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妊娠期陰道出血時血紅蛋白F(HbF)對鑒別母體血與胎兒血的作用研究

2010-04-12 17:45:24習永生甘雪華丁洪慧
實驗與檢驗醫學 2010年5期

曾 選 ,習永生,甘雪華 ,丁洪慧,陸 瑤

(1、江西省婦幼保健院檢驗科,江西 南昌 330006;2、江西省腫瘤醫院放射科,江西 南昌 330029)

胎兒的紅細胞最主要含有血紅蛋白F(HbF)(>99%),而成人紅細胞中大部分為血紅蛋白A(HbA),血紅蛋白F含量<1%。由于血紅蛋白F抗堿和抗酸能力很強,應用洗脫和染色方法可使HbF呈鮮紅色,含其它血紅蛋白的紅細胞只留下淡影的細胞膜,利用此方法不僅能區別含HbF的紅細胞,而且能定量分析含HbF的紅細胞比例,為準確診斷妊娠期孕婦陰道出血是否有胎兒血,供臨床醫生采取及時正確治療措施提供診斷依據。現把實驗結果報告如下。

1 材料和方法

1.1 對象 2008年3月份到2010年6月份由于妊娠期陰道出血到我院就診的門診或住院孕婦113例,懷孕21周至臨產。

1.2 試劑和儀器 80%乙醇、酸性緩沖液、蘇木素染色液、伊紅染液。OLYMPUS CX21型光學顯微鏡。

1.3 方法 嚴格按照全國臨床檢驗操作規程第三版要求操作[1]。無菌采集孕婦陰道流出血,用枸櫞酸鈉抗凝,制備血涂片,自然干燥1h,用80%乙醇固定5分鐘,水洗干燥后進行酸洗脫和染色。干燥后在油鏡下觀察和計數,含有HbF的紅細胞呈鮮紅色為陽性,只留下淡影的細胞膜為陰性。

2 結果

通過檢測113例妊娠期陰道出血的孕婦陰道血HbF紅細胞,4例HbF紅細胞比例>17%,說明胎兒在宮內有出血現象,其中1例孕周33+4周的孕婦其陰道血含HbF紅細胞比例達到71%,送院前陰道已出血,胎心音異常,2小時后胎心消失,胎兒因失血而很快死在宮內,經B超證實胎兒已死亡,失去搶救胎兒的機會。另外3例診斷及時,孕周大于35周,立即終止妊娠,行剖宮產手術,新生兒及時搶救,得以存活。其余109例HbF紅細胞比例<6%,結合臨床指針、胎心監護、B超等檢查診斷陰道出血不是胎兒血。

3 討論

正常胎兒血的紅細胞特點為整個胚胎發育過程中,胎兒造血系統一直處于活躍狀態。隨胎齡的增加,胎血中的血紅蛋白含量逐漸升高。胎兒第一代紅細胞的形成主要在卵黃囊的血島[2],人胚卵黃囊造血功能持續8~12周;妊娠第4周肝臟開始造血。紅細胞發育過程中形態變化由大到小。正常人因不同發育時期,紅細胞中的Hb類型有所不同,由胚胎型Hb向胎兒型血紅蛋白,最后向成人型Hb轉換[3]。直到胎兒出生時HbF仍為臍血Hb的主要成分。胎兒的紅細胞最主要成份血紅蛋白F(HbF)含量>99%,而成人紅細胞中大部分為血紅蛋白A(HbA),血紅蛋白F含量<1%孕婦自身患有再生障礙性貧血、溶血性貧血、β珠蛋白生成障礙性貧血等血液病以及在懷孕過程中出現的胎兒-母體輸血均會引起母體外周血出現少量的HbF紅細胞,在陰道出血時即使沒有胎兒血經洗脫和染色后乃有少量陽性紅細胞,造成難以診斷,筆者采取在取陰道血的同時采集母體外周血一份一同做HbF檢測,如果陰道血的HbF紅細胞含量大于外周血的HbF紅細胞,即可診斷有胎兒血;陰道血的HbF紅細胞含量與母體外周血持平,結合臨床指針、胎心監護、B超等檢查可排除胎兒宮內失血。

妊娠期陰道出血是否含有胎兒血,胎兒血紅蛋白是診斷的決定性因素[4],對于臨床處理病情起到十分關鍵的作用。筆者通過2年多的時間對113例陰道出血的孕婦進行HbF紅細胞的檢測,其結果與臨床診斷和病人病情一致。妊娠期陰道出血時檢測出含胎兒血 (陰道血HbF紅細胞含量高于外周血),說明胎兒在宮內有出血現象,結合B超診斷,如果提示胎兒還活著,孕周大于35周,立即行剖宮產以結束妊娠,挽救孕婦和胎兒的生命為第一。經檢測陰道血為母體血,不含胎兒血,妊娠在35周前,胎兒未達到成熟,陰道出血量不多,情況穩定的孕婦可采取期待療法進行治療。

HbF的洗脫和染色方法以及抗堿試驗,可快速確定母體血中是否含過多胎兒紅細胞,有助于對分娩前胎兒晚期出血做出迅速判斷[5],為鑒別妊娠期陰道出血時是否含有胎兒血提供診斷依據。該方法操作簡便、檢測快速、結果準確、方便開展,對臨床幫助很大,為臨床醫生采取準確、果斷治療措施提供依據,降低胎兒和孕產婦死亡率意義非常大。

[1]葉應嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗操作規程[M].第3版,南京:東南大學出版社,2006:184-185.

[2]戴旻笙,傅慶詔,陳菊芳,等.血紅蛋白F及紅細胞直徑測定及意義[J].中華婦產科雜志,2000,35(4):234-235.

[3]沈柏均主編.人類臍血:基礎與臨床[M].天津:天津科學出版社,1995:16.

[4]段如麟,陳解民,徐增祥.婦產科急癥學[M].第1版,北京:人民軍醫出版社,1998:45.

[5]程 偉.人胎兒血紅蛋白的檢測及其臨床意義[J].中國實驗診斷學,2009,13(10):1474-1475.

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