癌胚抗原時間分辨熒光免疫分析法的建立及方法學評價

[摘要] 目的 建立癌胚抗原(CEA)時間分辨熒光免疫分析(TrFIA)法。 方法 采用兩株CEA單克隆抗體(CEA McAb)，一株用于固相包被(4.00μg/mL)，另一株用于標記銪(Eu3+)制備Eu3+-CEA McAb (1∶1600)，固相雙抗體夾心二步分析法檢測人血清中的CEA，并對此方法進行方法學評價。結果 本方法與甲胎蛋白(AFP)和糖類抗原19-9(CA19-9)的交叉反應率分別為0.25%和3.58%，而與其他常用腫瘤標志物無交叉反應;低、中、高濃度的CEA質控批內實驗變異系數分別為4.75%，4.25%和2.89%，批間實驗變異系數分別為9.55%，7.38%和3.69%;平均回收率為95.94%;試劑盒37℃烘烤7d后檢測性能基本穩定;并與CEA化學發光免疫分析技術(CLIA)比對試驗結果相關系數達0.9986;CEA-TrFIA法檢測系統的檢測低限(LLD)、生物檢測限(BLD)和功能靈敏度(FS)分別為0.4315ng/mL、1.000ng/mL和1.000ng/mL;線性范圍為1.000～500.0ng/mL。結論 CEA- TrFIA法具有靈敏度高、特異性強、精密性好、線性范圍寬、試劑有效期長和非放射性等優點，具有良好的臨床應用價值。

[關鍵詞 癌胚抗原;時間分辨熒光免疫分析;夾心法;分析靈敏度

[中圖分類號] R446[文獻標識碼] A[文章編號] 1673-9701(2009)32-01-03