藍偉根
(深圳梅林公園,廣東 深圳 510642)
袖珍椰子(Chamaedorea elegans)原產于墨西哥和委內瑞拉,為四季常綠的熱帶植物。袖珍椰子以其株態秀雅,耐陰性強,是裝飾和美化室內的重要觀葉植物。我國近年才開始引種栽培,試種中發現袖珍椰子的葉片、葉柄和莖上經常發生褐斑病,以葉片為重。受害葉片上產生近圓形或橢圓形的褐色病斑,嚴重時病斑擴大相互融合成大病斑,致使葉片干枯,嚴重影響袖珍椰子的生長與觀賞價值[1-2]。為明確其發病原因,筆者2009年從廣東廣州、深圳采集袖珍椰子褐斑病標本,進行病原菌分離、致病性測定和分類鑒定,同時測定其致病菌在不同溫度下的生長發育情況和對8種殺菌劑的敏感性,以期為袖珍椰子褐斑病的有效防治提供理論依據。
2009年從廣東廣州、深圳采集袖珍椰子褐斑病病害標本7份,采用組織分離法[3]分離病斑組織中的病原菌,單孢純化后移入PSA培養基斜面試管中保存備用。
致病性測定:選用沒有病害癥狀的袖珍椰子植株,將在PSA培養基上培養7 d的供試菌菌苔(直徑5 mm)直接貼在葉片上的接種部位,以貼無菌的PSA培養基塊作為對照。接種后用小塊滅菌的濕棉花蓋住接種部位保濕,24 h后將菌絲塊和棉花去掉。注意噴水保濕,10 d后檢查結果,并對所有接種植株再進行組織分離。每處理10個接種點,3次重復。
在PSA平板上移入直徑5 mm的菌苔,在4~36℃溫度范圍之內,分別置于不同溫度條件下培養。培養6 d后測量菌落生長直徑,并用血球記數板在顯微鏡下測定產孢量。每處理3皿,重復3次。
1.3.1 供試殺菌劑65%代森鋅(好生靈)WP(上海惠光化學有限公司);57.6%氫氧化銅(冠菌清)DP(美國亞特路國際有限公司);70%代森錳鋅WP(江蘇利民化工有限責任公司);70%甲基托布津WP(日本曹達株式會社);75%百菌清WP(云南化工廠);95%惡霉靈WP(北京北農綠亨科技發展有限公司);25%多·硫(固本)WP(深圳易普樂化工有限公司);50%多菌靈WP(江蘇新沂農藥廠)。
1.3.2 測定方法采用菌絲生長速率測定法,在定量的PSA培養基中加入殺菌劑,配制成含不同殺菌劑的培養基平板,移入直徑為5 mm的菌苔,置于26℃溫度下培養,以不加殺菌劑的處理作為對照,6 d后測量菌落生長直徑和計算抑制率。每處理4皿,重復3次。

選用沒有病害癥狀的袖珍椰子植株,分別噴霧濃度為1000 mg/L的代森錳鋅、多·硫(固體)溶液,以噴霧自來水的處理作為對照,晾干后再噴霧濃度為1×105個分生孢子/mL的褐斑病菌孢子懸浮液進行人工接種,接種后用塑料薄膜保濕24 h,14 d后調查發病情況,計算病情指數。每處理3次重復。植株發病程度(病級值)分為5個等級,0級:無病;1級:個別葉片產生病斑;2級:1/3以上的葉片上產生病斑;3級:1/2以上的葉片上產生病班;4級:2/3以上葉片產生病班。

從7份袖珍椰子褐斑病標本的病斑組織中均能夠分離出炭疽菌,該菌在PDA培養基上生長良好,菌落圓形,邊緣整齊,氣生菌絲初為白色,后轉為灰色,培養6 d后在菌落中央產生橘紅色黏液狀物。在顯微鏡下該菌分生孢子長橢圓形,無色,單孢,內含2~3個油球。不同菌株的菌絲生長速度、分生孢子大小和產孢量稍有差異,但分生孢子和附著孢的形態均符合膠孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosp orioides Penz.)的形態標準[4]。
將從袖珍椰子褐斑病組織中分離出的炭疽菌,人工接種在沒有病害癥狀的袖珍椰子葉片上,能夠導致袖珍椰子葉片產生與自然發病的褐斑病癥狀相同的病斑,人工接種發病率為100%。從人工接種產生的病斑組織中可再次分離出該炭疽菌。因此確認該炭疽菌是導致袖珍椰子褐斑病的病原菌。
袖珍椰子褐斑病菌在PSA培養基上生長的溫度范圍為6~34℃,在4℃和36℃不能生長,最適生長溫度26℃。產生分生孢子的溫度范圍為20~30℃,最適24℃。分生孢子萌發的溫度范圍為6~34℃,最適溫度范圍為26~30℃(表1)。

表1 溫度對袖珍椰子褐斑病菌生長發育的影響
在8種供試殺菌劑中,代森錳鋅、多·硫(固本)對袖珍椰子褐斑病菌的抑制作用最強,濃度500 μg/mL即可達到100%的抑制率。其次是百菌清、惡霉靈、甲基托布津,1000μg/mL的濃度下抑制率超過100%。多菌靈、氫氧化銅、代森鋅的抑制作用較弱(表2)。
人工接種14 d后發病情況調查表明,代森錳鋅和多·硫(固體)處理病情指數分別為4.7、8.6,對照處理病情指數為48.4。代森錳鋅和多·硫(固體)對袖珍椰子褐斑病有很好的防治效果,防效分別達90.3%、82.2%。
膠孢炭疽菌是一種多寄主病原真菌,能夠侵染橡膠、麥冬、蘋果、西瓜、芒果、辣椒和木薯等多種農作物,引起作物發病[5-7]。經過對袖珍椰子褐斑病病株多次進行病原菌分離、致病性測定,證實膠孢炭疽菌C.gloeosporioides是廣東廣州、深圳袖珍椰子褐斑病的病原菌。該菌在6~34℃溫度范圍內均能生長發育,但適宜溫度為20~32℃。由此可知,雖然袖珍椰子褐斑病在廣東全年都有發生,但每年發病高峰期應在4~10月,因為這段時期的溫度比較適合病原菌的生長發育。高溫、高濕及通風不良的環境下利于袖珍椰子褐斑病易發生,病菌主要通過雨水、澆灌水、濺水傳播,在利于病原菌生長的環境條件下進行多次再侵染,導致病害發生嚴重[6]。

表2 殺菌劑對袖珍椰子褐斑病菌絲生長的抑制作用
8種供試殺菌劑對袖珍椰子病害菌絲生長制作用測定結果顯示:代森錳鋅和多·硫(固本)對袖珍椰子褐斑病菌抑制作用最強;百菌清、惡霉靈和甲基托布津也有較強抑制作用;而多菌靈、氫氧化銅和代森鋅的生長抑制作用較弱。
此外,代森錳鋅和多·硫(固本)經人工噴霧(1000 mg/L)的接種健康植株效果試驗,防效分別達90.3%和82.2%,可作為防治該病害的首選藥劑。
[1]賴貝元.廣州地區主要花木病害發生動態及其防治方法[J].中國園林,1997,13(3):29-31.
[2]孫永泰.棕櫚植物病蟲害及其防治[J].熱帶林業,2004,32(1):29-30.
[3]方中達.植病研究方法(第三版)[M].北京:農業出版社,1998.124-125.
[4]張中義.植物病原真菌學[M].成都:四川科學出版社,1989.395.
[5]習平根,李敏慧,陳一新,等.棕櫚科觀賞植物真菌病害鑒定[J].華南農業大學學報(自然科學版),2003,24(2):34-37.
[6]王敬尊.蘋果炭疽病的識別與防治[J].安徽農業科學,2009,37(18):8560-8561,8646.
[7]張海珊,檀根甲,陳莉.2種麥冬炭疽病菌生物學特性的研究[J].草業學報,2008,17(4):118-123.