甲基綠-派洛寧染色方法在慢性子宮內膜炎診斷中的應用

陳永宏 袁林秀 廖曉丹

山西省汾陽醫院病理科，山西 汾陽 032200

慢性子宮內膜炎為子宮內膜的慢性炎癥。慢性子宮內膜炎雖然發病率較低，可一旦患病則會給患者生活、工作帶來諸多影響，也給患者本人造成許多痛苦。在子宮內膜間質內找到漿細胞是診斷子宮內膜炎的關鍵。但是，混雜在子宮內膜間質細胞之間的漿細胞很不容易找到，不成熟的漿細胞就更不容易辨認。造成慢性子宮內膜炎漏診。我們應用甲基綠-派洛寧染色方法幫助辨認漿細胞，確診慢性子宮內膜炎64例，現報告如下。

1 材料及方法

1.1 材料

山西省汾陽醫院門診及住院功能性子宮出血病例294例。

1.2 方法

采用Cook甲基綠-派洛寧提純法[1]

[試劑配制]

（1）甲基綠原液2%甲基綠溶液，氯仿抽提五次。

（2）派洛寧原液2%派洛寧。

（3）醋酸緩沖液（pH4.8）0.2M醋酸液41ml，0.2M醋酸鈉59ml。

（4）甲基綠-派洛寧染液。甲基綠提純液15ml，派洛寧原液1ml，醋酸緩沖液20ml，甘油10ml。臨用前配制。

[染色步驟]

（1）組織切片脫蠟至水。

（2）用醋酸緩沖液（pH4.8）浸洗。

（3）置于甲基綠-派洛寧染液染色3分鐘。

（4）用醋酸緩沖液（pH4.8）清洗。

（5）濾紙吸干，迅速丙酮分化30秒。

（6）用純丙酮、二甲苯等量（1∶1）混合液分化、脫水30秒。

（7）二甲苯透明，光學樹膠封固。

2 結果

圖1

294例功能性子宮出血病人的子宮內膜組織，其中64例診斷為慢性子宮內膜炎。子宮內膜組織呈淡紅色，漿細胞核呈綠色，漿細胞胞漿呈鮮紅色。在HE形態下，子宮內膜間質內有散在的或成簇淋巴細胞浸潤，部分淋巴細胞出現漿細胞樣分化，較少出現典型的成熟的漿細胞。早期的漿細胞的核形態與淋巴細胞相似，胞漿增多，核周出現淡染區，后期則出現核內染色質分布呈點彩樣，成熟的漿細胞出現典型的車輪狀核。長期的慢性炎癥間質細胞可出現纖維化及毛細血管增生。見圖1。

3 討論

甲基綠和派洛寧兩種染色劑對DNA和RNA的親和力不同，甲基綠對DNA親和力強，使DNA顯現出綠色，而派洛寧對RNA的親和力強，使RNA呈現出紅色。漿細胞的胞漿內合成蛋白質旺盛，含有豐富的粗面內質網，上有大量的核糖體，內含大量的核糖核酸，故漿細胞胞漿著色呈鮮紅色。淋巴細胞分為T淋巴細胞、B淋巴細胞兩大類。B淋巴細胞最終發育為漿細胞，產生抗體，在發育的過程中，漿細胞內核糖體逐漸增多。分泌抗體功能逐漸加強，形態也逐漸典型。

慢性子宮內膜炎在婦科臨床雖沒有宮頸糜爛及陰道炎那樣多見，但仍是危及廣大婦女身體健康的主要原因之一。慢性子宮內膜炎多由急性子宮內膜炎治療不徹底所致。慢性子宮內膜炎的癥狀有疼痛的、白帶增多、經量增多。由于子宮內膜的生理性周期剝脫，嚴重的慢性子宮內膜炎并不多見。這就給臨床診斷帶來困難。鏡下見內膜間質內有多少不等的漿細胞及淋巴細胞浸潤，而漿細胞的存在是診斷慢性子宮內膜炎的依據之一。但有時內膜細胞增生、經前期內膜的蛻膜樣改變以及大量淋巴細胞的存在可能影響對漿細胞的辨認。應用免疫組化方法有助于診斷，但無法排除假陰性的問題，其費用較高，操作復雜，在沒有開展免疫組化的基層醫院很難實行。本方法294例功能性子宮出血病人的子宮內膜組織，其中64例診斷為慢性子宮內膜炎。漿細胞核呈綠色，漿細胞胞漿呈鮮紅色，特別鮮艷奪目容易辨認。因此，本法簡便、易行、實用，可清晰顯示漿細胞的存在，可明確診斷慢性子宮內膜炎。

輕度炎癥病人，雙合診可無異常情況發現，故臨床常診斷為功能失調性子宮出血。有人在1000例功能失調性子宮出血病人中作病理組織檢查，發現11%為子宮內膜炎。在增生過長的子宮內膜組織中如發現星星點點的淋巴細胞做甲基綠-派洛寧染色往往能找到漿細胞，所以內膜間質內發現淋巴細胞即可認為是慢性子宮內膜炎。使用抗生素治療往往有效，可一旦漏診則造成病人不必要的痛苦。

[1]龔志錦.病理組織制片和染色技術[M].上海：上海科學技術出版社，1994，1：301.