精密度良好。

2.5 線性關系考察

分別取正己烷、乙酸乙酯、二氧六環各25 mg，精密稱定，置于25 mL容量瓶中，加DMSO至刻度，搖勻；精密量取上述溶液適量，用DMSO逐級稀釋制成0.5、0.2、0.1、0.05、0.02 g·L－1的溶液，按上述色譜條件測定，所得峰面積（Y）與相應殘留溶劑對照品濃度（X）作線性回歸處理。結果正己烷、乙酸乙酯、二氧六環的回歸方程分別為Y＝－18.428+2288.3X（r＝0.9999），Y＝－3.897+1800.7X（r＝0.9999），Y＝0.404+1581.1X（r＝0.9999）。結果3種溶劑檢測濃度線性范圍分別為0.0211～1.055、0.0215～1.074、0.0229～1.147 mg·mL－1。

2.6 溶液穩定性試驗

取混合對照溶液，分別于0、2、4、6、8 h取樣測定峰面積，結果峰面積均無明顯差別，正己烷、乙酸乙酯、二氧六環的RSD分別為2.3%、1.8%、2.0%，表明溶液在8 h內穩定。

2.7 最低定量限

精密量取線性關系項下的0.02 mg·mL－1溶液適量，用DMSO逐級稀釋，依法測定，按S/N＝10計算最低定量濃度。結果，正己烷為0.027 μg·mL－1，乙酸乙酯為0.033 μg·mL－1，二氧六環為0.095 μg·mL－1。

2.8 加樣回收率試驗

取經105℃干燥至恒重的樣品（批號為080115）約1g，置于10 mL容量瓶中，精密稱定，共9份，分別精密加入上述殘留溶劑貯備液0.8、1、1.2 mL，再加DMSO使溶解并稀釋至刻度，搖勻；再取混合對照溶液，依法測定，計算回收率。得高、中、低3個濃度的回收率（n＝3）分別為正己烷100.8%、101.7%、102.5%，RSD分別為1.8%、2.4%、2.8%；乙酸乙酯分別為101.0%、99.3%、100.8%，RSD 分別為1.6%、1.5%、2.2%；二氧六環分別為99.5%、98.9%、101.2%，RSD分別為2.5%、1.7%、2.6%。

2.9 樣品中殘留溶劑含量測定

取 批 號 為 080115、080118、080121、080211、080215、080220的6批丙酸倍氯米松各1 g，精密稱定，置于10 mL容量瓶中，加DMSO使溶解并稀釋至刻度，依法測定，結果除批號080118和080215樣品中檢出乙酸乙酯含量分別為0.10%與0.15%外，其余各批號均未檢出上述3種有機殘留溶劑。

3 討論

3.1 溶劑的選擇

丙酸倍氯米松不溶于水，但在DMSO中溶解，故選擇DMSO作為溶劑。

3.2 色譜柱與柱溫的選擇

考慮到正己烷、乙酸乙酯、二氧六環極性依次增強，經試驗在PEG-20M極性色譜柱上分離效果良好。由于二氧六環和DMSO沸點較高，若采用等柱溫法，出峰時間長；為了縮短分析時間，改用程序升溫法，在正己烷、乙酸乙酯出峰后，快速升高柱溫加速二氧六環和DMSO出峰。結果，在給定的色譜條件下，正己烷、乙酸乙酯、二氧六環與DMSO之間均達到基線分離，一次進樣在12 min內完成測定，達到了快速分析的目的。

3.3 溶劑限度的擬定

根據《中國藥典》2005年版二部[1]規定，正己烷、二氧六環為二類溶劑，限度分別為0.029%、0.038%；乙酸乙酯為三類溶劑，限度為0.5%。因此，本品檢查結果合格。

[1]國家藥典委員會編.中華人民共和國藥典（二部）[S].2005年版.北京：化學工業出版社，2005：79、附錄ⅧP.

[2]欒成章，祝 波，王尊文，等.頂空氣相色譜法測定夫西地酸中有機溶劑殘留量[J].中國藥房，2006，17（7）：535.

[3]張 軍，孫會敏，李 科.氣相色譜法測定阿德福韋酯的10種殘留溶劑[J].藥物分析雜志，2005，25（6）：660.