中藥致腎毒性成分馬兜鈴酸A單抗制備及酶聯免疫分析方法的建立

摘 要 采用活化酯法，將馬兜鈴酸A分別與牛血清蛋白（BA）和卵清蛋白（OVA）偶聯，得到免疫抗原馬兜鈴酸ABA和包被抗原馬兜鈴酸AOVA。利用馬兜鈴酸ABA免疫Bal b/c小鼠，制得鼠單克隆抗體1A11，單抗效價為2×104；單抗為IgG1類，輕鏈為κ型；與其結構類似物馬兜鈴酸B、C和D的交叉反應率分別為28%，3.%和31.2%。基于抗馬兜鈴酸A單克隆抗體的間接競爭酶聯免疫分析方法（icELIA）的IC0為19 μg/L，檢測范圍為0.~7. μg/L。icELIA添加回收率為86%~97%，相對標準偏差在.2%~11.1%之間。利用所建立的icELIA測定了6個中藥材和個中成藥中馬兜鈴酸A的含量， 并用高效液相色譜法（PLC）進行了驗證，其中關木通、廣防己、天仙藤、馬兜鈴和青木香中均檢測出馬兜鈴酸A，而川木通和個中成藥中未檢測到馬兜鈴酸A。結果表明： 本方法可用于中藥中馬兜鈴酸A的快速檢測。

關鍵詞 馬兜鈴酸A； 單克隆抗體； 中藥； 酶聯免疫分析法