抗核小體抗體檢測(cè)與系統(tǒng)性紅斑狼瘡的臨床意義

靳淑玲 楊永昌 王北寧

目前臨床實(shí)驗(yàn)室診斷系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic iupus crythematosus，SLE)，主要采用檢測(cè)抗核抗體(ANA)，抗雙鏈DNA(抗ds-DNA)，抗smith抗體(抗SM抗體)為主，ANA是一種非特異性抗體?？筪s-DNA，抗SM雖然對(duì)SLE有較高的特異性，但敏感性較低。近年發(fā)現(xiàn)抗核小體抗體(AnuA)對(duì)SLE的診斷和疾病監(jiān)測(cè)有重要意義。本文通過(guò)采用免疫印跡法測(cè)定SLE患者，其他風(fēng)濕病患者 及健康對(duì)照人群的血清中AnuA的水平。探討AnuA在SLE實(shí)驗(yàn)診斷中的價(jià)值及臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 我院門(mén)診及住院SLE患者80例(SLE組)，其中女60例，男20例;年齡12～70歲。診斷符合1997年美國(guó)風(fēng)濕病學(xué)會(huì)修訂的SLE分類(lèi)診斷標(biāo)準(zhǔn)。我院健康體檢者30例為健康對(duì)照組。其他風(fēng)濕病組20例，其中風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎13例，原發(fā)性干燥綜合征7例。均符合美國(guó)風(fēng)濕學(xué)會(huì)相應(yīng)診斷標(biāo)準(zhǔn)。

1.2 標(biāo)本采集與處理 抽待測(cè)者靜脈血2 ml，分離血清，冰箱保存待測(cè)。檢測(cè)方法如下:取免疫印跡條帶板加稀釋血清(100倍)1.5 ml，放自動(dòng)搖床30 min。用洗液洗1.5 ml，清洗3 次，每次5 min。加入1∶10稀釋的酶結(jié)合物1.5 ml(堿性磷酸酶標(biāo)記IgG)自動(dòng)搖床30 min。再洗3次，每次5 min。加入1.5 ml底物液5～10 min后判讀。結(jié)果采用EURO Line Scan軟件掃描與標(biāo)準(zhǔn)比對(duì)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 AnuA在3組檢測(cè)結(jié)果 SLE組陽(yáng)性 58例，陽(yáng)性率72.5%。其他風(fēng)濕病組陽(yáng)性3例，陽(yáng)性率15.0%。SLE組抗SM陽(yáng)性30例，陽(yáng)性率37.5%，ds-DNA抗體陽(yáng)性21例，陽(yáng)性率26.3%。健康對(duì)照組AnuA均為陰性。SLE組與其他風(fēng)濕病組、健康對(duì)照組AnuA測(cè)定結(jié)果差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見(jiàn)表 1。

表1 AnuA在3組檢測(cè)結(jié)果 例(%)

2.2 AnuA與其他抗體的比較 其他自身抗體陰性時(shí)AnuA的陽(yáng)性率占38%～70%，對(duì)SLE患者診斷和預(yù)后的恢復(fù)，在其他自身抗體含量低時(shí)AnuA的檢測(cè)更有意義。見(jiàn)表2。

表2 AnuA與其他抗體的比較

3 討論

AnuA是1978年Iamcslcd等首先描述［1］。核小體是染色體的功能亞單位，具有核心是由8個(gè)組蛋白分子組成的八聚體。經(jīng)DNA雙螺旋纏繞形成核小體，當(dāng)細(xì)胞受到致病因素破壞時(shí)細(xì)胞內(nèi)發(fā)生線(xiàn)粒體腫脹胞膜破裂細(xì)胞出現(xiàn)凋亡。可釋放核小體并誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生一系列自身抗體。

SLE是一種伴有多器官損傷的自身免疫性疾病。診斷的標(biāo)志性抗體一直是研究的熱點(diǎn)。核小體是構(gòu)成染色質(zhì)的基本單位。在生物體內(nèi)核小體是唯一來(lái)源是凋亡細(xì)胞。SLE患者均在明顯的細(xì)胞凋亡異常，在細(xì)胞凋亡的過(guò)程中產(chǎn)生釋放細(xì)胞間質(zhì)中，誘發(fā)對(duì)核小體抗原特異性輔助性T細(xì)胞自身免疫耐受失常，激活B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生核小體。并產(chǎn)生大量的自身抗體，包括AnuA、抗ds-DNA、抗SM等抗體。這些自身抗體和細(xì)胞核抗原形成大量的免疫復(fù)合物，可以導(dǎo)致多種組織器官的損傷。

在本文結(jié)果中SLE患者血清中AnuA的檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性率為72.5%，明顯高抗ds-DNA和抗SM抗體的陽(yáng)性率。其他風(fēng)濕疾病AnuA的陽(yáng)性率僅15.0%，健康對(duì)照為陰性。SLE的臨床表現(xiàn)復(fù)雜多變，免疫特征也不相同，部分患者無(wú)法檢測(cè)出標(biāo)志性抗體［2］。抗SM抗體是一類(lèi)抗核糖核蛋白粒子抗體，其相應(yīng)抗原由U-RNA和共同核心蛋白組成。目前僅見(jiàn)于SLE的標(biāo)記抗體。在患者血清中可持續(xù)陽(yáng)性，但陽(yáng)性率偏低陽(yáng)性率為37.5%。抗ds-DNA抗體是SLE特異性抗體，存在于所有患者血清中［3］。與臨床表現(xiàn)密切相關(guān)，也是SLE的標(biāo)志。但是由于患者血清中有過(guò)多游離DNA抗原與相應(yīng)的DNA抗體結(jié)合導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果比較低。本次的結(jié)果陽(yáng)性率26.3%，ds-DNA陽(yáng)性在臨床上與SLE的活動(dòng)期有關(guān)。即使ds-DNA結(jié)果陰性也不能排除SLE的診斷。在其他自身抗體含量低時(shí)檢測(cè)AnuA抗體也是對(duì)SLE患者的診斷具有臨床意義。

AnuA對(duì)SLE的臨床診斷敏感性高.特異性強(qiáng)是SLE診斷標(biāo)記性抗體之一。它可以出現(xiàn)在疾病的各個(gè)不同時(shí)期，出現(xiàn)的時(shí)間早并與疾病的活動(dòng)性密切相關(guān)對(duì)SLE早期診斷和療效動(dòng)態(tài)觀(guān)察有重要意義［4］。AnuA的陽(yáng)性率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于其他抗體，結(jié)果證實(shí)核小體是SLE的自身抗原是多種抗體的根源。也提示AnuA的檢測(cè)對(duì)提高SLE的診斷有一定臨床意義與應(yīng)用價(jià)值，對(duì)SLE疾病診斷治療預(yù)后觀(guān)察具有重要的意義。

1 戴立群，王炎強(qiáng)，張玲，等.系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者自身抗體檢測(cè)的臨床意義.中國(guó)民康醫(yī)學(xué)，2007，5:19.

2 郭雨凡，陳志偉，顧美華，等.風(fēng)濕病抗核小體檢測(cè)的臨床.江蘇醫(yī)藥，2007，33:768-769.

3 吳謹(jǐn).抗DS-DNA抗體抗原認(rèn)別及致病性分子基礎(chǔ).中華風(fēng)濕病學(xué)雜志，2001，5:380-381.

4 何蘭，周彤，張國(guó)元，等.抗核小體抗體在系統(tǒng)性紅斑狼瘡中的診斷價(jià)值探討.國(guó)外醫(yī)學(xué)臨床生物化學(xué)與檢驗(yàn)學(xué)分冊(cè)，2005，26:577-588.