斑馬魚p53基因原核表達(dá)載體的構(gòu)建及其在大腸桿菌中的表達(dá)
2010-01-01 00:00:00趙向忠劉明丁麗麗吳寧林秀坤
湖北農(nóng)業(yè)科學(xué) 2010年3期
摘要：利用原核表達(dá)系統(tǒng)克隆表達(dá)斑馬魚p53基因。RT-PCR法從斑馬魚胚胎中擴(kuò)增獲得p53基因編碼區(qū)，并將其克隆至原核表達(dá)栽體pET28a上，構(gòu)建重組質(zhì)粒pET28a／z—p53，將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化E coli BL21(DE3)受體茵，IPTG誘導(dǎo)表達(dá)，表迭產(chǎn)物經(jīng)鎳柱純化、尿素透析復(fù)性，SDS—PAGE電泳分析，結(jié)果表明，p53基因在大腸桿菌中成功表達(dá)，表達(dá)的p53融合蛋白分子量大約為53kD，透析復(fù)性后獲得了高純度可溶性的p53蛋白。
關(guān)鍵詞：p53基因；斑馬魚；原核表達(dá)
中圖分類號(hào)：Q786
文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A
文章編號(hào)：0439—8114(2010)03—0526—03
