吡蟲啉的酶聯(lián)免疫吸附分析方法研究
2010-04-12 00:00:00彭方毅姜海蓉陳遠(yuǎn)翔陳勝珍林治華廖璞何苗施漢昌蔡強(qiáng)
分析化學(xué) 2010年12期
摘 要 通過碳二亞胺法將吡蟲啉交聯(lián)于牛血清蛋白(BSA)作為免疫抗原，混合酸酐法將吡蟲啉交聯(lián)于卵清蛋白(OVA)作為包被抗原，免疫Balbc 小鼠，采用B細(xì)胞雜交瘤技術(shù)，經(jīng)免疫、融合、篩選、克隆，得到抗吡蟲啉單克隆抗體，抗體亞類為IgG1，制備的單克隆抗體效價達(dá)1×107，確定了吡蟲啉酶聯(lián)免疫吸附分析方法(ELISA)的最佳工作條件，建立了定量測定吡蟲啉的間接競爭ELISA 方法。本方法的IC50為(15.12±1.28) μgL， 檢出限為(1.76±0.02) μgL。與其它吡蟲啉結(jié)構(gòu)類似物無交叉反應(yīng)。批內(nèi)相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為.5%; 批間相對標(biāo)準(zhǔn)偏差5.1%，飲用水、重慶理工大學(xué)地下水和重慶市花溪河地表水平均添加回收率分別為102%， 97% 和85%。本研究建立了一種快速檢測環(huán)境水中吡蟲啉殘留的方法。
關(guān)鍵詞 吡蟲啉；半抗原；酶聯(lián)免疫分析法； 單克隆抗體
