藥用昆蟲喙尾琵琶甲化學(xué)成分研究

羅建蓉， 何江波， 張 楨， 劉光明

(大理學(xué)院藥學(xué)院，云南大理671000)

喙尾琵琶甲(Blaps rynchopetera Fairmaire)俗稱臭殼蟲、高腳蟲、黑將軍，為鞘翅目(Coleoptera)擬步甲科(Tenebrionidae)琵琶甲屬(Blaps)昆蟲，是云南民間長期使用的一種藥用昆蟲，具有消炎、解毒、調(diào)節(jié)機體免疫功能、提高抗病能力的作用。民間用于治療發(fā)燒、咳嗽、胃炎、疔瘡、腫瘤等疑難雜癥。國內(nèi)對琵琶甲的研究主要集中在分類學(xué)和抗菌活性物質(zhì)等方面，近年來研究發(fā)現(xiàn)琵琶甲中含有氨基酸、甾醇、脂肪酸、酚等類化學(xué)成分［1-4］，其中苯酚類化合物具有抑菌活性［5］。為發(fā)掘該藥用昆蟲的藥用活性物質(zhì)基礎(chǔ)，為科學(xué)開發(fā)利用該昆蟲資源提供進一步實驗依據(jù)，作者對喙尾琵琶甲的化學(xué)成分進行了系統(tǒng)研究，從乙酸乙酯部位分離得到5個化合物，化合物涉及苯酚類、甘油醚和甾醇3種類型，其中化合物1和2為首次從該昆蟲中分離得到。

1 儀器與材料

VG Auto Spec-3000型質(zhì)譜儀;Bruker AM-400型超導(dǎo)核磁共振儀(TMS為內(nèi)標);X-4型顯微熔點測定儀(溫度計未校正)。柱層析硅膠和TLC硅膠GF254板采用青島海洋化工廠產(chǎn)品;凝膠Sephadex LH-20材料為GE Healthcare產(chǎn)品;乙醇、石油醚、氯仿、甲醇等試劑為工業(yè)純產(chǎn)品，重蒸后使用。

昆蟲喙尾琵琶甲收集于云南大理鳳儀鎮(zhèn)，由大理學(xué)院毛本勇教授鑒定為喙尾琵琶甲(Blaps rynchopetera Fairmaire)，標本保存在大理學(xué)院藥學(xué)院。

2 提取與分離

喙尾琵琶甲2.63 kg，粉碎后用95%乙醇浸泡提取3次，合并提取液，減壓濃縮至小體積，加適量蒸餾水混懸，依次用石油醚，乙酸乙酯萃取，分別得到浸膏98 g和60 g。乙酸乙酯浸膏(60 g)，經(jīng)硅膠柱色譜，石油醚-乙酸乙酯(10∶1～1∶3)梯度洗脫，得到3個部分。Fr.1經(jīng)Sephadex LH-20柱色譜(氯仿-甲醇1 ∶1)和硅膠柱色譜(石-丙15 ∶1)分離，得化合物5(30 mg);Fr.2經(jīng)多次硅膠、Sephadex LH-20柱色譜分離，得化合物 1(35 mg)，3(30 mg)，4(25 mg);Fr.3 經(jīng)Sephadex LH-20柱色譜(氯仿-甲醇1∶1)和重結(jié)晶分離純化，得化合物2(36 mg)。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物 1 黃色晶體，mp 140～141℃，分子式C10H12O4。EI-MS m/z顯示:196［M］+，164(100%)，149，121，111，85。1H-NMR(400 MHz，CDCl3)δ:10.46(1H，s，O H-6)，6.92(1H，d，J=8.8，H-4)，6.72(1H，d，J=8.8，H-5)，3.95(3H，s，OCH3)，2.90(2H，q，CH2CH3)，1.16(3H，t，CH2CH3)。13C-NMR(100 MHz，CDCl3)δ:112.8(C-1)，131.7(C-2)，146.5(C-3)，122.6(C-4)，115.4(C-5)，155.5(C-6)，171.7(C-7)，52.3(OCH3)，21.5 (CH2CH3)，14.2(CH2CH3)。根據(jù)以上波譜數(shù)據(jù)與文獻［6，7］報道的數(shù)據(jù)進行比較，確定化合物1為2-乙基-3，6-二羥基苯甲酸甲酯。

化合物2 白色晶體，mp 69～70℃，分子式C21H44O3。ESI-MS m/z顯示:367 ［M+Na］+。1H-NMR(400 MHz，CDCl3)δ:0.86(3H，t，CH3)，1.24(30H，br s，H-3′-H-17′)，1.56(2H，m，H-2′)，2.58(2H，br s，O H)，3.43-3.69(6H，m，C H2O)，3.84(1H，br s，CHOH)。13C-NMR(100 MHz，CDCl3)δ:71.8(C-1)，70.4(C-2)，72.5(C-3)，64.23(C-1′)，31.9(C-2′)，29.7(C-3′)，29.45-29.65(C-4′-C-14′)，29.3(C-15′)，26.0(C-16′)，22.7(C-17′)，14.1(C-18′)。根據(jù)以上波譜數(shù)據(jù)與文獻［8］報道的數(shù)據(jù)進行比較，確定化合物2為3-十八烷氧基-1，2-丙二醇。

化合物3 黃色晶體，分子式C7H8O2。EI-MS m/z顯示:124［M］+，111，95，85，67。1H-NMR(400 MHz，CDCl3)δ:2.07(3H，s，CH3)，6.42(1H，dd，J=2.9，8.5 Hz，H-5)，6.51(1H，d，J=2.9 Hz，H-3)，6.54(1H，d，J=8.5 Hz，H-6)。13C-NMR(100 MHz，CDCl3)δ:149.3(C-1)，131.5(C-2)，112.7(C-3)，147.6(C-4)，115.4(C-5)，117.3(C-6)，15.8(CH3)。根據(jù)以上波譜數(shù)據(jù)與文獻［2］報道的數(shù)據(jù)進行比較，確定化合物3為2-甲基對苯二酚。

化合物4 黃色晶體，分子式C8H10O2。EI-MS m/z顯示:138［M］+，123(100%)，109，85，67。1H-NMR(400 MHz，CDCl3)δ:1.08(3H，t，J=7.5 Hz，CH3)，2.48(2H，q，J=7.5 Hz，CH2)，6.40(1H，dd，J=2.9，8.5 Hz，H-5)，6.50(1H，d，J=2.9 Hz，H-3)，6.53(1H，d，J=8.5 Hz，H-6)。13C-NMR(100 MHz，CDCl3)δ:149.1(C-1)，125.3(C-2)，112.5(C-3)，147.1(C-4)，115.2(C-5)，115.6(C-6)，22.8(CH2)，13.6(CH3)。根據(jù)以上波譜數(shù)據(jù)與文獻［1］報道的數(shù)據(jù)進行比較，確定化合物4為2-乙基對苯二酚。

化合物5 白色晶體，分子式C27H46O。EI-MS m/z顯示:386［M］+(100%)，371，368，353，301，275。與膽甾醇對照品共薄層，Rf值相同。根據(jù)以上波譜數(shù)據(jù)與文獻［9］報道的數(shù)據(jù)進行比較，確定化合物5為膽甾醇。

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