共研磨法改善尼群地平體外溶出度的研究Δ

游本剛，潘海敏，唐麗華，周文鳳，趙曉麗，吳偉華

（蘇州大學(xué)藥學(xué)院，蘇州市 215123）

尼群地平（Nitrendipine，NTD）是第2代二氫吡啶類鈣通道阻滯劑，對(duì)多種高血壓病特別是老年性高血壓有良好的治療效果[1]。但由于其在水中幾乎不溶，影響了體內(nèi)的生物利用度[2]，因此提高這類難溶性藥物的體外溶出速率對(duì)于提高其制劑的生物利用度和臨床療效具有重要意義。共研磨法（Co-grinding）[3，4]近年來(lái)被廣泛應(yīng)用于提高難溶性藥物的溶出速率及其生物利用度研究，取得了較好的成效[5]。本研究以固體制劑常用輔料為載體，采用球磨機(jī)分別制備了單相、兩相和三相NTD分散體系，并在相同的條件下將其制備成片劑，通過(guò)體外溶出度試驗(yàn)比較了藥物的溶出度改善情況，以期為其制劑的研制提供參考。

1 試藥與儀器

NTD原料藥（保定格瑞特化工有限公司，批號(hào)：20060716，含量：99.9%）；微晶纖維素（MCC，湖州展望藥業(yè)化學(xué)有限公司）；聚乙烯吡咯烷酮k30（PVPk30，Plasdone，國(guó)際特品ISP公司）；聚乙二醇6000（PEG6000，天津天泰精細(xì)化學(xué)品有限公司）；泊洛沙姆188（F68，國(guó)際特品（香港）有限公司）；羥丙基纖維素（HPC，湖州展望化學(xué)藥業(yè)有限公司）；十二烷基硫酸鈉（SDS，化學(xué)純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）。

XQM-04變頻行星式球磨機(jī)（南京科析實(shí)驗(yàn)儀器研究所）；UV-2401PC紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)（日本島津制作所）；RC-6溶出度測(cè)定儀（天津市新天光分析儀器技術(shù)有限公司）；TDP型單沖壓片機(jī)（上海天祥健臺(tái)制藥機(jī)械有限公司）。

2 方法與結(jié)果

2.1 含量測(cè)定方法[6]

采用紫外分光光度法，檢測(cè)波長(zhǎng)352.5 nm，溶劑為無(wú)水乙醇。質(zhì)量濃度（C，μg·mL－1）對(duì)吸光度（A）的線性回歸方程為C＝52.962A－2.2942（r＝0.9999，n＝5），NTD檢測(cè)濃度線性范圍為5.196～31.176 μg·mL－1。

2.2 體外溶出度測(cè)定方法[6]

按《中國(guó)藥典》2005年版（二部）槳法測(cè)定，溶出介質(zhì)：900 mL的0.5%SDS水溶液；溫度：（37±0.5）℃；轉(zhuǎn)速：100 r·min－1。取6份NTD樣品（相當(dāng)于NTD原藥20 mg），分別置于6個(gè)溶出杯中，于2.5、5、10、20、40、60 min分別取溶出液5 mL（取出后迅速補(bǔ)加等量的新鮮介質(zhì)），經(jīng)0.8 μm微孔濾膜濾過(guò)，棄初濾液，取續(xù)濾液在356 nm波長(zhǎng)下測(cè)定其吸光度，代入標(biāo)準(zhǔn)曲線方程求得NTD的濃度并計(jì)算其累積溶出百分率。質(zhì)量濃度C（μg·mL－1）對(duì)吸光度A的線性回歸方程為C＝55.559A+0.0102（r＝0.9997，n＝5），NTD檢測(cè)濃度線性范圍為2.534～30.408μg·mL－1。

2.3 單一研磨

取適量的NTD原料藥7份，在轉(zhuǎn)速為400 r·min－1的條件下，分別置于球磨機(jī)內(nèi)研磨0、10、20、30、40、50、60 min，即得各NTD單一研磨粉末。分別取適量的各NTD單一研磨粉末與MCC按1∶4的比例混合均勻，采用粉末直接壓片法在同一壓力下分別制得片重為100 mg的物理混合物片劑。測(cè)定各片劑中NTD的含量并進(jìn)行體外溶出度試驗(yàn)，結(jié)果見(jiàn)圖1。

由圖1A可見(jiàn)，未研磨的NTD在10 min時(shí)藥物的累積溶出百分率僅為10%左右；而經(jīng)研磨后的NTD溶出速率顯著加快，累積溶出百分率明顯提高；但當(dāng)研磨時(shí)間超過(guò)40 min時(shí)，藥物溶出速率反而變慢，這可能與粉末的聚集有關(guān)。由圖1B可見(jiàn)，經(jīng)研磨后的藥物從片劑中的溶出速率有所加快，但60 min時(shí)藥物的累積溶出百分率仍遠(yuǎn)低于80%，且研磨時(shí)間對(duì)藥物的溶出行為并無(wú)明顯影響，說(shuō)明單一研磨并不能顯著提高NTD制劑中藥物的溶出速率。

另對(duì)共研磨粉末及NTD-MCC物理混合物進(jìn)行了X射線粉末衍射和差示熱量掃描試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)共研磨粉末中NTD的晶型并不是無(wú)定形，其物相并無(wú)改變。二者在顯微鏡下觀察結(jié)果詳見(jiàn)圖2。

圖2 NTD-MCC物理混合物及共研粉末的顯微照片（×400）A.NTD-MCC物理混合物；B.共研磨粉末Fig 2 Photomicrograph of NTD-MCC physical mixtures and co-grinding powder（×400）A.physical mixtures of NTD-MCC；B.co-grinding powder

由圖2可見(jiàn)，共研磨粉末的粒徑較原料藥大大減小，這是藥物溶出行為改善的主要原因。此外，MCC較好的潤(rùn)濕性在一定程度上也促進(jìn)了NTD的溶出。

2.4 兩相共研磨

2.4.1 共研磨輔料對(duì)藥物溶出的影響。將NTD原料藥與幾種常用輔料羥丙基甲基纖維素（HPMC）、HPC、MCC、PVPk30分別按1∶4的比例混合均勻，在400 r·min－1的轉(zhuǎn)速下分別在球磨機(jī)內(nèi)研磨40 min，即得各共研磨粉末。采用粉末直接壓片法，將各共研磨粉末在同一壓力下分別制得片重為100 mg的共研磨片劑，測(cè)定藥物含量并進(jìn)行體外溶出度試驗(yàn)，并與其相應(yīng)物理混合物、共研磨粉末進(jìn)行比較，結(jié)果見(jiàn)圖3。

圖3 共研磨輔料種類對(duì)NTD溶出的影響A.物理混合物；B.共研磨粉末；C.共研磨片劑Fig 3 Effect of category of excipients on dissolution of nitrendipineA.co-grinding powder（NTD-MCC）；B.co-grinding powder；C.cogrinding tablets

由圖3A、B可見(jiàn)，NTD與不同輔料共研磨后，藥物的溶出速率及累積溶出百分率得到明顯改善，10 min時(shí)藥物的累積溶出百分率可達(dá)80%以上，遠(yuǎn)遠(yuǎn)優(yōu)于物理混合物。由圖2C可見(jiàn)，將共研磨粉末制備成片劑以后，藥物的溶出行為發(fā)生了較大的改變，這主要與輔料的成型及崩解性能有關(guān)，當(dāng)藥物與HPC或MCC共研時(shí)，所得片劑藥物的溶出效果改善最好。

2.4.2 共研磨時(shí)間對(duì)藥物溶出的影響。將NTD原料藥與MCC按1∶4的比例混合均勻后稱取7份，在400 r·min－1的轉(zhuǎn)速下分別在球磨機(jī)內(nèi)研磨0、10、20、30、40、50、60 min，即得各共研磨粉末樣品，采用直接粉末壓片法，在同一壓力下制得片重為100 mg的共研磨片劑，測(cè)定藥物含量并進(jìn)行體外溶出度試驗(yàn)，結(jié)果見(jiàn)圖4。

圖4 共研磨時(shí)間對(duì)NTD溶出的影響A.共研磨粉末（NTD-MCC）；B.共研磨片劑Fig 4 Effect of co-grinding time on dissolution of nitrendipineA.co-grinding powder（NTD-MCC）；B.co-grinding tablets

由圖4可見(jiàn)，與未研磨樣品相比，共研磨后藥物的溶出速度及累積溶出百分率均明顯提高；研磨時(shí)間對(duì)藥物的溶出也有顯著的影響，隨著共研磨時(shí)間的延長(zhǎng)，藥物溶出顯著加快，研磨40 min即可達(dá)到較好的效果，10 min時(shí)藥物的累積溶出百分率即可達(dá)80%以上。

2.4.3 MCC比例對(duì)藥物溶出的影響。將NTD原料藥與MCC按不同比例混合后，分別于球磨機(jī)內(nèi)以400 r·min－1的轉(zhuǎn)速研磨40 min，即得各共研磨粉末樣品，采用直接粉末壓片法，在同一壓力下制得片重為100 mg的共研磨片劑，測(cè)定藥物含量并進(jìn)行體外溶出度試驗(yàn)，結(jié)果見(jiàn)圖5。

圖5 NTD-MCC混合比例對(duì)NTD溶出的影響A.共研磨粉末（NTD-MCC）；B.共研磨片劑Fig 5 Effect of ratio of NTD to MCC on dissolution of nitrendipineA.co-grinding powder（NTD-MCC）；B.co-grinding tablets

由圖5可見(jiàn)，藥物與MCC的共研磨比例對(duì)藥物的溶出有一定影響，當(dāng)NTD-MCC的比例增加到1∶4時(shí)，隨著MCC比例的增加，粉末或片劑中藥物的溶出行為并無(wú)明顯差異，40 min時(shí)片劑中藥物的累積溶出百分率均達(dá)到80%左右。

2.4.4 加液研磨對(duì)藥物溶出的影響。根據(jù)文獻(xiàn)[7]報(bào)道，共研磨時(shí)加入適量的液體有助于研磨過(guò)程的進(jìn)行，藥物與共研磨輔料易于形成固體分散體。所以本研究在NTD-MCC比例為1∶4前提下，分別在共研磨前加入5 mL的水、甲醇、乙醇、丙酮、二氯甲烷，組成一系列的加液混合物，分別于球磨機(jī)中研磨40 min，樣品干燥后測(cè)定藥物含量并進(jìn)行體外溶出度試驗(yàn)，結(jié)果見(jiàn)圖6。

圖6 加入液體對(duì)NTD溶出的影響Fig 6 Effect of added liquid on dissolution of nitrendipine

由圖6可見(jiàn)，經(jīng)過(guò)加液研磨后制得的樣品與未加液處理的相比，體外溶出行為并無(wú)明顯改善，藥物的累積溶出百分率反而有所降低，說(shuō)明對(duì)該處方而言，加液處理并不能產(chǎn)生較好的效果。

2.5 三相共研磨

為了進(jìn)一步研究NTD與輔料共研對(duì)藥物溶出度的影響，筆者選取了幾種輔料交互混合進(jìn)行試驗(yàn)。將NTD原料藥與可溶性輔料（F68、PEG6000）及成型輔料（MCC、HPC）按1∶2∶2的比例混合均勻，分別于球磨機(jī)中研磨40 min，測(cè)定藥物含量并進(jìn)行體外溶出度試驗(yàn)，結(jié)果見(jiàn)圖7。

由圖7可見(jiàn)，三相共研樣品中藥物的溶出速率雖有所加快，但與兩相共研比較，并無(wú)明顯改善。這可能與PEG6000、F68研磨時(shí)受熱融化、冷卻后結(jié)塊有關(guān)，具體原因還有待于進(jìn)一步研究。

3 討論

圖7 加入2種輔料混合研磨對(duì)NTD溶出的影響Fig 7 Effect of 2 kinds of excipients on dissolution of nitrendipine

研磨是藥物制劑研究中經(jīng)常采用的藥物前處理方法，在物料混合、固體分散體及包合物的制備中得到廣泛應(yīng)用，并具有良好的效果。共研磨法是指將藥物與1種或幾種輔料同時(shí)置于球磨機(jī)內(nèi)進(jìn)行混合、研磨的操作方法。近年來(lái)，該法在難溶性藥物的混合與粉碎、包合物的制備[7]、固體分散體的制備[4，5]等方面在國(guó)內(nèi)、外有較為廣泛的研究與應(yīng)用。與固體分散體制備技術(shù)相比，共研磨法操作簡(jiǎn)便、快捷，不使用有機(jī)溶劑、無(wú)環(huán)境污染，具有工業(yè)化推廣的良好前景。

本研究以難溶性藥物NTD為模型藥物，采用國(guó)產(chǎn)球磨機(jī)制備了藥物與輔料的共研磨分散體系。結(jié)果表明，將NTD與MCC或HPC共研，共研粉末及其片劑中藥物的溶出速率及累積溶出百分率均有顯著改善，藥物與輔料的比例以1∶4為宜，研磨時(shí)間以40 min為宜。

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