體外沖擊波對犬血細胞和凝血功能影響的實驗研究

張小勇 徐衛平 邱漢嬰

激活的部分凝血活酶時間(APTT)臨床實踐表明，體外沖擊波碎石術不僅可引起心律失常，還導致血尿、皮膚瘀血等出血癥狀［1］，這是由于局部組織損傷，還是同時伴有凝血功能障礙，目前尚未明確。心臟內含有大量血液，當其受到體外沖擊波(ESW)沖擊時，血液的某些成分或功能發生是否改變，筆者目前未見報道。本文以雜種犬的右心室作為ESW的沖擊靶點，JT ESWL-Ⅲ型體外沖擊波碎石機發放ESW，研究ESW對雜種犬血細胞和凝血功能的影響。報告如下。

1 材料與方法

1．1 儀器與試劑 (1)設備:儀器血球計數儀和LD 25-2型離心機。(2)試劑:2%的枸椽酸鈉，凍干含鈣凝血活酶，部分凝血活酶試劑盒，3%的戊巴比妥鈉和JT ESWL-Ⅲ型體外沖擊波碎石機。

1．2 實驗方法

1．2．1 動物模型與體外沖擊波的發放方式雜種犬8條，雌雄不拘，體重(13．0±2．1)kg，使用3%戊巴比妥鈉經腹腔行注射麻醉(30 mg/kg)后，行右側股靜脈Seldinger穿刺，分別將6F Cordis 4極電極導管(極間距0．5 cm)送入，電極導管頭端(Ⅰ極)右室心尖部。將同雜種犬固定于JT ESWL-Ⅲ型體外沖擊波碎石機的平板床上，以電極導管第4極作為ESW沖擊靶點，整個過程在X線下完成。ESW的工作電壓為:10 kV，工作方式:自動連續(非R波同步)發射沖擊波，頻率40次/min，沖擊總數為2 000次/犬。

1．2．2 血液標本的采集:于ESW沖擊大心臟前、后即刻取其左側股靜脈血。測定凝血酶原時間(PT)和APTT的血液標本使用2%的枸椽酸鈉0．2 ml抗凝，取血量為1．8 m l，經離心機處理15 min(3 000 r/min)后取上層血漿待檢;用于血常規的標本使用專用的非抗凝管盛裝，取血量為0．5 ml，混勻后立即送檢。

1．2．3 血常規使用全自動血球計數儀對紅細胞計數(RBC)、白細胞計數(WBC)及血小板計數(PLT)進行檢測。PT使用一期法測定，APTT使用常規測定。

1．3 觀察指數 記錄ESW沖擊犬心臟前、后血細胞數和PT、APTT的測值。

1．4 統計學分析計量資料以ˉx±s表示，采用t檢驗，P＜0．05為差異有統計學意義。

2 結果

2．1 ESW沖擊犬心臟后較沖擊前，PLT下降明顯［(115±76)×109/L與 (211±76)×109/L］，差異有統計學意義(P ＜0．05)。WBC數量稍升高［(21±17)×109/L與(16±6)×109/L］，但差異無統計學意義(P ＞0．05)。RBC數量也稍升高［(6．6±1．6) ×1012/L與(6．3±1．4) ×1012/L］，但差異無統計學意義(P ＞0．05)。

2．2 ESW沖擊犬心臟后，PT及 APTT均明顯延長(14．7±1．4)s與(12．7 ±1．0)s，(41 ±9)s與(39 ±8)s(P 均 ＜0．01)。

3 討論

血細胞由紅細胞、白細胞和血小板組成，血漿中含有多種具有酶活性的蛋白質，使用ESW沖擊犬心腔內的血液，可能會使血液的某些成分或功能發生改變［2］。有鑒于此，我們對血常規和凝血功能進行了檢測。結果發現:ESW沖擊犬心臟后PLT明顯明顯減少(P＜0．05)。因此，我們推測，ESW導致PLT減少的可能原因是:(1)ESW對細胞的直接損傷;(2)心內膜損傷導致血小板易粘附、聚集，形成微血栓，血小板大量消耗。

但RBC和WBC沒有明顯改變(P＞0．05)。其主要原因是紅細胞呈雙凹面碟形結構，可塑性強，不容易造成機械破壞。而且從實驗過程來看，也幾無出血。白細胞主要分布于骨髓池、周圍池和血液池。血液池中的白細胞只是比較小的一部分，其數量變化除受白細胞總量影響外，三池白細胞的動態分布對其影響也比較大［3］。ESW沖擊使得機體處于應激狀態，并由此可能釋放出多種物質，二者共同作用，使得骨髓和周圍池中的白細胞向血液池中轉移，致使血液中的白細胞不但不減少，反而稍有上升。而血小板參與血管內皮層的完整性，其中的PF-3、PF-4等多種血小板因子也與凝血功能有關，因此，PLT的減少會導致凝血功能障礙。從實驗來看，對凝血系統功能性指標的檢測結果發現:PT和APTT均有明顯延長(P＜0．05)。但孟慶軍等［4］的研究認為:ESW后1～3 d內，血液中纖維蛋白原濃度升高，抗凝血物質如AT-Ⅲ活性下降，血液處于高凝狀態。這與本組實驗不符。就其原因，可能是ESW沖擊導致了腎組織的損傷和出血，從而激活了凝血系統而呈高凝狀態，故1～3 d后檢查凝血功能仍呈高凝狀態。APTT和PT的延長，其原因可能是:ESW引起凝血酶等多種蛋白酶的空間構象甚至一級結構改變，使其活性下降所導致，但目前還沒有一致的結論，還有待于做進一步的研究。

1 蔡正行，田武漢，余瓊芳．ESWL的并發癥．中華泌尿外科雜志，1991，12:188-190．

2 葉應嫵主編．臨床實驗診斷學．第1版．北京:人民衛生出版社，1989．1132-133．

3 李芳．老年高血壓患者凌晨血壓增高與血液流變學的相關性研究．河北醫藥，2007，29:940-941．

4 孟慶軍，周惜才，章詠裳．ESWL對機體凝血及纖溶系統的影響和鈣拮抗劑的防護性作用．中華泌尿外科雜志，1996，10:61-63．