三氯乙烯中毒患者免疫球蛋白及T細胞亞群的臨床分析

戴軍 陳興年 劉杰

三氯乙烯中毒患者免疫球蛋白及T細胞亞群的臨床分析

戴軍 陳興年 劉杰

目的了解免疫球蛋白和T細胞免疫在三氯乙烯中毒發病中的作用，探討三氯乙烯中毒發生的免疫學機制。方法用免疫球蛋白測定試劑盒和流式細胞儀技術分別對病例組與對照組的免疫球蛋白(IgA、IgG和IgM)、T細胞亞群表面標志CD3、CD4和CD8的表達情況進行分析。結果三氯乙烯中毒患者免疫球蛋白IgM明顯降低(P＜0.01)，CD4和CD8比例明顯升高(P＜0.01)。結論三氯乙烯中毒患者體內存在免疫功能失調，觀察免疫球蛋白IgM和T細胞亞群變化有助于判斷病情程度和指導治療。

三氯乙烯中毒；免疫球蛋白；T細胞亞群

三氯乙烯(trichloroethylene,TCE)為無色易揮發的液體,在工業生產中常用作脫脂去污劑、萃取劑、有機溶劑,廣泛應用于金屬部件及電子元件去油污、紡織物的干洗、有機合成等。職業接觸三氯乙烯部分人可引起藥疹樣皮炎，伴心、肝、腎等多臟器功能損害,病情兇險,病死率高[1]。我國三氯乙烯中毒病例數量大，起病急，易誤診,后果嚴重,發病機制尚未完全清楚，危害極大,已成為職業危害的新問題。根據動物實驗結果及TCE中毒的臨床特點,有報道認為TCE中毒與免疫損害密切相關[2-3]，但目前關于TCE中毒與免疫損害的報道很少。本文對10例TCE中毒患者免疫球蛋白和T細胞亞群進行了測定和分析，現將結果報道如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象

TCE中毒組10例，均為住院病人，其中男6例，女4例，年齡18～32歲，平均(24.1±4.7)歲，接觸TCE工齡0.5～5個月。10例患者的診斷均參照《職業性急性三氯乙烯中毒診斷標準》(GBZ38-2002)確診。健康對照組為不接觸TCE及其他毒物的健康體檢者，其中男性6例，女性4例，年齡18～31歲，平均(24.7±4.9)歲，與TCE中毒組年齡差異無統計學意義。

1.2 標本處理

免疫球蛋白分析分別抽取TCE中毒組和健康對照組靜脈血各5ml,靜置24h后收集血清，-20℃保存。流式細胞儀分析應用靜脈采集外周血(肝素抗凝)2ml，分離淋巴細胞，調細胞濃度為5×105～1×106個/mL。

1.3 測定方法

采用免疫比濁法測定IgA、IgG和IgM；用流式細胞術測定CD3、CD4、CD8及CD4/CD8。

1.4 統計學處理

2 結果

2.1 TCE中毒組和健康對照組血清免疫球蛋白的比較

由表1可見，TCE中毒組和健康對照組IgA和IgG水平無明顯改變，但TCE中毒組血清免疫球蛋白IgM水平明顯低于健康對照組，差異均具有統計學意義(P＜0.01)。

2.2 TCE中毒組和健康對照組T細胞亞群的比較

由表2可見，與健康對照組相比，TCE中毒組T淋巴細胞亞群CD4+和CD8+明顯升高(P＜0.01)，而CD3+和CD4+/CD8+雖然有差異，但差異無顯著性(P＞0.05)。

表1 TCE中毒組與對照組血清免疫球蛋白檢測

表2 TCE中毒組與對照組T細胞亞群檢測

3 討論

變態反應性疾病是一種與多基因相關的疾病,其病因學至今尚不完全清楚。變態反應分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型屬于體液免疫型變態反應, Ⅳ型屬于細胞免疫型變態反應,也稱為遲發型變態反應。許多學者認為TCE中毒中有Ⅳ型變態反應發生，如皮膚的急性損害。研究結果表明，Ⅳ型變態反應性疾病與T淋巴細胞激活、細胞因子分泌、其他因素的共同參與密切相關[4]。本文通過對10例TCE中毒患者免疫球蛋白IgA、IgM和IgG的檢測發現，與對照組相比，TCE中毒組的IgM水平明顯降低，提示IgM參與了TCE中毒的免疫調節，這可能與IgM的早期免疫性有關。

既往研究表明，免疫調節參與了TCE中毒反應，如Griffin等[5]用TCE飲水給MRL+/+小鼠染毒時發現TCE引起的自身免疫反應與T輔助細胞非特異性活化有關,且長期接觸TCE可導致TCE免疫反應的發生。但是這些研究許多都是以小鼠等動物進行研究的，臨床資料比較少見。我們對10例TCE中毒患者T淋巴細胞亞群的變化進行了觀察，發現TCE中毒T淋巴細胞亞群CD4+和CD8+明顯升高，這與Griffin等[5]報道的結果一致,提示TCE可通過激活CD4+細胞的活性增殖，引起TCE接觸者細胞功能亢進，不同淋巴細胞亞群的數量和功能異常，可導致機體免疫紊亂產生病理變化。

綜上所述，三氯乙烯中毒患者體內存在免疫功能失調，觀察免疫球蛋白IgM和T細胞亞群變化有助于判斷病情程度和指導治療。

[1]劉杰,周良瑤,戴軍,等.三氯乙烯中毒6例的臨床分析[J].職業與健康,2008,24(19):2026-2027.

[2]蘇素花,翟日洪,農康,等.3例三氯乙烯中毒患者免疫損害指標的觀察[J].廣西預防醫學,2005,11(4):239-241.

[3]張勝,王玉良.三氯乙烯對接觸者免疫球蛋白水平和脂質過氧化作用[J].職業與健康,2009,25(7):673-675.

[4]Sarah J B,Jason C D,Leah J H,et al.Developmental exposure to trichloroethylene promotes CD4+T cell differentiation and hyperactivity in association with oxidative stress and neurobehavioral deficits in MRL+/+mice[J].Toxicology and Applied Pharmacology,2008,231(3):344-353.

[5]Griffin J M,Blossom S J,Jackson S K,et a1.Trichloroethylene accelerates an autoimmune response by Th1 T cell activation in MRL+/+mice[J].Immunopharmacology,2000,46(2):123-137.

Objective To explore the effects of immunoglobulin and T-lymphocyte subsets on trichloroethylene poisoning, and to investigate the immune mechanisms of pathogenesis of trichloroethylene poisoning. Methods The expression of immunoglobulins (IgA, IgG and IgM) and the expression of CD3, CD4 and CD8 on the T cell surface in patients group and control group were detected by immune globins detection kit andfiow cytometry, respectively. Results The level of IgM significantly decreased in patients with trichloroethylene poisoning(P＜0.01), however, the CD4+T cells and CD8+T cells of patients increased dramatically compared with that of control group(P＜0.01). Conclusion The immune in patients with trichloroethylene poisoning become dysfunction, and the detection of IgM and T-lymphocyte subsets may help to the diagnosis and therapy of trichloroethylene poisoning.

trichloroethylene poisoning; immunoglobulin; T-lymphocyte subsets

10.3969/j.issn.1009-4393.2010.12.026

215007 江蘇省蘇州市第五人民醫院 (戴軍 陳興年 劉杰)