常見的風濕性疾病患者血中黏膜相關上皮趨化性細胞因子水平的變化及意義

張艷莉，蔣莉，張曉莉，郭韻，孫玥，張燕，王曉非

（中國醫科大學 附屬盛京醫院風濕免疫科，沈陽 110004）

常見的風濕性疾病患者血中黏膜相關上皮趨化性細胞因子水平的變化及意義

張艷莉，蔣莉，張曉莉，郭韻，孫玥，張燕，王曉非

（中國醫科大學 附屬盛京醫院風濕免疫科，沈陽 110004）

目的 通過檢測幾種常見的風濕性疾病患者血中黏膜相關上皮趨化性細胞因子（CCL28）的水平變化，探討其水平變化在風濕性疾病中的作用及其與臨床相關指標的關系。方法 采用酶聯免疫吸附試驗對系統性紅斑狼瘡、類風濕關節炎、干燥綜合征、強直性脊柱炎患者及健康對照者血中的CCL28進行測定。結果 風濕性疾病患者血中的CCL28明顯高于健康對照者；風濕性疾病患者血中CCL28的水平變化與各種疾病活動性指標明顯相關。結論 CCL28可能參與了風濕性疾病的發病過程，且在一定程度上反映疾病的嚴重程度，阻斷CCL28及其受體的相互作用，可能成為風濕性疾病治療的有效方法之一。

風濕性疾病；黏膜相關上皮趨化性細胞因子；自身免疫性疾病

風濕性疾病發病機制的研究一直是一個重要的課題，T、B淋巴細胞及相關細胞因子的作用日益成為該研究的重要目標之一。近年來趨化因子及其受體在自身免疫病中的作用逐漸受到人們的重視，而黏膜相關上皮趨化性細胞因子（mucosa-associated epithelial chemokine，MEC/CCL28）是新近發現的趨化性細胞因子家族CC類中的成員之一。有研究表明，在黏膜免疫及某些腫瘤的免疫中CCL28發揮著重要作用［1］，因而推測其可能在風濕性疾病的發病中起到一定的作用。本研究檢測了幾種常見的風濕性疾病患者及正常人血清中CCL28水平的變化，同時分析了風濕性疾病患者中CCL28與相關臨床指標的關系，從而探討其在風濕性疾病發病過程中的作用。

1 材料與方法

1.1 研究對象

選擇于2009年7月至2010年2月在中國醫科大學附屬盛京醫院風濕免疫科住院的未經治療的風濕性疾病患者66例，其中系統性紅斑狼瘡（systemic lupus erythematosus，SLE）22例，符合 1997年美國風濕病學會修訂的SLE診斷標準；類風濕關節炎（rheumatoid arthritis，RA）18例，符合 1987年美國風濕病學會分類標準；干燥綜合征（Sjgren’s syndrome，SS）16例，符合2002年SS國際分類診斷標準；強直性脊柱炎（ankylosing spondylitis，AS）10例，符合1984年修訂的紐約標準；男11例，女55例，平均年齡（43±17）歲。全部患者入院前4周均未應用糖皮質激素及免疫抑制劑，并排除其他免疫性疾病及感染性疾病。選擇健康對照者15例，為來自我院體檢中心的健康體檢者，其中男3例，女12例，平均年齡（46±17）歲。兩組在年齡及性別構成上無統計學差異。

1.2 方法

清晨空腹采血3ml，離心后取上清，置PC管中-20℃保存，全部標本一次性檢測。CCL28的測定采用酶聯免疫吸附試驗，試劑盒由美國RayBiotech公司提供，操作嚴格按照試劑盒說明書的要求進行操作。各種風濕性疾病活動指標的檢測由我院檢驗科協助完成，異常判定均參考同期該項檢查的正常值。同時收集整理患者其他臨床資料。

1.3 統計學處理

2 結果

2.1 各組風濕性疾病患者及健康對照者血中CCL28水平

SLE、RA、SS、AS患者及健康對照者血中CCL28水平分別為（342.44±107.36）ng/ml、（423.22±156.22）ng/ml、（402.98±243.19）ng/ml、（314.09±99.28）ng/ml、（222.83±69.77）ng/ml，各組風濕性疾病患者與健康對照者比較差異均有統計學意義（P<0.05）。

2.2 各組風濕性疾病患者血中CCL28水平及相關指標的相關性分析

SLE組CCL28水平與C3呈明顯負相關（r=-0.505，P<0.05），與 IgG、SLEDAI評分呈明顯正相關（r=0.425，P<0.05；r=0.703，P<0.01），與紅細胞沉降率、IgA、γ球蛋白、類風濕因子無明顯相關。RA組CCL28水平與紅細胞沉降率、類風濕因子呈明顯正相關 （r=0.518，P<0.05；r=0.475，P<0.05），與IgG、IgA、γ球蛋白無明顯相關。SS組CCL28水平與IgA、γ球蛋白呈顯著正相關（r=0.63，P<0.01；r=0.725，P<0.01），與紅細胞沉降率、IgG、類風濕因子無明顯相關。AS組CCL28水平與紅細胞沉降率、IgA水平呈明顯正相關（r=0.79，P<0.01；r=0.622，P<0.05），與IgG、γ球蛋白、類風濕因子無明顯相關。

3 討論

MEC/CCL28是2000年研究人員發現的一種新的趨化性細胞因子，按照新提出的趨化性細胞因子配體，將其定名為CCL28［2］。其受體為CCR10和CCR3［3］，CCL28通過結合CCR10吸引皮膚淋巴細胞抗原陽性的記憶T細胞和IgA抗體分泌細胞［4］；通過結合CCR3吸引人外周血中的嗜酸性粒細胞［5］。CCL28與相應受體結合后，可介導血循環中的CD4+T細胞、CD8+T細胞、IgA抗體分泌細胞等免疫活性細胞歸巢遷徙至相關組織［1］，因而推測其可能參與了風濕性疾病的發病過程，但在國內風濕性疾病研究中報告甚少。

本研究以患有不同類型風濕性疾病的患者作為研究對象，發現在幾種常見的風濕性疾病患者血中CCL28水平明顯升高，并且分別與各疾病活動指標相關，證明CCL28在風濕性疾病中具有重要作用。SLE為多系統、多臟器受累的自身免疫性疾病，患者體內T、B淋巴細胞數量及功能異常，導致多種自身抗體形成，相應細胞因子釋放增加［6］，進一步引起免疫細胞功能紊亂。已有研究表明CCL28可吸引血液循環中的CD4+T細胞［2］，進而導致T細胞的功能異常以致新抗原不斷出現，使自身免疫持續存在，CCL28可能通過上述機制參與SLE的發病。本研究證明SLE患者體內CCL28增加，并與反映SLE病情活動的指標C3、IgG、SLEDAI評分具有相關性，這表明了CCL28在SLE的發病中具有一定的作用，且與疾病的嚴重程度相關。RA是以關節滑膜炎為主要特征的慢性進行性的自身免疫性疾病，在RA慢性滑膜炎的發生過程中，大量炎性細胞從外周血遷移、聚集在關節滑膜組織，從而造成滑膜組織破壞，趨化因子在炎性細胞遷移、浸潤過程中則起了重要作用。有研究發現RA患者的外周血及滑膜液中均可表達CCR3［7］，CCL28可通過與其受體CCR3結合參與RA的滑膜破壞。在檢測中我們發現RA患者血中CCL28水平明顯高于健康對照者，并與該組患者病情活動指標紅細胞沉降率、類風濕因子的變化相關。因此認為CCL28在關節滑膜損傷中具有重要意義，且在一定程度上反映了疾病的嚴重程度。SS是一種主要累及外分泌腺體的慢性炎性自身免疫病，其典型病理特征是外分泌腺如唇腺、淚腺導管周圍淋巴細胞為主的單個核細胞浸潤灶。研究表明，浸潤的單個核細胞多為CD4+T淋巴細胞，尤其以CD4+的激活的記憶型T淋巴細胞為主［8］，SS患者唇腺浸潤的淋巴細胞表達趨化因子，提示移行而來的淋巴細胞被激活并表達趨化因子，從而起到促進病情發展的作用［9］。本研究檢測結果同樣證明了SS患者體內高CCL28水平的存在，且與IgA、γ球蛋白的變化密切相關，因而推測其可能參與了本病的發病且與黏膜受損有關。AS是以累及脊柱和骶髂關節為特征的慢性炎癥性風濕性疾病。近年來研究發現TNF-α及CD4+T細胞在AS發病機制中起重要作用［10，11］，TNF-α 并不是單獨在風濕性疾病中發揮作用，而是與其他細胞因子/趨化因子一起共同組成一個復雜的免疫網絡，通過網絡中分子的相互作用，在AS等風濕性疾病的發病機制中起關鍵作用。CCL28可能通過上述機制參與發病，本研究證明了AS患者血中CCL28增加并與患者血中紅細胞沉降率、IgA呈正相關關系，提示疾病活動期患者體內淋巴細胞激活后免疫應答反應的存在，從而促進了關節炎的發生。

風濕性疾病患者的發病多與淋巴細胞活化有關，活化后的T細胞可以分泌大量致炎性細胞因子造成組織損傷，同時又激活B淋巴細胞產生大量抗體。而趨化性細胞因子及受體相互作用可能是風濕性疾病發病的一個重要環節，因而阻斷這一環節就有可能控制病情發展，為風濕性疾病的治療尋找新的途徑。

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（編輯 陳 姜，英文編輯 陳 姜）

Serum Level of Mucosa-associated Epithelial Chemokine in Patients with Common Types of Rheumatic Diseases

ZHANGYan-li，JIANGLi，ZHANGXiao-li，GUOYun，SUNYue，ZHANGYan，WANGXiao-fei
（Department of Rheumatism and Immunology，Shengjing Hospital，China Medical University，Shenyang 110004，China）

ObjectiveTo investigate the serum level of mucosa-associated epithelial chemokine （MEC/CCL28） in common types of rheumatic diseases，and to explore its relationship with clinical features.MethodsThe serum level of CCL28was determined by ELISAin patients with rheumatic diseases including systematic lupus erythematosus，rheumatoid arthritis，Sjgren’s syndrome，and ankylosing spondylitis，and normal controls.ResultsThe serum level of CCL28was significantly higher in patients with rheumatic diseases than in normal controls.In patients with rheumatic diseases，the serum level of CCL28was obviously correlated with disease activity index.ConclusionCCL28may be involved in the pathogenesis of rheumatic diseases and reflect the degree of the diseases to a certain extent.Thus，blocking the interaction between CCL28and its receptor may be one of the available therapies for rheumatic diseases.

rheumatic disease；mucosa-associated epithelial chemokine；autoimmune disease

R593.2

A

0258-4646（2010）11-0950-03

張艷莉（1983-），女，碩士研究生.

王曉非，E-mail：cpd1986@sina.com

2010-05-19