β－甘露聚糖酶基因高效表達體系的構建
2009-12-31 00:00:00李斌劉正初王溪森石巖
湖北農(nóng)業(yè)科學 2009年8期
摘要：為構建β－甘露聚糖酶基因高效表達體系，采用重疊區(qū)擴增基因拼接法將蘇云金芽孢桿菌(Bacil-lus thuringiensis)CTC S-層蛋白啟動子和歐文氏桿菌(Erwinia carotovora)CXJZ95-198 β－甘露聚糖酶基因完整開放閱讀框定向連接，得到基因拼接體slp-man。將slp-man克隆到高效表達載體pET-28a+上，并轉(zhuǎn)化到大腸桿菌(Escherichia coli)JM109中。結(jié)果表明，β－甘露聚糖酶基因高效表達體系構建成功，重組菌發(fā)酵11h酶活達到671.3U·mL-1。是歐文氏桿菌CXJZ95－198的1.48倍。
關鍵詞：β－甘露聚糖酶基因；歐文氏桿菌；重疊區(qū)擴增基因拼接法
中圖分類號：S188；0789 文獻標識碼：A 文章編號：0439－8114(2009)08－1807－04
