念珠菌感染菌種的分布及耐藥性分析

[摘要] 目的 了解本地區(qū)2007～2008年念珠菌感染的菌種分布和耐藥性情況，為臨床抗真菌治療提供依據(jù)。方法 收集本地區(qū)兩家醫(yī)療機(jī)構(gòu)兩年間臨床分離的念珠菌1462株，采用生物梅里埃ATB ID32C試條進(jìn)行念珠菌菌種的分離鑒定，藥敏試驗(yàn)采用生物梅里埃ATB-FUNGU30試條對(duì)氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑、5-氟胞嘧啶和兩性霉素B等5種抗真菌藥物進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果 1462株念珠菌中以白色念珠菌為主，檢出682株(59.6%)，其他依次為熱帶念珠菌278株(21.3%)，光滑念珠菌135株(9.2%)，近平滑念珠菌70株(4.8%)，克柔念珠菌27株(1.8%)，其他念珠菌46株(3.1%)。念珠菌對(duì)伊曲康唑、氟康唑、5-氟胞嘧啶、兩性霉素B和伏立康唑的耐藥率分別為28.9%、10.6%、3.1%、1.5%和0。結(jié)論 本地區(qū)念珠菌感染以白念珠菌為主，對(duì)伊曲康唑和氟康唑耐藥性較高，對(duì)5-氟胞嘧啶、兩性霉素B和伏立康唑敏感性較高。本地區(qū)應(yīng)建立真菌常規(guī)菌種鑒定及藥敏試驗(yàn)，指導(dǎo)臨床合理用藥。

[關(guān)鍵詞] 念珠菌; 耐藥性; 抗真菌藥

[中圖分類號(hào)] R379.4 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1673-9701(2010)01-03-03

Candida Species Distribution and Resistance to Antifungal Agents

LIN Chaoping1 CUI Donglan1 XIE Meihong2

1.Department of Laboratory，the First People’s Hospital of Foshan City，F(xiàn)oshan 528000，China;2.Department of Laboratory，Yong’an Hospital of Foshan City，F(xiàn)oshan 528000，China

[Abstract] ObjectiveTo investigate the candida species distribution and susceptibility of Candida species to antifungal agents in Foshan city during 2007 to 2008，and provide evidence for diagnosis and treatment of fungi infection. MethodsIn a 2-year surveillance programme，1462 Candida stains were collected from two local medical institutions，Candida strains were identified by bioMérieux ATB ID32C test paper. Antifungal susceptibility of fluconazol，itraconazole，voriconazole，5-flurocytosine and amphotericin B was assessed by bioMérieux ATB-FUNGU30 test paper method. Results Among 1462 strains examined，Candida albicans accounted mainly for 59.6%(682 strains)，and the other species accounted for 31.3% including，tropicalis 21.3%(278 strains)，Candida glabrata 9.2%(135 strains)，Candida parapsilosi 4.8%(70 strains)，Candida krusei and 1.8%(27 strains)and the other Candida 3.1%(46 strains). The resistant rates to itraconazole，fluconazol，5-flurocytosine，amphotericin B and voriconazole were 28.9%，10.6%，3.1%，1.5% and 0，respectively. ConclusionThe pathogens causing fungus infection are mainly C. albicans in Foshan city，and it shows more sensitive to 5-flurocytosine，amphotericin B and voriconazole compared with itraconazole and fluconazol. The Fungi and Fungal pathogens routine strain identification and susceptibility test in this region should be established，guiding clinical rational drug use.

[Key words]Candida; Resistance; Antifungal agents

近年來(lái)，大量廣譜抗生素、激素、免疫抑制劑的應(yīng)用及各種介入性治療技術(shù)的開展，尤其是隨經(jīng)濟(jì)社會(huì)發(fā)展，越來(lái)越多醫(yī)院投入使用密閉式中央空調(diào)，使真菌成為院內(nèi)感染的一大病原菌，種類不多的抗真菌藥反復(fù)使用后誘發(fā)越來(lái)越嚴(yán)重的耐藥現(xiàn)象。控制真菌感染及耐藥現(xiàn)象任務(wù)艱巨，真菌病原菌分布及耐藥性監(jiān)測(cè)意義具有舉足輕重的作用。本研究收集本地區(qū)數(shù)家醫(yī)療機(jī)構(gòu)2007～2008年臨床分離的念珠菌1462株，統(tǒng)一進(jìn)行菌株鑒定及藥敏試驗(yàn)。分析念珠菌分布情況及監(jiān)測(cè)耐藥性的動(dòng)態(tài)變化，提供臨床合理用藥的依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)菌株及質(zhì)控株

實(shí)驗(yàn)菌株:收集2007年6月～2008年12月本地區(qū)兩家醫(yī)療機(jī)構(gòu)門診和住院病人臨床標(biāo)本分離的陽(yáng)性菌株1462株，標(biāo)本來(lái)自痰、分泌物、尿、大便等，見表1。

實(shí)驗(yàn)質(zhì)控株:ATCC90029白色念珠菌(NCCLS M44-P推薦的標(biāo)準(zhǔn)株)，ATCC10231白色念珠菌(丹麥ROSCO公司推薦)。

1.2 培養(yǎng)基

1.2.1 分離培養(yǎng)基 麥康凱、血平板、沙保羅培養(yǎng)基(自制)，沙保羅培養(yǎng)基干粉來(lái)源于杭州六和生物公司。

1.2.2 鑒定培養(yǎng)基 真菌鑒定條ATB ID32C來(lái)源于法國(guó)梅里埃。

1.2.3 藥敏培養(yǎng)基 ATB-FUNGNS3試條，來(lái)源于法國(guó)梅里埃。

1.3 方法

1.3.1 念珠菌的分離培養(yǎng) 標(biāo)本接種麥康凱、血平板、沙保羅培養(yǎng)基，28～35℃，5% CO2培養(yǎng)18～48h，挑取可疑菌落做革蘭染色，初步鑒定為酵母樣真菌后轉(zhuǎn)種。

1.3.2 念珠菌的鑒定 按說(shuō)明書操作規(guī)程進(jìn)行，梅里埃ATB ID32C真菌鑒定條鑒定至種，必要時(shí)增加手工試驗(yàn)。

1.3.3 藥敏試驗(yàn) 采用梅里埃ATB-FUNGNS3試條對(duì)氟康唑(FCZ)、伏立康唑(VCZ)、伊曲康唑(ITC)、5-氟胞嘧啶(5-FC)和兩性霉素B(AMB)進(jìn)行測(cè)定，按相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)判斷敏感性，并用實(shí)驗(yàn)質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)株作質(zhì)控。

2 結(jié)果

2.1 菌種分布情況

從2007年6月～2008年12月共分離收集到念珠菌1462株，菌種構(gòu)成比以白色念珠菌為最高，占59.6%(871/1462)，其次是熱帶念珠菌占21.3%，光滑念珠菌、近平滑念珠菌、克柔念珠菌，這3種念珠菌占總檢出率的15.7%。見表1。

2.2 念珠菌對(duì)抗真菌藥物的敏感性

伊曲康唑的耐藥率最高達(dá)到28.9%，其次為氟康唑，其耐藥率為10.6%，5-氟胞嘧啶和兩性霉素B的耐藥最低只有1.8%和1.5%，伏立康唑未見耐藥菌株。在菌種耐藥性分布中，熱帶念珠菌對(duì)伊曲康唑和氟康唑耐藥率最高，分別達(dá)到39.4%和15.7%，近平滑念珠菌對(duì)兩性霉素中敏率達(dá)到51.4%，而白色念珠菌出現(xiàn)多重耐藥情況，有58株(6.7%)白色念珠菌同時(shí)耐氟康唑和伊曲康唑。詳見表2。

3 討論

從本地區(qū)2007～2008年兩家醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床標(biāo)本分離的念珠菌菌種分布來(lái)看，白色念珠菌仍然是本地區(qū)主要酵母樣真菌感染的病原菌，占所有酵母樣真菌感染構(gòu)成比的59.6%，與國(guó)內(nèi)外有關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道一致[1]，熱帶念珠菌和光滑念珠菌分別占21.3%和9.3%，因此構(gòu)成了本地區(qū)酵母樣真菌感染菌種分布的特點(diǎn)。在標(biāo)本來(lái)源中痰標(biāo)本分離的酵母樣真菌最多有682株，占分離株的46.8%，痰標(biāo)本主要以呼吸科和ICU(重癥監(jiān)護(hù)病房)以及腦外科病人為主，這些病人多數(shù)是老年人和危重病人，反復(fù)使用廣譜抗生素或使用導(dǎo)管、插管等侵入性治療，導(dǎo)致抗真菌能力降低，機(jī)體抵抗力弱，容易引起院內(nèi)感染，其次是各種分泌物(主要是陰道分泌物278株，19.0%)和尿液標(biāo)本(261株，17.8%)，與文獻(xiàn)報(bào)道相同[1，2]，提示本地區(qū)泌尿生殖道感染與念珠菌感染有關(guān)聯(lián)。

由于臨床真菌感染治療療程長(zhǎng)，以及抗真菌藥的不合理和不規(guī)則應(yīng)用，給臨床真菌感染的治療帶來(lái)難度，耐藥菌株也隨之大量出現(xiàn)[1]。

通過(guò)本地區(qū)兩年間收集的1462株念珠菌臨床分離株對(duì)抗真菌藥物敏感性監(jiān)測(cè)結(jié)果表明，伊曲康唑的耐藥率最高(28.9%)，其次為氟康唑(10.6%)，5-氟胞嘧啶和兩性霉素B這兩種抗真菌藥耐藥性較低，伏立康唑暫未發(fā)現(xiàn)耐藥菌株。伏立康唑一種較新的三唑類藥，其主要作用機(jī)制與咪唑類藥物相似，既抑制細(xì)胞色素P450依賴性的14-α脫甲基酶的功能，又對(duì)耐氟康唑的菌株如克柔念珠菌也有很大的殺傷力[3]，而對(duì)肝、腎、肺、心臟的副作用明顯少于5-氟胞嘧啶和兩性霉素B，是一個(gè)臨床潛能較大的藥物。

監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示伏立康唑在本地區(qū)對(duì)大多數(shù)耐藥株仍有較好的治療作用，尤其對(duì)耐氟康唑和伊曲康唑的克柔念珠菌有較好的抑菌作用，與有關(guān)報(bào)道相符[3]。另外從表2藥敏結(jié)果顯示，在菌種耐藥性分布中，熱帶念珠菌對(duì)伊曲康唑和氟康唑耐藥率最高，分別達(dá)到39.4%和15.7%，近平滑念珠菌對(duì)兩性霉素中敏率達(dá)到51.4%，雖然白色念珠菌對(duì)5-氟胞嘧啶和兩性霉素B仍有較高的敏感性，但是出現(xiàn)了多重耐藥情況，有58株(6.7%)白色念珠菌同時(shí)耐氟康唑和伊曲康唑。以上數(shù)據(jù)同有關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道不盡相同[6]，可能與各地區(qū)易感菌株分布不同有關(guān)，因此，應(yīng)加強(qiáng)真菌耐藥性監(jiān)測(cè)，指導(dǎo)臨床合理用藥。

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(收稿日期:2009-08-17)