賴型鉤端螺旋體外膜蛋白Loa22誘導細胞凋亡Ca2+信號通路機制

吳秉婷,孫 湛,李道坤,鮑 朗

(四川大學基礎醫學與法醫學院病理生理,四川成都610000.E-m ail:baolang@scu.edu.cn)

賴型鉤端螺旋體外膜蛋白Loa22誘導細胞凋亡Ca2+信號通路機制

吳秉婷,孫 湛,李道坤,鮑 朗

(四川大學基礎醫學與法醫學院病理生理,四川成都610000.E-m ail:baolang@scu.edu.cn)

目的:探討賴型鉤端螺旋體外膜蛋白Loa22對人肺泡II型上皮細胞(A549)[Ca2+]i影響造成的細胞凋亡,初步揭示該蛋白作用細胞可能的信號機制。方法:采用特異阻斷劑U73122預處理A549,阻斷PLC-γ1激活細胞內Ca2+釋放的信號通路,以Annexin V-FITC/PI雙染流式細胞儀檢測細胞凋亡,Fluo 3/AM標記流式細胞儀檢測細胞內游離鈣,評估[Ca2+]i變化與細胞凋亡的關系;以FITC-鬼筆環肽熒光染色,觀察F-actin排列結構影響;檢測鈣調素(Ca M)mRNA表達量變化。結果:直接以Loa22成熟肽作用A549能引發[Ca2+]i上升,細胞凋亡率升高;阻斷PLC-γ1信號通路后以Loa22成熟肽作用A549,[Ca2+]i較不阻斷時降低,凋亡率減小,CaM mRNA表達量降低(P＜0.01)。結論:Loa22成熟肽作用機制可能通過PLC-γ1信號通路觸發細[Ca2+]i升高,導致F-actin重排,促使Ca M mRNA表達增加,提示該基因參與鉤端螺旋體侵襲細胞引發細胞凋亡的病理過程。