人腦膠質瘤中PTEN、MMP9蛋白的表達及意義

吳紅芳

南陽醫學高等專科學校病理教研室（473000）

膠質瘤是中樞神經系統內最常見的腫瘤,占顱內腫瘤的40%～50 %[1]。膠質瘤的病因尚不十分清楚，有報道稱膠質瘤的發生發展與多種基因異常有關。本文通過免疫組織化學方法檢測PTEN和MMP9蛋白在正常腦組織和膠質瘤中的表達情況，探討PTEN和MMP9基因異常與腦膠質瘤的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集南陽醫專第一附屬醫院病理科2003年7月～2010年5月手術切除膠質瘤石蠟標本53例,其中男34例、女19例,患者年齡8～65歲,平均年齡（42.3±16.4）歲。根據2000年 WHO神經系統腫瘤的分類標準對膠質瘤進行組織學的分類和分級： Ⅰ級 9例，Ⅱ級19例，Ⅲ 級 18例，Ⅳ級 7例。將Ⅰ～Ⅱ級歸為低度惡性，Ⅲ～Ⅳ級歸為高度惡性，另取 12例腦外傷內減壓術中切除的腦組織標本作為正常對照。

1.2 免疫組化染色

鼠抗人PTEN單克隆抗體及鼠抗人MMP9單克隆抗體均為Santa Cruz公司產品。S-P試劑盒及DAB顯色劑由北京中杉金橋公司提供,染色過程按試劑盒操作。陰性對照用PBS代替Ⅰ抗。

1.3 結果判定

PTEN和 MMP9蛋白染色陽性反應信號呈棕黃色細小顆粒,定位于胞質。每例隨機選 10個高倍視野，計數 1000個細胞,計算陽性細胞數的百分比。陽性細胞 ≥10%者為陽性病例；陽性細胞 ＜10%者均按陰性病例處理。

1.4 統計學處理

采用統計軟件對數據進行χ2檢驗及相關性分析。

2 結 果

2.1 PTEN蛋白在膠質瘤中的表達

正常腦組織中均有PTEN蛋白表達，腦膠質瘤中的表達率為63.3%，表達有顯著性差異（P＜0.01）；低度惡性組的陽性表達率為85.7%，高度惡性組的陽性表達率為36.0%,兩組間的表達有顯著性差異（P＜0.01）。

2.2 MMP9蛋白在膠質瘤中的表達

正常腦組織中均無MMP9蛋白表達，腦膠質瘤中的表達率為49.1%，表達有顯著性差異（P＜0.01）；高分化組的陽性表達率為46.4%，低分化組的陽性表達率為52.0%,兩組間的表達無顯著性差異（P＞0.05）。

2.3 PTEN、MMP9蛋白在膠質瘤中表達的相關性

膠質瘤中PTEN和MMP9蛋白均不表達的1例，均表達的7例，PTEN蛋白表達而MMP9蛋白不表達的26例，PTEN蛋白不表達而MMP9蛋白表達的19例；膠質瘤中PTEN和MMP9蛋白的表達呈負相關（ r= - 0.483,P＜0.01）。

3 討 論

PTEN基因被認為是繼p53基因之后發現的又一重要抑癌基因[2]。PTEN基因的失活突變可能與腫瘤的發生發展，惡性程度及侵襲性密切相關。本研究中膠質細胞瘤PTEN蛋白陽性表達率顯著降低，低度惡性組陽性率顯著高于高度惡性組有顯著性差異。結果提示人腦膠質細胞瘤中存在PTEN蛋白表達缺失，惡性程度越高缺失越明顯，PTEN蛋白的表達情況可做為腦膠質瘤惡性程度的判定指標之一。基質金屬蛋白酶MMPs是一種與腫瘤的惡性行為和浸潤性生長密切相關的物質。MMP9是基質金屬蛋白酶家族成員之一，可降解細胞外多種基質成分,在腫瘤浸潤、 轉移過程中發揮極其重要的作用[3-4]。發現MMP9蛋白在正常腦組織和腦膠質瘤中的表達有顯著性差異；低度惡性組組與高度惡性組中的陽性表達無顯著性差異。提示人腦膠質瘤中存在MMPs的過度激活，可能與腦膠質瘤的易復發及浸潤性生長有關，與膠質瘤的惡性程度無關。

此外，抑制腫瘤細胞的浸潤、轉移是 PTEN基因的重要生物學功能之一 。本研究顯示，膠質瘤中PTEN和MMP9蛋白的表達呈負相關，說明PTEN基因表達的減少或缺失，可能會誘導MMP9的過度激活，從而導致腦膠質瘤的復發和轉移。因此，通過免疫組化方法檢測人腦膠質瘤中PTEN蛋白的表達情況，可作為判斷膠質瘤的惡性程度及是否易轉移、復發的重要參考指標之一。

[1]吳在德,吳肇漢.外科學[M].北京：人民衛生出版社,2004：281-283.

[2]刁紅宇,吳永剛.PTEN蛋白在人腦星形膠質細胞瘤中的表達及意義[J].中國醫科大學學報,2006,35(5)：532-533.

[3]孫榮輝,徐國政.VEGF、MMP9在人腦膠質瘤中的表達及其意義[J].中國臨床神經外科雜志,2010,15(5)：273-277.

[4]李寶月,劉政操,姚琦等.神經膠質瘤細胞對血管新生作用及其血管生成素-2表達的影響[J].中國醫藥導報,2008,5(13)：14-16.