APBD致膽管疾病患兒膽管組織中survivin、Ki-67的表達變化及意義

韓新峰

(邯鄲市中心醫院,河北邯鄲 056000)

先天性膽管擴張癥(CBD)由Vater在1723年首次報道。國內外報道和研究表明本病有癌變傾向。目前認為膽胰管合流異常(APBD)是CBD的病因[1]。2002～2008年,我們對 37例 APBD所致CBD患兒的肝外膽管黏膜中Ki-67、survivin進行檢測,探討APBD所致CBD患兒膽管癌變機制。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 37例APBD所致CBD患兒中男11例,女 26例;年齡 4個月 ～16歲,平均 8.7歲。病史5 d～11 a。均行術中膽管造影檢查后行手術治療(行膽總管囊腫切除、膽囊切除、肝總管空腸Roux-en-Y吻合術),其中膽管囊狀擴張25例、梭狀擴張 12例。全組無死亡病例。

1.2 Ki-67、survivin標記指數(LI)的檢算方法 將標本(膽管、膽囊)用10%甲醛固定,石蠟包埋。4～6μm厚連續切片。另取膽腸吻合時正常小腸黏膜為正常對照。所有標本行免疫組織化學 ABC法染色,按試劑盒說明書操作。PBS替代一抗作為陰性對照。細胞核呈黃色或棕褐色為 Ki-67陽性細胞,細胞質內有黃色或棕黃色顆粒者為survivin陽性細胞。采用盲法標記染色良好區域,在 400倍顯微鏡下任選 10個高倍視野,各計數 100個細胞。Ki-67 LI、survivin LI=陽性細胞/計數細胞×100%。

1.3 統計學方法 采用SPSS12.0統計軟件。計量資料用q檢驗,計數資料用χ2檢驗。P≤0.05為差異有統計學意義。

2 結果

CBD患兒膽管黏膜中Ki-67 LI為37.43%± 16.58%、膽囊黏膜中為19.86%±10.49%,均顯著高于小腸黏膜的2.85%±1.28%(P＜0.05)。囊狀膽管擴張者膽管、膽囊黏膜的 Ki-67 LI分別為45.6%±20.43%、14.17%±6.76%,梭狀擴張者分別為21.67%±10.57%、25.8%±12.07%;囊狀膽管擴張者膽管黏膜中Ki-67 LI高于梭狀擴張者(P＜0.05),膽囊黏膜中Ki-67 LI囊狀擴張與梭狀擴張者近似(P＞0.05)。

CBD患兒膽管、膽囊、小腸黏膜中survivin LI分別為9.64%±4.13%、7.54%±3.21%、6.29%± 2.36%(P均 ＞0.05)。膽管囊狀擴張者膽管、膽囊黏膜的survivin LI分別為9.64%±3.87%、10.41% ±3.56%,梭狀擴張者分別為 11.42%±5.48%、6.29%±2.36%(P均＞0.05)。

3 討論

APBD是指解剖學上膽管和胰管在十二脂腸壁外提前合流,共同通道過長致使胰液和膽汁過早混合而引起的胰酶在壓力更低的膽管內被激活,在各種胰酶主要是磷脂酶 A2的作用下造成膽管壁的損傷。膽管損傷包括在形態學上的變化和膽管組織學的變化。形態學表現為膽管形狀的變化,膽管擴張。膽管黏膜的反復破壞和修復,在病理學表現為膽管組織的壞死、增生、化生和癌變[2～5]。Ki-67抗原是在增殖細胞中表達的一種核抗原,也是目前較為肯定的核增殖標志性基因,存在于細胞周期中除 G0期以外的所有階段。它開始表達于細胞周期的G1期,在 S期及G2期表達增加,至 M期達高峰,在分裂晚期很快消失。由于其半衰期短,脫離細胞周期后迅速降解,故已成為目前檢測腫瘤細胞增殖活性最可靠的指標[6,7]。本組研究結果顯示,CBD患兒的膽管黏膜Ki-67 LI明顯高于與正常小腸黏膜,囊狀擴張者膽管黏膜中Ki-67 LI明顯高于梭狀擴張者,提示CBD患兒的膽管黏膜處于高增殖狀態,囊狀擴張者的膽管黏膜增殖程度更高。說明囊狀擴張患者膽管擴張癥癌變率高于梭狀擴張者,臨床上應更加關注 CBD囊性病變患者的早期治療。

survivin是細胞抑制凋亡蛋白(IAP)家族成員,特異性表達于人和鼠的胚胎抗凋亡蛋白,其基因位于 17p25,蛋白中含有一個桿狀病毒抑制凋亡蛋白重復序列BIR分子,該分子的trp67、pro33和cys84殘基可與Caspase3和Caspase7結合,直接抑制Caspase活性,在細胞凋亡中起重要作用。survivin在胚胎組織和多種腫瘤組織中呈高表達,具有調節細胞增殖分裂和抗凋亡細胞作用,促進細胞異常增殖和惡性轉化[8～10]。本研究結果顯示,survivin在CBD患兒膽管、膽囊、小腸黏膜中的表達近似,膽管囊狀擴張與梭狀擴張者survivin LI亦無顯著性差異(P均＞0.05),證實APBD導致患兒肝外膽管組織存在高增殖現象,有明顯的癌變傾向。survivin未明顯表達可能與本組病例年齡低和病變分化程度有關,本組無癌變病例,所以survivin在各組間表達無顯著性差異。本研究結果說明臨床治療APBD導致CBD的原則應為早發現、早治療和完整切除肝外膽管組織。

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