GC-MS法分析臺灣組培金線蓮揮發油化學成分

柯伙釗， 陳文娟， 吳水華， 羅明可

(福建生物工程職業技術學院，福建福州350002)

金線蓮素有“金草”、“神藥”、“烏人參”等美稱［1］，為蘭科開唇蘭屬［Anoectochilus roxburghii(Wall.)Lindl.］的全草［2］，中文學名是花葉開唇蘭。全草入藥，味甘、性平，具有清熱涼血、除濕解毒的功效，是一種多年生珍稀名貴的中草藥，民間常用于治療肺結核咳血、腎炎、膀胱炎、重癥肌無力、遺精、風濕性及風濕性關節炎、小兒驚風、婦女白帶以及毒蛇咬傷等癥［3］。金線蓮主要分布在我國亞熱帶地區，其中以閩、浙、贛、臺為主要產地［4］，特別在臺灣地區倍受青睞，被稱為“藥中之王”。目前，我國對該植物的研究主要集中在人工栽培、組培、藥理等方面，其有效成分與揮發性成分的研究報道較少。本實驗對臺灣組培金線蓮揮發油成分進行研究，為國家中藥材規范化種植基地中藥材質量評價提供基礎數據。

1 儀器及材料

1.1 儀器 美國Agilent公司6890N Network GC Systerm氣相色譜儀，5975B Inert xl MSD質譜儀，7683B Series進樣系統，色譜柱為 VF5MS(0.25 mm ×30 m，0.25 μm);AL204 型電子天平(梅特勒-托利多);KQ-100B型超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司);AKRY-UP-Ⅲ-10艾柯超純水機(成都康寧實驗專用純水設備廠);水蒸氣蒸餾裝置。

1.2 試劑與材料 臺灣組培金線蓮鮮草，購自福建省漳州市豐田花園。正己烷、乙醚(重蒸)均為分析純;超純水。

2 方法及條件

2.1 揮發油的提取 精密稱取臺灣組培金線蓮鮮草兩份，各50 g。用剪刀剪成約5 mm長小段，置研缽中搗爛，加入少量水轉移至500 mL圓底燒瓶中，室溫超聲30 min，用水蒸氣蒸餾法進行提取，控制流速3d/2s，蒸餾4 h，餾出液用重蒸乙醚萃取3次，萃取液中加適量無水CaCl2干燥過夜，過濾，濾液濃縮后備用;同前法處理另一份鮮草，餾出液改用重蒸正己烷萃取。

圖1 乙醚萃取金線蓮揮發油總離子流圖

2.2 氣相色譜條件 色譜柱:VF5MS石英毛細管色譜柱(0.25 mm ×30 m，0.25 μm);載氣為氦氣，柱流量為 1.0 mL/min;不分流進樣;進樣量為1 μL;升溫程序:45℃(保持8 min)，以6℃/min到285℃(保持12 min)，共計60 min;進樣口溫度250℃。

2.3 質譜條件 離子源為EI源;電子轟擊電壓70 ev;離子源溫度230℃;四極桿溫度為150℃;傳輔線溫度:280℃;溶劑延遲3.0 min;質量掃描方式為SCAN;掃描范圍15～500 aum;NIST107標準質譜檢索庫。

3 結果及討論

3.1 樣品的測定結果 取金線蓮全草中提取的揮發油通過上述GC-MS條件分析，得到總離子流色譜圖(見圖1、圖2所示)。根據NIST標準譜庫檢索，從乙醚萃取的揮發油中檢出42種成分，鑒定出39種組分，按面積歸一化法計算，各樣品已鑒定的成分占揮發油總量的98.479%，見表1所示。正己烷萃取的揮發油中檢出24種成分，鑒定出23種組分，按面積歸一化法計算，各樣品已鑒定的成分占揮發油總量的99.147%，見表2所示。

圖2 正己烷萃取金線蓮揮發油總離子流圖

續表1

表2 正己烷萃取金線蓮揮發油的化學成分及相對百分含量

3.2 討論 通過采用GC-MS法首次分析了臺灣組培金線蓮的揮發性成分，并且比較了不同有機溶劑萃取所得揮發油的化學成分。由表1可知，乙醚萃取所得臺灣組培金線蓮的揮發油中，主要成分為烷烴類、脂肪酸、酮類、醇類及酚類化合物，分別占揮發油的86.131%、3.375%、2.476%、2.230%和2.113%，還含有一些酯類及單帖類化合物。由表2可知，正己烷萃取所得臺灣組培金線蓮的揮發油中，主要成分為烷烴類、酚類、脂肪酸及酯類化合物，分別占揮發油的25.226%、23.879%、21.348%和20.281%。如2-甲氧基-3-烯丙基苯酚(20.541%)、4-甲氧基-苯甲酸丙酯(11.937%)、棕櫚酸(10.741%)、亞油酸(10.607%)和亞麻酸甲酯(4.063%)等。通過比較不同有機溶劑萃取的揮發油化學成分的差異可知，采用正己烷萃取揮發油，可得到含量較多的脂肪酸類化合物，但低沸點化合物幾乎沒有;采用乙醚萃取揮發油可以得到大量的低沸點化合物，但脂肪酸類化合物很少。

文獻［5］報道從海南栽培金線蓮中提取揮發油的化學成分，主要成分分別為正十六烷酸(25.22%)、(Z，Z)-9，12-十八碳二烯酸(15.35%)、(Z，Z，Z)-9，12，15-十八碳三烯酸甲酯(13.64%)和(Z，Z)-9，12-十八碳二烯酸甲酯(6.47%)。文獻［6］報道從福建省漳州市南靖縣金線蓮中提取揮發油的化學成分，主要成分為十八烷酸(48.699%)和正十六烷酸(23.544%)。尚未見從臺灣金線蓮揮發油中檢出十六酸甲酯與大量的烷烴類化合物的相關文獻，這可能與不同地區的金線蓮所含揮發性成分差異較大有關。可見，研究不同地區金線蓮揮發油中的主要成分對開發具有地方特色的中草藥意義重大。

［1］黃慧蓮，劉賢旺.美葉奇藥金線蓮［J］.植物雜志，1999，23:8.

［2］黃慧蓮，劉賢旺.金線蓮無根苗的壯苗促根試驗研究［J］.中國野生植物資源，2001，20(6):74.

［3］中國科學院植物研究所.中國高等植物圖鑒［M］.第5冊.北京:科學出版社，1980.

［4］孔祥海.“藥王”金線蓮的自然資源初步研究［J］.中草藥，2001，32(2):155-157.

［5］韓美華，楊秀偉，靳彥平.金線蓮揮發油化學成分的研究［J］.天然產物研究與開發，2006，18:65-68.

［6］蔡金艷，張勇慧，吳繼洲.藥王金線蓮揮發油及石油醚提取物的氣相色譜-質譜-數據系統聯用測定［J］.時珍國醫國藥，2008，19(7):1550-1552.