鹽酸小檗堿泊洛沙姆188固體分散體的制備

呼自順，陳宇洲，王 琤（.天津第一中心醫(yī)院藥劑科，天津市 3009；.天津中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院，天津市 30093）

鹽酸小檗堿是黃連、黃柏等中藥中的有效成分，傳統(tǒng)上用于治療痢疾，代表制劑是鹽酸小檗堿片。隨著對鹽酸小檗堿的藥理研究日益深入，證明其還具有治療糖尿病、降血脂、治療心血管疾病和抗腫瘤、抗抑郁的作用[1～3]。

藥動學(xué)研究[4]表明，鹽酸小檗堿吸收較差。擴(kuò)大應(yīng)用范圍之后，小檗堿不是在胃腸道內(nèi)起作用，而是起全身作用。在起全身作用的時候，吸收程度將會影響藥效，正如在抗腫瘤的研究中[4]作者推測，吸收差可能是小檗堿腫瘤抑制率較低的原因。

根據(jù)鹽酸小檗堿的結(jié)構(gòu)式可知，其屬于弱堿性的化合物，在偏堿性的小腸液中解離度和表觀溶解度較小；盡管分子型存在較多，有利于被動擴(kuò)散，但溶解度較小、溶出較慢的缺陷可能是其吸收偏差的原因。

為了改善鹽酸小檗堿的吸收，本研究制備了鹽酸小檗堿泊洛沙姆固體分散體，優(yōu)選了處方和工藝參數(shù)，并將固體分散體的溶出百分率同藥物與泊洛沙姆的物理混合物的溶出百分率進(jìn)行了對比，證明了該試驗(yàn)確定的處方和工藝參數(shù)制備得到的是固體分散體，同時證明了鹽酸小檗堿泊洛沙姆188固體分散體能夠提高藥物的溶出度。

1 材料

1.1 儀器

RCZ-8A型智能藥物溶出儀（天津大學(xué)精密儀器廠）；HH-2型數(shù)顯恒溫水浴鍋（河南省予華儀器有限公司）；YXJ-2型高速電動離心機(jī)（江蘇金壇市金城國盛實(shí)驗(yàn)儀器廠）；FAI0004N型電子天平（上海精密科學(xué)儀器有限公司）；756型紫外-可見分光光度計(jì)（上海光譜儀器有限公司）。

1.2 試藥

鹽酸小檗堿標(biāo)準(zhǔn)品（寶雞市永嘉天然植物開發(fā)有限公司，純度≥98%）；泊洛沙姆188（德國巴斯夫公司，上海運(yùn)宏化工制劑輔料技術(shù)有限公司進(jìn)口分裝，藥用級）；磷酸二氫鉀、氫氧化鈉（天津市榮宏化工有限責(zé)任公司）。

2 方法

2.1 紫外分析方法的建立

2.1.1 最大吸收波長的確定：分別配制10 μg·mL-1鹽酸小檗堿和10 μg·mL-1泊洛沙姆188水溶液，0.45 μm微孔濾膜過濾，取濾液分別在200～400 nm波長范圍內(nèi)掃描。

2.1.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備：精密稱定鹽酸小檗堿約5 mg，置于100 mL量瓶中，加不同pH值的緩沖液溶解并稀釋至刻度，分別精密量取上述溶液1、2、3、4、5 mL，置于10 mL量瓶中，加不同pH值緩沖液稀釋至刻度，搖勻，使其濃度分別為5、10、15、20、25 μg·mL-1。采用紫外-可見分光光度法在345 nm波長處測定其吸光度。以吸光度（Y）為縱坐標(biāo)，鹽酸小檗堿濃度（X）為橫坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸，得回歸方程為Y＝0.0018X+0.337（r＝0.9967）。結(jié)果表明，鹽酸小檗堿在5～25 μg·mL-1濃度范圍內(nèi)與吸光度線性關(guān)系良好。

2.2 鹽酸小檗堿-泊洛沙姆188固體分散體處方和工藝的確定

2.2.1 熔融法制備固體分散體工藝流程：取處方量泊洛沙姆188置蒸發(fā)皿中，水浴加熱熔融，取處方量鹽酸小檗堿加入熔融液中，熔融混勻后迅速冷卻，粉碎過40目篩，干燥器中貯藏，備用。因本研究目的是改善鹽酸小檗堿在體內(nèi)的溶出度，故將固體分散體不加輔料粉末直接壓片，用單沖壓片機(jī)、手工加料方式制成片劑，片重為1000 mg左右。

2.2.2 溶出度測定方法：取各批片劑1片，照溶出度測定法（《中國藥典》附錄ⅩC第二法），以pH 6.8PBS 1000 mL為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為100 r·min-1，溫度（37±0.5）℃，于0、5、15、20、25 min各取樣5 mL，用0.45 μm微孔濾膜過濾，濾液置100 mL量瓶中，加pH 6.8 PBS稀釋至刻度，搖勻，照紫外-可見分光光度法（《中國藥典》附錄ⅣA）在345 nm波長處測定吸光度；25 min取樣后，將溶出液全部轉(zhuǎn)移至燒杯中，于100℃加熱攪拌2～3 min，放冷至37℃，按前述方法取樣及稀釋，以100℃處理后溶出液測得的吸光度為分母，以各時間點(diǎn)測到的吸光度為分子，計(jì)算累積溶出率。

2.2.3 熔融溫度對溶出率的影響：熔融溫度考察范圍設(shè)定為60、70、80℃；藥物與載體比例為1∶2；冷卻溫度為0℃。壓片時根據(jù)硬度調(diào)節(jié)壓力，使各批次硬度均在3.5～4.5 kg。考察熔融溫度對溶出率的影響。

2.2.4 冷卻溫度對溶出率的影響：冷卻溫度考察范圍設(shè)定為0、20、30℃；藥物與載體比例為1∶2；熔融溫度為60℃。壓片時根據(jù)硬度調(diào)節(jié)壓力，使各批次硬度均在3.5～4.5 kg。考察冷卻溫度對溶出率的影響。

2.2.5 載體比例對溶出率的影響：設(shè)定較寬范圍考察藥物和泊洛沙姆188比例對溶出率的影響，考察比例為10∶1、5∶1、3∶1、2∶1、1∶1、1∶2、1∶3、1∶5、1∶10、1∶20（鹽酸小檗堿∶泊洛沙姆188）；藥物與泊洛沙姆188加熱溫度為60℃；冷卻溫度為0℃。壓片時根據(jù)硬度調(diào)節(jié)壓力，使各批次硬度均在3.5～4.5 kg。考察熔融溫度對溶出率的影響。

2.3 藥物和載體物理混合物及固體分散體溶出率的比較

2.3.1 物理混合物片劑的制備：稱量鹽酸小檗堿和泊洛沙姆188各20 g，用研缽研碎過14目篩，直接粉末壓片，片重為1000 mg，硬度為3.5～4.5 kg。

2.3.2 固體分散體片劑的制備：稱量鹽酸小檗堿和泊洛沙姆188各20 g，熔融法制備固體分散體，工藝參數(shù)為熔融溫度60℃、冷卻溫度0℃、冷卻時間30 min。取制得的固體分散體以研缽粉碎，過14目篩，直接粉末壓片，片重為1000 mg，硬度3.5～4.5 kg。測定2種片劑的溶出率。

3 結(jié)果

3.1 紫外分析方法的建立

將鹽酸小檗堿與泊洛沙姆188一起進(jìn)行紫外掃描，發(fā)現(xiàn)在345 nm處波長鹽酸小檗堿有一最大吸收峰，而泊洛沙姆188在200～400 nm波長范圍內(nèi)無吸收，故選擇345 nm作為鹽酸小檗堿檢測波長。鹽酸小檗堿紫外掃描圖譜見圖1。

3.2 固體分散體的處方和工藝的確定

3.2.1 熔融溫度對溶出率的影響：熔融溫度對溶出率影響較小。為了確保藥物穩(wěn)定性，選用熔融溫度為60℃。熔融溫度對溶出率的影響見表1。

圖1 鹽酸小檗堿紫外掃描圖譜Fig 1 UV scanning spectrum of berberine hydrochloride

表1 熔融溫度對溶出率的影響（n＝5）Tab 1 Effect of melting temperature on dissolution rate（n＝5）

3.2.2 冷卻溫度對溶出率的影響：冷卻溫度對出率有較大影響。從冷卻溫度對溶出率影響較大的現(xiàn)象可以推測冷卻溫度較低則冷卻速率較快，則顆粒或晶體的粒徑較小，溶出較快。選用冷卻溫度為0℃。冷卻溫度對溶出率的影響見表2。

表2 冷卻溫度對溶出率的影響（n＝5）Tab 2 Effect of cooling temperature on dissolution rate（n＝5）

3.2.3 藥物與載體比例對溶出率的影響：由于鹽酸小檗堿與泊洛沙姆188的比例為10∶1、5∶1、3∶1、2∶1時，泊洛沙姆188無法與鹽酸小檗堿完全混合，故排除此系列載體比例，僅制備1∶1、1∶2、1∶3、1∶5、1∶10、1∶20比例的固體分散體。藥物和載體比例對溶出率的影響見表3。

表3 藥物和載體比例對溶出率的影響（n＝5）Tab 3 Effect of ratio of drug to carrier on dissolution rate（n＝5）

由表3可知，盡管藥物與載體比例不同，溶出率也不同，但差別并不明顯。可以推測，鹽酸小檗堿與泊洛沙姆188比例為1∶1時可使藥物足夠分散。為了減少輔料的應(yīng)用，確定藥物與載體比例為1∶1。

3.3 藥物和載體物理混合物及固體分散體溶出百分率的比較

制成固體分散體之后，鹽酸小檗堿在各個時間點(diǎn)的溶出百分率提高了近一倍，從而也證明了制備的產(chǎn)物是固體分散體，而非機(jī)械混合物。固體分散體和物理混合物的溶出曲線見圖2。

圖2 固體分散體和物理混合物的溶出曲線（n＝5）Fig 2 Dissolution curve of solid dispersion and physical mixtur（en＝5）

4 討論

固體分散體技術(shù)是將藥物高度分散在載體中，加速和增加難溶性藥物的溶出，提高其生物利用度或延緩其釋放的一種制劑技術(shù)。其提高或降低溶出率取決于載體的性質(zhì)。如果載體是水溶性的，固體分散體就能提高溶出率；反之，如果載體是難溶性的，就能降低溶出率。

泊洛沙姆是一種非離子型表面活性劑，其結(jié)構(gòu)是聚氧乙烯和聚氧丙烯的嵌段共聚物。聚氧乙烯是親水基團(tuán)，聚氧丙烯是疏水基團(tuán)，根據(jù)二者比例不同，組成的泊洛沙姆親水性不同。在藥劑學(xué)中應(yīng)用的代表是泊洛沙姆188，它是為數(shù)不多的靜脈注射用脂肪乳劑中的乳化劑之一。同時，它可以用于固體分散體技術(shù)中，而固體分散體中應(yīng)用到它的性質(zhì)是固體形態(tài)、熔點(diǎn)較低和親水性。泊洛沙姆188的固體形態(tài)是用于制備固體分散體的基礎(chǔ)；熔點(diǎn)較低是熔融法制備固體分散體的基礎(chǔ)；親水性是其能夠提高藥物溶出率的基礎(chǔ)。當(dāng)用泊洛沙姆188固體分散體制備的制劑進(jìn)入人體胃腸道之后，泊洛沙姆188的表面活性、與皮膚黏膜的相容性以及延緩胃腸道蠕動的性質(zhì)會進(jìn)一步增加藥物的吸收。表面活性使其可以作為增溶劑或乳化劑，在胃腸道中它將藥物增溶或乳化，增加難溶性藥物的吸收；與皮膚黏膜的相容性能改善藥物對胃腸道黏膜的通透性，增大難溶性藥物的吸收；減慢腸蠕動能延長藥物在胃腸道內(nèi)的滯留時間，從而改善吸收。

本研究僅從體外溶出度角度證明了與泊洛沙姆188形成固體分散體后鹽酸小檗堿的溶出百分率提高了近一倍，在動物體內(nèi)和人體內(nèi)吸收程度即生物利用度的提高是下一階段的研究內(nèi)容。

[1]陳洪源，明智強(qiáng)，謝佳樂，等.小檗堿降血糖機(jī)制的研究進(jìn)展[J].食品與藥品，2008，10（3）：69.

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