ELSD-HPLC法測定暢中膠囊知母中菝契皂苷元的含量

張文彥 姜燕 劉艷麗

暢中膠囊是邯鄲市中醫院自制制劑，在臨床上應用非常廣泛，由黃連、大黃、厚樸、知母等十三味中藥材組成。具清胃理氣、和中緩急的功效，適用于嘈雜返酸、噯氣、呃逆、氣滯腹脹、不欲飲食，口苦、口臭，口干舌燥、脘悶不舒等癥。為提高藥品質量標準，有效的控制產品質量，本研究采用ELSD-HPLC法對其主藥知母中菝契皂苷元進行含量測定，為建立完整的質量標準提供了依據。

1 儀器與試藥

日本島津LC2010AT液相色譜儀;ELDS-300S蒸發光散射檢測器;日本島津AUW120D電子天平;菝契皂苷元對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號:110744);暢中膠囊由邯鄲市中醫院提供，批號:070307;070717;070921，規格:每粒裝 0.5 g;每瓶100粒，陰性對照自制，水為純化水，甲醇為色譜醇;乙醇為分析醇。。

2 試驗方法與結果

2.1 色譜條件及系統性試驗 色譜柱:采用Gentamysil RP18(5 μ，250 mm ×4.6 mm)，流動相:甲醇∶水(95∶5)為流動相，流速:0.8 min/ml，Model 300SELSD 檢測器，漂移管溫度:70℃、氣體:空氣流速:1.2 L/min，柱溫:室溫;進樣量:樣品溶液10 μl、對照品溶液5 μl、10 μl。

2.2 對照品溶液的制備 精密稱定菝契皂苷元對照品0.03038 g，置100 ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.3 供試品溶液的制備 取10粒內容物約5 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入乙醇50 ml，稱定重量，浸泡過夜，超聲處理(功率200 W，頻率30 kHz)40 min，放冷，再稱定重量，用乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續濾液20 ml，蒸干，加水10 ml，鹽酸1 ml，加熱回流2 h，取出，冷至室溫，邊振搖邊滴加40%氫氧化鈉溶液至溶液顏色橙黃突變為橙紅，用三氯甲烷振搖提取2次，每次30次，合并三氯甲烷液，蒸干，殘渣加甲醇溶解，轉移至10 ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.4 線性關系考察 精密量取對照品溶液2、5、10、20μl注入液相色譜儀中進行測定，以峰面積對數值(Y)與進樣量μg對數值(X)線行回歸，得回歸方程為 Y=2.0019X+4.7587;r=0.9997。菝契皂苷元在 0.61～6.08 μg的范圍內線性關系良好。

2.5 穩定性實驗 按“2.3”項下方法制備供試品溶液，分別在0、1、2、5、10 h 測定，每次進樣 10 μl，測定菝契皂苷元的峰面積，RSD值為0.64%。表明樣品溶液穩定。

2.6 精密度試驗 按“2.3”項下方法制備供試品溶液，連續進樣5次，每次 10μl，測定菝契皂苷元的峰面積，RSD值為0.46%，表明儀器精密度良好。

2.7 專屬性試驗 按處方比例配制不含知母的空白樣品，按“2.3”項下的方法制成陰性對照溶液。吸取對照品溶液、供試品溶液、陰性對照溶液各10μl，分別注入液相色譜儀，結果在菝契皂苷元相應的位置上，陰性對照溶液無干擾。見圖1～3。

圖1 暢中膠囊樣品

圖2 菝葜皂苷元對照品

圖3 陰性樣品

2.8 加樣回收率實驗 取已知含量的暢中膠囊內容物6份，各約 2.5 g，精密稱定，分別加入對照品溶液 8 ml，按“2.3”項下方法制備供試品溶液，分別取上述溶液10μl注入液相色譜儀，計算回收率。菝契皂苷元平均回收率為101.2%，RSD值為2.19%，結果表明該方法準確度好。見表1。

表1 回收率測定結果

2.9 樣品含量測定 取不同批號的樣品，按上述供試品溶液制備方法制備，精密量取供試品溶液10μl，注入液相色譜儀測定，測得知母中菝契皂苷元的峰面積，依據回歸方程，計算得到各樣品所含菝契皂苷元的含量。見表2。

表2 樣品測定結果

3 討論

本文采用中國藥典2005年版一部中知母的含量測定方法［1］，對腸溶膠囊中知母進行菝契皂苷元的含量測定，用該方法成熟簡便、可行，對該樣品峰分離效果好，因為該方法為蒸發光散射器為質量型檢測器，排除了同波長處多種成分的干擾，獲得比較理想的檢測結果。

1 中華人民共和國藥典委員會編.中華人民共和國藥典.一部.北京:化學工業出版社，2005.147.