新疆準噶爾鐵線蓮不同部位提取液抑菌活性初步研究

古麗巴哈爾·阿巴拜克力

(新疆師范大學生命科學學院，新疆 烏魯木齊 830054)

新疆準噶爾鐵線蓮不同部位提取液抑菌活性初步研究

古麗巴哈爾·阿巴拜克力

(新疆師范大學生命科學學院，新疆 烏魯木齊 830054)

用水和70%乙醇從準噶爾鐵線蓮不同部位中提取其活性成分，探討其抑菌作用。結果表明：葉水提物的MIC值分別為大腸桿菌5g/100mL，金黃色葡萄球菌、短小芽孢桿菌為3g/100mL、枯草桿菌為1g/100mL；葉醇提物的MIC值分別為大腸桿菌3g/100mL，金黃色葡萄球菌、枯草桿菌為0.5g/100mL、短小芽孢桿菌1g/100mL。莖水提物的MIC值分別為大腸桿菌10g/100mL，金黃色葡萄球菌7g/100mL、短小芽孢桿菌、枯草桿菌為5g/100mL。莖醇提物的MIC值分別為大腸桿菌7g/100mL，金黃色葡萄球菌5g/100mL，枯草桿菌、短小芽孢桿菌為3g/100mL。花水提物的MIC值分別為大腸桿菌5g/100mL，金黃色葡萄球菌、枯草桿菌為3g/100mL，短小芽孢桿菌1g/100mL。花醇提物的MIC值分別為大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、短小芽孢桿菌為1g/100mL，枯草桿菌為0.5g/100mL。果實水提物的MIC值分別為大腸桿菌、短小芽孢桿菌為5g/100mL，金黃色葡萄球菌、枯草桿菌為3g/100mL；果實醇提物的MIC值分別為大腸桿菌為3g/100mL，金黃色葡萄球菌、短小芽孢桿菌、枯草桿菌為1g/100mL。

準噶爾鐵線蓮；不同部位；提取物；抑菌活性

準噶爾鐵線蓮(Clematis songarica Bge.)毛茛科鐵線蓮屬，主要產于我國新疆、內蒙古西部，國外在蒙古、中亞荒漠地區也有分布。生長于荒漠低山麓前洪積扇，石礫質沖積堆以及荒漠河岸。直立小灌木，高4 0～120cm。單葉對生或簇生；花序為聚傘花序或圓錐狀聚傘花序，頂生；白色或淡黃色，花期6～7月，果期7～8月[1]。

迄今國內外對準噶爾鐵線蓮植物化學成分的研究比較少，有關其水提液和醇提液抑菌效果的比較研究則尚未見報道。因此，采用不同提取方法從準噶爾鐵線蓮

不同部位中提取有效抗菌成分做抑菌實驗，不僅有望篩選到具有抗菌成分的藥材新資源，也可獲知有效的提取方法。這對評價準噶爾鐵線蓮的藥用價值，開發利用這一自然資源具有實際意義[2]。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

準噶爾鐵線蓮，于2008 年8月采自新疆烏魯木齊縣永豐鄉農田田埂。將不同部位晾干、粉碎， 備用。

蛋白胨、瓊脂、 牛肉膏、蔗糖、葡萄糖、乙醇、NaCl、NaOH、HCl。

1.2 菌種與培養基

大腸肝菌(Escherichia coli)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、枯草桿菌(Bacillus subtilis)、短小芽孢桿菌(Bacillus pum ilus)、以下分別簡稱 E.c、S.a、B.s、B.p。以上菌種均由新疆大學提供。

牛肉膏蛋白胨培養基[3]。

1.3 方法

1.3.1 不同部位水提取液的制備[4]

分別稱取準噶爾鐵線蓮葉、莖、花以及果實各5g，分別加10倍樣量的蒸餾水50mL，90℃浸提3h，然后將樣品趁熱過濾收集濾液，濾渣中加入25mL蒸餾水同條件提取2.5h，再次過濾并合并兩次濾液，將濾液置入旋轉蒸發儀中旋轉蒸發濃縮至黏稠狀，然后用水溶解并定容至10mL制成水懸濁液，分別獲得0.5g/mL的水提取液。

1.3.2 不同部位醇提取液的制備

分別稱取準噶爾鐵線蓮葉、莖、花以及果實各5g，分別按照各自的最佳提取工藝進行浸提，然后將樣品趁熱過濾收集濾液，將濾液置入旋轉蒸發儀中旋轉蒸發濃縮至黏稠狀，然后用水溶解并定容至10mL制成水懸濁液，分別獲得0.5g/mL的乙醇提取液。

1.3.3 菌懸液的制備[5]

將各供試菌菌種接種于普通營養瓊脂斜面培養基上，37℃培養20～22h活化，然后將斜面活化好的各供試菌體置于裝有9mL無菌生理鹽水的試管中，振蕩搖勻，再分別稀釋制成含菌量為106～108CFU/mL的菌懸液。

1.3.4 抑菌實驗

1.3.4.1 抑菌效力的測定[6]

將滅菌過的培養基制成平板，吸取0.2mL菌懸液均勻涂抹到平板上。將各浸漬過準噶爾鐵線蓮葉、莖、花、果實水提液和醇提液中的濾紙圓片(6mm)風干，放到每個涂有菌液的平板上，等距離放3片，每個實驗平行3次，并用無菌水作空白對照，確定抑菌效果。在37℃條件下培養24h后測定抑菌圈直徑大小，取平均值。

1.3.4.2 最低抑菌濃度(MIC)的測定

配制足夠量的牛肉膏蛋白胨液體培養基參照文獻[7]進行測定。以上操作均在無菌條件下進行。

3.4.3 最低殺菌濃度(MBC)的測定

將提取物濃度高于MIC(包括MIC)的各試管或培養皿繼續培養24h，觀察生長情況。以仍無菌生長的添加量為該提取液的最低殺菌濃度。

2 結果與分析

2.1 準噶爾鐵線蓮水提取液和醇提取液對各供試菌的影響

表 1 準噶爾鐵線蓮水提取液的抑菌作用Table 1 Antibacterial activity of PWE

由表1可知，準噶爾鐵線蓮莖、葉、花以及果實部位水提取液對4種供試菌株具有不同的抑菌效果。抑菌效果依次為：葉＞花＞果實＞莖。莖、葉水提取液對4種菌株的抑菌效果依次為：枯草桿菌 ＞短小芽孢桿菌＞金黃色葡萄球菌＞大腸肝菌。花、果實水提取液對4種菌株的抑菌效果依次為：金黃色葡萄球菌＞枯草桿菌＞短小芽孢桿菌＞大腸肝菌。

表 2 準噶爾鐵線蓮醇提取液的抑菌作用Table 2 Antibacterial activity of PAE

由表2可知，準噶爾鐵線蓮不同部位醇提取液對4種供試菌株的抑菌效果依次為：葉＞花＞果實＞莖。莖、葉、花、果實等部位醇提取液對4種供試菌株的抑菌效果依次為：枯草桿菌＞金黃色葡萄球菌＞短小芽孢桿菌＞大腸肝菌。

2. 2水提取液與醇提取液對各供試菌的最低抑菌濃度

由表3可知，準噶爾鐵線蓮葉水提取液對4種供試細菌的最低抑菌濃度分別為大腸桿菌為5g/100mL，短小芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌3g/100mL，枯草桿菌為1g/100mL。醇提取液抑菌效果較水提取液好，醇提取

液對4種供試細菌的最低抑菌濃度分別為大腸桿菌為3g/100mL，金黃色葡萄球菌、枯草桿菌為0.5g/100mL，短小芽孢桿菌為1g/100mL。

表3 準噶爾鐵線蓮葉水提液、醇提液對各供試菌的最低抑菌濃度Table 3 MICs of PWE and PAE from leaves on different bacteria

表4 準噶爾鐵線蓮莖水提取液、醇提取液對各供試菌的最低抑菌濃度Table 4 MICs of PWE and PAE from stems on different bacteria

由表4可知，準噶爾鐵線蓮莖水提取液對4種供試細菌的最低抑菌濃度分別為：大腸桿菌為10g/100mL，對枯草桿菌、短小芽孢桿菌的最低抑菌濃度為5g/100mL，對金黃色葡萄球菌為7g/100mL。

醇提取液對4種供試細菌的最低抑菌濃度分別為大腸桿菌7g/100mL，金黃色葡萄球菌5g/100mL，枯草桿菌、短小芽孢桿菌為3g/100mL。

表5 準噶爾鐵線蓮花水提取液、醇提取液對各供試菌的最低抑菌濃度(MIC)Table 5 MICs of PWE and PAE from flowers on different bacteria

由表5可知，準噶爾鐵線蓮花醇提取液抑菌效果較水提取液好。水提取液對4種供試細菌的最低抑菌濃度分別為大腸桿菌5g/100mL，枯草桿菌、金黃色葡萄球菌為3g/100mL，短小芽孢桿菌為1g/100mL。醇提液對4種供試細菌的最低抑菌濃度分別為大腸桿菌1g/100mL、金黃色葡萄球菌1g/100mL、短小芽孢桿菌為1g/100mL，枯草桿菌為0.5g/100mL。

表6 準噶爾鐵線蓮果實水提取液、醇提取液對各供試菌的最低抑菌濃度Table 6 MICs of PWE and PAE from fruits on different bacteria

由表6可知，準噶爾鐵線蓮果實水提取物對4種供試細菌的最低抑菌濃度分別為大腸桿菌5g/100mL、短小芽孢桿菌5g/100mL、金黃色葡萄球菌5g/100mL、枯草桿菌3g/100mL。醇提取物對各供試細菌的最低抑菌濃度分別為：大腸桿菌為3g/100mL，金黃色葡萄球1g/100mL、枯草桿菌、短小芽孢桿菌為1g/100mL。

3 結 論

準噶爾鐵線蓮水提取液和醇提取液都具有不同程度的抑菌活性，其中醇提取液的抑菌效力強，對球菌和桿菌、革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌都有抑菌活性。醇提取液比水提取液具有更明顯的抑菌效果，這說明乙醇更容易將植物體內有效抑菌物質提取出來。此實驗證明準噶爾鐵線蓮提取液對造成食品腐敗的幾種微生物具有一定的抗性，為其有效成分提取及開發利用提供了參考。對于其抗菌活性物質還有待進一步的研究。

[1]新疆植物志編輯委員會. 新疆植物志∶ 2卷[M]. 烏魯木齊∶ 新疆科技衛生出版社, 1994.

[2]黃文武. 鐵線蓮屬植物的研究進展[J]. 中草藥, 2002, 33(3)∶ 285-288.

[3]沈萍, 范秀容, 李廣武. 微生物學實驗[M]. 3版. 北京∶ 高等教育出版社, 1999∶ 214-215.

[4]霍光華, 高蔭榆, 陳明輝. 烏柏葉抑菌活性功能成分的研究[J]. 食品與發酵工業, 2005, 31(3)∶ 52-56.

[5]嚴贊開. 生姜提取物的抑菌試驗[J]. 中國食品添加劑, 2005(1)∶ 74-76.

[6]趙東亮, 郁建平, 周曉秋, 等. 博落回生物堿的抑菌作用研究[J]. 食品科學, 2005, 26(1)∶ 45-47.

[7]買合布白·阿不都熱依木, 古麗斯瑪依·艾拜都拉, 艾克白爾·買買提, 等. 心草水提液和醇提液抑菌作用研究[J]. 食品科學, 2006, 27(12)∶ 198-200.

Antibacterial Activities of PWE and PAE from Clematis songarica Bge. in Xinjiang

Gulibahaer·ABABAIKELI
(College of Life Science, Xinjiang Normal University, Urumqi 830054, China)

Antibacterial activities of water extract (PWE) a nd alcohol extract (PAE, 70g/100mL ethanol) from Clematis songarica Bge. were evaluated. Results indicated that minimum inhibition concentrations (MICs) of PWE from leaves were 5g/100mL for Echerichia coli, 3g/100mL for Staphylococcus aureus and Bacillus pumilus, and 1g/100mL for Bacillus subtilis. MICs of PAE from leaves were 3g/100mL for Echerichia coli, 0.5 g/100mL for Staphylococcus aureus and Bacillus subtilis, and 1 g/100mL for Bacillus pumilus. MICs of PWE from stems were 10 g/100mL for Echerichia coli, and 7 g/100mL for Staphylococcus aureus, and 5 g/ 100mL for Bacillus pumilus and Bacillus subtilis. MICs of PAE from stems were 7g/100mL for Echerichia coli, 5 g/100mL for Staphylococcus aureus, and 3 g/100mL for Bacillus subtilis and Bacillus pumilus. MICs of PWE from flowers were 5 g/100mL for Echerichia coli, 3 g/100mL for Staphylococcus aureus and Bacillus subtilis, and 1g/100mL for Bacillus pumilus. MICs of PAE from flowers were 1 g/100mL for Echerichia coli, Staphylococcus aureus and Bacillus pumilus, and 0.5 g/100mL for Bacillus subtilis. MICs of PWE from fruits were 5 g/100mL for Echerichia coli and Bacillus pumilus, and 3 g/100mL for Staphylococcus aureus and Bacillus subtilis. MICs of PAE from fruits were 3 g/100mL for Echerichia coli, and 1g/100mL for Staphylococcus aureus, Bacillus pumilus and Bacillus subtilis.

Clematis songarica Bge.；different parts；extract；antimicrobial activity

TS201.3

A

1002-6630(2010)09-0117-03

2009-10-29

古麗巴哈爾·阿巴拜克力(1969—)，女，副教授，研究方向為植物有效成分分析。E-mail：gvlbahar.a@163.com