陽性脂質體與非編碼DNA復合物的抗腫瘤作用

王中瑜

陽性脂質體(非病毒載體)介導的基因治療因其方法的簡單性，傳遞質粒的內在安全性，多次給藥產生的抗腫瘤作用的穩定性而備受研究者的青睞。如今許多研究表明，陽性脂質體與非編碼DNA形成的復合物(cationic lipid DNA complexes CLDC)能產生抗腫瘤作用。CLDC在全身或局部注射后可以引起細胞因子的釋放, 炎性細胞的聚集以及淋巴細胞的活化，從而產生非特異和特異的抗腫瘤免疫反應。也有研究報道CLDC經靜脈給藥后，在許多器官中可產生急性毒性反應，引起白細胞、血小板減少和轉氨酶升高。在CLDC的抗腫瘤和急性毒性反應作用中，細菌DNA中的非甲基化的CpG基序發揮了重要的作用。

1 CLDC在體內的抗腫瘤作用

許多研究都發現陽性脂質體與非編碼DNA復合物通過全身或者局部給藥可以抑制多種腫瘤在體內的生長，并延長荷瘤動物的生存期。

1.1 CLDC經靜脈給藥產生抗腫瘤作用 Dow等[1]采用尾靜脈注射法分別注射MCA-205、B16和CT26細胞建立肺轉移模型，然后靜脈給予陽性脂質體DNA(不編碼任何基因)復合物(CLDC)，發現在這三種模型中肺轉移瘤的數量都明顯低于對照組，在CT26肺轉移模型中，CLDC治療組的生存期(35天)遠遠高于對照組(15天)。而單純脂質體或低劑量的DNA則沒有產生抗腫瘤作用。

Whitmore等[2]也通過實驗發現靜脈給與CLDC可以抑制小鼠皮下接種的C3纖維肉瘤的生長。

1.2 CLDC經腹膜內給藥產生的抗腫瘤作用 Lanuti等[3]研究發現經腹腔多次給予CLDC會抑制腹腔間脾瘤(AC29和AB12)生長，復合物不但可以延長荷瘤小鼠的生存期，而且可以保護小鼠免受下一次腫瘤的入侵。

2 CLDC的抗腫瘤作用機制

關于陽性脂質體DNA復合物的抗腫瘤作用機制，研究者們作了多方面的探討，他們發現復合物在全身或局部注射后可以活化促炎癥反應，引起細胞因子的釋放，炎性細胞的聚集以及淋巴細胞的活化，從而產生了非特異和特異的抗腫瘤免疫反應。在這個過程中，細菌DNA中的非甲基化的CpG基序發揮了重要的作用。

2.1 免疫反應在CLDC抗腫瘤中的作用 CLDC產生的免疫反應有兩個階段，最初是一個即時產生的固有免疫反應，然后發展成一個獲得性免疫反應。前者以CD8+和NK細胞的產生為特征，可以使大部分腫瘤細胞被清除掉；而后者以產生腫瘤細胞特異的CTLs為特征，可以逐漸清除殘留的腫瘤細胞[1-5]。

2.2 非甲基化的CpG基序CLDC抗腫瘤中的作用 機體對CLDC反應的多樣性表明機體免疫系統的許多成分都被活化了，在這種活化效應中CLDC中的DNA尤其是DNA中的非甲基化的CpG基序可能起了主要作用[6-10]。

2.3 CLDC的直接抗腫瘤作用 哺乳動物DNA中的CpG二核苷酸大部分(60%～90%)被甲基化，這與完全缺乏甲基化CpG二核苷酸的細菌DNA形成對比，因此它們被用來研究非甲基化CpG在CLDC介導的抗腫瘤免疫反應中的作用[11-12]。

3 CLDC經靜脈給藥產生的急性毒性反應

在靜脈給與CLDC24小時內，小鼠會出現昏睡，立毛等反應，這些反應提示CLDC對機體產生了一些不良的生理變化，而且這些反應高度依賴于CLDC的劑量，在劑量較低時，小鼠的這些反應通常很輕微，而且一兩天后就可以恢復正常；在劑量較高時，這些反應的發生率和致死率都很高。已有許多研究報道了CLDC經靜脈給藥在許多器官中產生的急性毒性反應[13-16]。

4 問題與展望

陽性脂質體與非編碼DNA復合物的抗腫瘤作用為腫瘤治療提供了一條新思路，但對其作用機制以及如何降低其毒副作用仍需進一步的研究。

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