腸出血性大腸埃希菌O157:H7的分布及特征

陳智強 高仕瑛

腸出血大腸埃希菌(EHEC)O157:H7是世界范圍分布的重要食源性致病菌。1982年美國首次因其致人出血性腸炎暴發，隨后在其它一些國家相繼發現由它引起的感染，日本曾多次暴發流行。我國也報道過O157:H7引起的嚴重感染[1]。

O157:H7主要通過不潔食物，飲水傳播，感染者的典型臨床癥狀為血便、腹痛、低熱等，個別患者可發展為溶血性尿毒綜合征、血栓性血小板減少性紫癜，若發生在老年人或兒童,死亡率可超過10%。因此，O157:H7在外環境中的分布引起了人們的高度關注。

我們對H市外環境(食物、生活污水、土壤)中的腸出血性大腸埃希菌O157:H7進行了檢測，現將有關結果報道如下。

1 材料與方法

1.1 食源性O157:H7 分離自H市相關超市與農貿市場的五類食品(雞肉、豬肉、淡水魚、海產品、蔬菜)，共10株[2]，按文獻[3]進行鑒定。

1.2 其它來源O157:H7 在市郊菜地及市區居民生活污水排放口各選取三個采樣點，于2009年6～9月每隔五天采樣(100g/份)一次，按文獻[3]分離鑒定O157:H7。免疫磁珠為丹麥Dynal公司產品，O157單克隆抗體診斷血清及H7單因子血清由國家疾病預防控制中心流行病研究所產品。

1.3 O157:H7毒素基因檢測 基因引物(O157、H7、SLT1、SLT2、ereA及hly)為上海生工生物工程公司產品。

1.4 紙片瓊脂擴散(K-B)法測定O157:H7菌株對常用抗生素耐藥性，藥敏結果判定按2006CLSI標準執行。質控菌:大腸埃希菌ATCC25922。

2 結果

2.1 自H市外環境分離，鑒定腸出血大腸埃希菌O157:H7共15株，其中10株來自食品，3株來自污水，2株來自菜地土壤(表1)。農貿市場食品污染嚴重，在雞肉、海產品、蔬菜中檢出O157:H7，而超市食品僅雞肉中檢出。食品中O157:H7的檢出率為1.42%～5.71%。菜地土壤與生活污水中O157:H7檢出率相應為2.82%與4.34%。

2.2 15株EHEC O157:H7的毒素基因分布見表2。其中3株(20.00%)攜帶SLT1，SLT2,eae及hly四類毒素基因；11株(73.33%)攜帶SLT2，eae及hly三類毒素基因；1株未檢出。它們中93.33%(14/15)是能產生SLT2、eae、hly毒素的高致病性菌株。

2.3 測定了H市外環境EHEC O157:H7對8種常用抗生素(慶大霉素、哌拉西林、阿米卡星、氨芐西林、頭孢哌酮、亞胺培南、環丙沙星、左氟沙星)的敏感性。結果表明∶食源性EHEC O157:H7(10株)多重耐藥菌株多，耐藥譜廣、僅對哌拉西林，亞胺培南完全敏感、對氨芐西林及環丙沙星≥50%耐藥、對另四種抗生素20.00%～30.00%耐藥。生活污水與土壤中EHEC O157:H7(5株)除對氨芐西林(80.00%)、環丙沙星(40.00%)及慶大霉素(20.00%)耐藥外，對其它5種抗生素完全敏感。

3 討論

3.1 O157:H7是腸出血性大腸埃希菌(EHEC)的主要血清型，有諸多文獻報道過牛、羊、豬及家禽糞便中該菌的分布與檢出率[4-5]。本文證實，O157:H7在H市外環境中較廣泛分布，除在食物，也在污水、土壤中檢出該菌。O157:H7致病力強，100～1000個細菌就可致人食物中毒[6]。它可產生多種致病因素，認為具有SLT2、eae、hly三類毒素基因的是高致病菌株的特征，SLT2對實驗動物的半數致死量比SLT1低價400倍[7-8]。SLT2菌株可致感染者嚴重的癥狀及組織病理學病變。H市外環境中O157:H7高致病性強毒株占93.33%(14/15)。

表1 H市外環境O157:H7分布與檢出率(%)

表2 H市外環境O157:H7毒素基因分布

3.2 H市食品中O157:H7主要污染對象是雞肉，在超市及農貿市場的樣本中均檢出，檢出率相應為2.27%及4.16%。農貿市場食品O157:H7污染較超市嚴重，在海產品與蔬菜中也檢出該菌且檢出率較高。這應是與農貿市場從業人員素質、衛生習慣、食品售前處理(如蔬菜在池塘或水溝中浸泡過夜)及貨架管理方式等經營行為緊密相關。

3.3 H市食源性O157:H7對抗生素的多重耐藥株多，而來自污水與土壤的O157:H7對試抗生素有較多敏感菌株(見2.3)。兩個來源的菌株對抗生素耐藥性顯示差異的原因應與家畜、禽類飼料中抗生素長期的、廣泛添加使用，抗生素壓力明顯超過污水、土壤等外環境有關。

3.4 大腸埃希菌在外環境存活力強，廣泛分布在水、土壤、食物中。被O157:H7污染的水、食物是該菌傳播的主要媒介，O157:H7耐冷藏、耐酸，在pH=2的胃液中可存活2小時以上、發酵食品(酸乳、泡菜)4℃儲存一周后仍可檢出、新鮮蔬菜表面也可較長時間存活[3,9]。這些特點更增加了該菌對食品安全與人群健康的潛在威脅能力。

綜上，H市外環境(食品、污水、菜地土壤)分布有高致病性的腸出血性大腸埃希菌O157:H7。此研究可為政府有關部門在加強環境衛生監測與食品衛生監督的策略或措施制訂時提供科學證據。

[3]王秀茹.預防醫學微生物學及檢驗技術[M].北京:人民衛生出版社,2002:300-302.

[5]李永紅.中國部分地區人群與動物中腸出血性大腸埃希菌O157:H7分布特征[J].疾病監測,2008,23(7):397-400.

[6]陳亢川.O157:H7大腸桿菌腸炎的流行與傳播[J].中國公共衛生,1999,12(11):520-522.

[7]程蘇云,葉菊蓮,占利,等.不同來源Stec O157:H7生物學特性研究[J].疾病監測,2007,22(8):519-522.

[8]張淑紅,申志新,關文英,等.河北省食品中大腸桿菌O157:H7分布及毒力研究[J].中國衛生檢驗雜志,2007,17(1):120-122.

[9]許文香,陳翠萍,曾明.腸出血大腸埃希菌O157:H7與食品安全[J].衛生研究,2006,35(4):52.