HBsAg膠體金法快檢在無償獻血中的應用

于海忠 劉 靜

我國是乙肝病毒感染最嚴重的國家之一。據(jù)衛(wèi)生部疾病控制中心在1991～1994年組織全國30個省6.7萬人的調查，乙肝的流行率為57.63%[1]?，F(xiàn)在血站都是采血前對無償獻血都進行乙肝快速檢測，為了更好地開展無償獻血、減少不合格血液的采集，對無償獻血者進行乙肝膠體金法快檢。

1 材料與方法

1.1 標本

自2008年1～7月瓦房店市采血屋無償獻血者500人份。年齡18～55歲。

1.2 試劑

乙型肝炎病毒表面抗原診斷試劑盒（膠體金法）由英科新創(chuàng)（廈門）科技有限公司提供。HBsAg酶免試劑盒分別由英科新創(chuàng)（廈門）科技有限公司、北京科衛(wèi)臨床診斷試劑有限公司提供。試劑均在有效期內使用。操作及結果判定按使用說明書。

1.3 檢測儀器

深圳雷杜生命股份有限公司RT-6000酶標儀，深圳雷杜生命股份有限公司RT-3000洗板機。

1.4 檢測方法

經(jīng)膠體金法HBsAg檢測的無償獻血者，采集血液，并留取血樣待測，對同一份標本分別采用上海科華和英科新創(chuàng)ELISA法試劑盒進行HBsAg再檢。若其中一廠家試劑判定結果為HBsAg陽性，而另一廠家試劑為陰性，則對該血樣用前廠家ELISA法試劑再次雙孔重復試驗。若結果一致，且S/oD≥1時，判定為HBsAg為陽性。

2 結 果

在膠體金法檢測的500份標本中，陰性數(shù)為452份，陰性率為90.4%，陽性為48份，陽性率為9.6%；ELISA法復檢中陰性為451份，陰性率為90.2%，陽性為49份，陽性率為9.8%。膠體金法漏檢率為0.2%。膠體金法檢測的HBsAg陽性經(jīng)ELISA法檢測均為陽性。

3 討 論

無償獻血是血站收集血液的主要途徑，然而這種采血方式受到無法常規(guī)初檢的限制，產(chǎn)生一定比例的不合格血液，其中乙肝表面抗原陽性是一個主要因素[2]。應用HBsAg快速檢測對無償獻血者進行初篩檢查，經(jīng)ELISA法再檢后的統(tǒng)計資料表明，500份膠體金法初篩合格血樣HBsAg陽性率為1.07%。正常情況下HBsAg人群陽性率在10%左右。通過上述結果可以看出快速初篩后的樣本經(jīng)ELISA法初復檢HBsAg結果基本是一致的。因此應用膠體金法對血液進行初篩簡單易行、經(jīng)濟實用、效果良好，避免了血源的浪費，并且具有較高的信度和效度[3]。膠體金法原理：采用膠體金免疫技術，在醋酸纖維素膜上預包被金標抗HBsAg單抗（Au-sAb1），硝酸纖維素膜上檢測線和對照線上分別包被抗HBsAg單抗（Au-sAb2）和單抗鼠IgG。檢測時，樣本血清中HBsAg可與膠體金-抗體結合形成復合物，由于層折作用復合物沿紙條向前移動，如為陽性標本，則與檢測線預包被的抗體結合形成“Au-sAb1-HB-sAg-sAb2”夾心物而凝集顯色。并且因為檢測紙條上有濾過膜的存在，可以有效地組織紅細胞的通過，因此檢驗時不需要分離血清直接使用全血進行即可。

與ELISA法相比，膠體金法具有以下優(yōu)勢：①檢驗時可直接應用全血，無需分離血清，從采集指血標本到出檢測結果，只需3～5min，快速方便，陽性率高；②試紙法操作步驟簡單，對檢測設備要求低，肉眼可直接觀察結果，省時、省財、省力，又避免了復雜步驟過程中污染的可能；③試劑保存比較方便，可在室溫儲存；④可單分檢測，快速，又避免資源浪費；⑤價格低廉?；谝陨蟽?yōu)點，在實際操作中一方面達到了有效檢測血液質量的目的，同時也節(jié)省了獻血者的等候時間，值得在獻血屋和流動采血車采血時應用和推廣。但應用膠體金法對血液進行快速初篩不能代替正規(guī)的血液檢驗，不能完全排除假陽性或假陰性，靈敏度和特異性均有待于進一步提高[4，5]。

膠體金法檢測存在一定比例的假陽性和假陰性，究其原因可能有：①試劑的靈敏度，全血膠體金法試劑的靈敏度為1ng，而ELISA法試劑的靈敏度可達0.5ng，因此導致了一定程度的假陰性的出現(xiàn)。②獻血者人數(shù)較多時，操作人員為縮短檢測時間而未嚴格按照要求操作，因此造成檢測線不明顯的弱陽性漏診。③實驗人員加樣過多或過少，檢測紙條變質等因素導致檢測結果不準確。④少數(shù)標本可能存在乙肝肝炎病毒（HBV）變異或亞型而不易檢出。⑤高溫、干燥、風吹均能影響實驗結果。因此，我們在做HBsAg快速檢測時，應該嚴格按照操作規(guī)程進行操作。

[1] 高壽征.病毒性肝炎防治研究[M] .北京:北京出版社,1992:11.

[2] 孟憲軍,史志旭徐州市無償獻血初檢復檢結果分析[J] .中國輸血雜志,1996,9(4):212.

[3] 肖甫星譯.輸血技術手冊[M] .北京:人民衛(wèi)生出版社,1999:265-266.

[4] 陳均.全血膠體金法快速篩查非固定采血點HBsAg的初探[J] .中國輸血雜志,2000,13(13):198.

[5] 許倩.HBsAg檢測的膠體金法與ELISA法效果比較[J] .中外醫(yī)療,2008,27(13):107.