袖珍椰子褐斑病病原菌及防治研究

藍(lán)偉根

（深圳梅林公園，廣東 深圳 510642）

袖珍椰子（Chamaedorea elegans）原產(chǎn)于墨西哥和委內(nèi)瑞拉，為四季常綠的熱帶植物。袖珍椰子以其株態(tài)秀雅，耐陰性強，是裝飾和美化室內(nèi)的重要觀葉植物。我國近年才開始引種栽培，試種中發(fā)現(xiàn)袖珍椰子的葉片、葉柄和莖上經(jīng)常發(fā)生褐斑病，以葉片為重。受害葉片上產(chǎn)生近圓形或橢圓形的褐色病斑，嚴(yán)重時病斑擴大相互融合成大病斑，致使葉片干枯，嚴(yán)重影響袖珍椰子的生長與觀賞價值[1-2]。為明確其發(fā)病原因，筆者2009年從廣東廣州、深圳采集袖珍椰子褐斑病標(biāo)本，進行病原菌分離、致病性測定和分類鑒定，同時測定其致病菌在不同溫度下的生長發(fā)育情況和對8種殺菌劑的敏感性，以期為袖珍椰子褐斑病的有效防治提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 病原菌的分離培養(yǎng)及致病性測定

2009年從廣東廣州、深圳采集袖珍椰子褐斑病病害標(biāo)本7份，采用組織分離法[3]分離病斑組織中的病原菌，單孢純化后移入PSA培養(yǎng)基斜面試管中保存?zhèn)溆谩?/p>

致病性測定:選用沒有病害癥狀的袖珍椰子植株，將在PSA培養(yǎng)基上培養(yǎng)7 d的供試菌菌苔（直徑5 mm）直接貼在葉片上的接種部位，以貼無菌的PSA培養(yǎng)基塊作為對照。接種后用小塊滅菌的濕棉花蓋住接種部位保濕，24 h后將菌絲塊和棉花去掉。注意噴水保濕，10 d后檢查結(jié)果，并對所有接種植株再進行組織分離。每處理10個接種點，3次重復(fù)。

1.2 溫度對病原菌生長發(fā)育影響的測定

在PSA平板上移入直徑5 mm的菌苔，在4～36℃溫度范圍之內(nèi)，分別置于不同溫度條件下培養(yǎng)。培養(yǎng)6 d后測量菌落生長直徑，并用血球記數(shù)板在顯微鏡下測定產(chǎn)孢量。每處理3皿，重復(fù)3次。

1.3 殺菌劑對病原菌生長抑制作用的測定

1.3.1 供試殺菌劑65%代森鋅（好生靈）WP（上海惠光化學(xué)有限公司）；57.6%氫氧化銅（冠菌清）DP（美國亞特路國際有限公司）；70%代森錳鋅WP（江蘇利民化工有限責(zé)任公司）；70%甲基托布津WP（日本曹達(dá)株式會社）；75%百菌清WP（云南化工廠）；95%惡霉靈WP（北京北農(nóng)綠亨科技發(fā)展有限公司）；25%多·硫（固本）WP（深圳易普樂化工有限公司）；50%多菌靈WP（江蘇新沂農(nóng)藥廠）。

1.3.2 測定方法采用菌絲生長速率測定法，在定量的PSA培養(yǎng)基中加入殺菌劑，配制成含不同殺菌劑的培養(yǎng)基平板，移入直徑為5 mm的菌苔，置于26℃溫度下培養(yǎng)，以不加殺菌劑的處理作為對照，6 d后測量菌落生長直徑和計算抑制率。每處理4皿，重復(fù)3次。

1.4 殺菌劑對袖珍椰子褐斑病預(yù)防效果的測定

選用沒有病害癥狀的袖珍椰子植株，分別噴霧濃度為1000 mg/L的代森錳鋅、多·硫（固體）溶液，以噴霧自來水的處理作為對照，晾干后再噴霧濃度為1×105個分生孢子/mL的褐斑病菌孢子懸浮液進行人工接種，接種后用塑料薄膜保濕24 h，14 d后調(diào)查發(fā)病情況，計算病情指數(shù)。每處理3次重復(fù)。植株發(fā)病程度（病級值）分為5個等級，0級:無病；1級:個別葉片產(chǎn)生病斑；2級:1/3以上的葉片上產(chǎn)生病斑；3級:1/2以上的葉片上產(chǎn)生病班；4級:2/3以上葉片產(chǎn)生病班。

2 結(jié)果與分析

2.1 袖珍椰子褐斑病菌培養(yǎng)性狀和致病性

從7份袖珍椰子褐斑病標(biāo)本的病斑組織中均能夠分離出炭疽菌，該菌在PDA培養(yǎng)基上生長良好，菌落圓形，邊緣整齊，氣生菌絲初為白色，后轉(zhuǎn)為灰色，培養(yǎng)6 d后在菌落中央產(chǎn)生橘紅色黏液狀物。在顯微鏡下該菌分生孢子長橢圓形，無色，單孢，內(nèi)含2～3個油球。不同菌株的菌絲生長速度、分生孢子大小和產(chǎn)孢量稍有差異，但分生孢子和附著孢的形態(tài)均符合膠孢炭疽菌（Colletotrichum gloeosp orioides Penz.）的形態(tài)標(biāo)準(zhǔn)[4]。

將從袖珍椰子褐斑病組織中分離出的炭疽菌，人工接種在沒有病害癥狀的袖珍椰子葉片上，能夠?qū)е滦湔湟尤~片產(chǎn)生與自然發(fā)病的褐斑病癥狀相同的病斑，人工接種發(fā)病率為100%。從人工接種產(chǎn)生的病斑組織中可再次分離出該炭疽菌。因此確認(rèn)該炭疽菌是導(dǎo)致袖珍椰子褐斑病的病原菌。

2.2 溫度對病原菌生長發(fā)育的影響

袖珍椰子褐斑病菌在PSA培養(yǎng)基上生長的溫度范圍為6～34℃，在4℃和36℃不能生長，最適生長溫度26℃。產(chǎn)生分生孢子的溫度范圍為20～30℃，最適24℃。分生孢子萌發(fā)的溫度范圍為6～34℃，最適溫度范圍為26～30℃（表1）。

表1 溫度對袖珍椰子褐斑病菌生長發(fā)育的影響

2.3 殺菌劑對病原菌生長的抑制作用

在8種供試殺菌劑中，代森錳鋅、多·硫（固本）對袖珍椰子褐斑病菌的抑制作用最強，濃度500 μg/mL即可達(dá)到100%的抑制率。其次是百菌清、惡霉靈、甲基托布津，1000μg/mL的濃度下抑制率超過100%。多菌靈、氫氧化銅、代森鋅的抑制作用較弱（表2）。

2.4 殺菌劑對袖珍椰子褐斑病的防治效果

人工接種14 d后發(fā)病情況調(diào)查表明，代森錳鋅和多·硫（固體）處理病情指數(shù)分別為4.7、8.6，對照處理病情指數(shù)為48.4。代森錳鋅和多·硫（固體）對袖珍椰子褐斑病有很好的防治效果，防效分別達(dá)90.3%、82.2%。

3 小結(jié)與討論

膠孢炭疽菌是一種多寄主病原真菌，能夠侵染橡膠、麥冬、蘋果、西瓜、芒果、辣椒和木薯等多種農(nóng)作物，引起作物發(fā)病[5-7]。經(jīng)過對袖珍椰子褐斑病病株多次進行病原菌分離、致病性測定，證實膠孢炭疽菌C.gloeosporioides是廣東廣州、深圳袖珍椰子褐斑病的病原菌。該菌在6～34℃溫度范圍內(nèi)均能生長發(fā)育，但適宜溫度為20～32℃。由此可知，雖然袖珍椰子褐斑病在廣東全年都有發(fā)生，但每年發(fā)病高峰期應(yīng)在4～10月，因為這段時期的溫度比較適合病原菌的生長發(fā)育。高溫、高濕及通風(fēng)不良的環(huán)境下利于袖珍椰子褐斑病易發(fā)生，病菌主要通過雨水、澆灌水、濺水傳播，在利于病原菌生長的環(huán)境條件下進行多次再侵染，導(dǎo)致病害發(fā)生嚴(yán)重[6]。

表2 殺菌劑對袖珍椰子褐斑病菌絲生長的抑制作用

8種供試殺菌劑對袖珍椰子病害菌絲生長制作用測定結(jié)果顯示:代森錳鋅和多·硫（固本）對袖珍椰子褐斑病菌抑制作用最強；百菌清、惡霉靈和甲基托布津也有較強抑制作用；而多菌靈、氫氧化銅和代森鋅的生長抑制作用較弱。

此外，代森錳鋅和多·硫（固本）經(jīng)人工噴霧（1000 mg/L）的接種健康植株效果試驗，防效分別達(dá)90.3%和82.2%，可作為防治該病害的首選藥劑。

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[3]方中達(dá).植病研究方法（第三版）[M].北京:農(nóng)業(yè)出版社，1998.124-125.

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[6]王敬尊.蘋果炭疽病的識別與防治[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009，37（18）:8560-8561，8646.

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