乳腺癌超聲毛刺征患者的相關免疫組合指標表達情況

周亮 馬亞楠

新疆維吾爾自治區人民醫院超聲科，新疆烏魯木齊 830001

據世界衛生組織報道，女性乳腺癌的發病率已超過肺癌，排名第一，2020 年全球新發約230 萬例，占全部新發癌癥病例的11.7%[1]。我國乳腺癌位居女性惡性腫瘤第一位，且發病年齡趨于年輕化；因此早期發現、診斷和治療是提高乳腺癌患者生存率和改善預后關鍵[2-3]。超聲檢測以其便捷、低廉、無創等優點已成為篩查乳腺癌的最有效診斷技術之一，使用超聲技術可以無創且準確地觀察腫瘤的生物學特性，例如生長、侵襲和轉移[4-5]。毛刺征是浸潤性乳腺癌在超聲特異性征象之一，對乳腺良惡性腫塊的鑒別診斷具有重要的價值[6]。最近的研究發現雌激素受體（estrogenreceptor，ER）、孕激素受體（progestronereceptor，PR）、人類表皮生長因子受體2（human epidermal growth factor receptor 2，HER-2）、Ki-67 等表達水平直接影響乳腺癌的生物學行為[7-8]。但ER、PR、HER-2 和Ki-67與乳腺癌超聲毛刺征的關系尚未見諸報道。本研究調查ER、PR、HER-2 和Ki-67 與乳腺癌超聲毛刺征的關系，以期為乳腺癌的診斷提供分子可靠的生物學標志物。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性選取2019 年1 月至2020 年12 月新疆維吾爾自治區人民醫院收治的207 例乳腺癌患者為研究對象。患者均為女性，年齡29～95 歲，平均（52.98±9.72）歲，病理學檢查確認207 個病灶。納入標準：①符合《中國抗癌協會乳腺癌診治指南與規范（2017版）》[9]的相關診斷標準；②精神狀態正常；③經手術切除病理證實為乳腺癌者；④術前均行乳腺超聲檢查。排除標準：①乳腺癌遠處轉移或并發其他惡性腫瘤者；②臨床資料不完整者。本研究經院內醫學倫理委員會評定并批準（倫理批號為：KY2020041015）。

1.2 儀器與方法

1.2.1 儀器 本研究采用二維超聲檢測技術，檢測乳腺結節是否具有毛刺征。灰階顯像采用GE LOGIQ E9、PHILIP EPIQ7 型彩色多普勒超聲診斷儀，6～18 MHz淺表探頭。

1.2.2 超聲檢查方法及判斷標準 檢查時患者取仰臥位，雙臂上舉，充分暴露雙側乳腺。以乳頭為中心對乳腺行放射狀掃查，各掃查切面互相覆蓋，不要遺漏區域，選擇儀器預設置的乳腺檢查條件，使用常規灰階顯像方式對乳腺及其周圍組織及腋窩淋巴結進行掃查。檢查時調整增益、深度、聚焦區域、動態范圍等，使圖像顯示最佳。根據美國放射學會乳腺影像報告數據和系統（breast imaging-reporting and data system，BI-RADS）分類標準[10]，記錄乳腺腫塊大小、形態、邊緣毛刺征、后方回聲衰減、微小鈣化灶及有無腋窩淋巴結轉移等超聲二維征象，并根據Adler 分類法對腫塊內及周邊血流情況進行分級。

1.2.3 圖像分析 由兩名資深主治醫生對患者二維圖像進行定性判斷，將顯示邊緣有毛刺征結節的患者例數進行記錄統計，同時測量最大毛刺的基底部寬度，并對寬度進行分類，再對分類后的毛刺結節例數進行統計。

1.3 觀察指標及評價標準

乳腺癌術后標本均進行免疫組織化學檢測：手術標本經病理科標準規范取材[11]，放入10 倍體積4%緩沖甲醛液固定，石蠟包埋，4 μm 切片。

檢測方法及結果判定：對細胞膜、細胞質及細胞核出現棕黃色或棕色顆粒的細胞作為陽性細胞進行分析；ER 陽性、PR 陽性定位于細胞核上，HER-2 陽性表達于細胞膜上，Ki-67 檢測則在細胞漿內出現黃色或棕黃色為陽性，當出現棕黃色顆粒并且染色強度高于背景染色者判斷為陽性。癌細胞細胞核陽性占總體癌細胞總數1%以上為ER、PR 陽性。以細胞膜中出現棕黃色或棕色顆粒的細胞作為陽性細胞，平均HER-2 拷貝數/細胞>6.0，判斷為陽性；平均HER-2拷貝數/細胞<4.0，判斷為陰性。以細胞漿內中陽性細胞數比值≥14%為Ki-67 陽性，<14%為Ki-67 陰性[12]。

1.4 統計學方法

采用SPSS 25.0 統計學軟件進行數據分析，計量資料用均數±標準差（）表示，計數資料用率表示，組間整體比較采用χ2檢驗，以P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組患者臨床特征的比較

本研究的207 例乳腺癌患者中，無毛刺患者55例，有毛刺征患者152 例。兩組患者的年齡、腫塊大小、病理類型及腫瘤分期比較，差異無統計學意義（P＞0.05）（表1）。

表1 兩組患者臨床特征的比較[n（%）]

2.2 兩組患者免疫組化的比較

共納入207 例乳腺癌患者，有毛刺組的ER、PR陽性表達率高于無毛刺組，差異有統計學意義（P＜0.05）；而兩組患者的Her-2、Ki-67 陽性表達率比較，差異無統計學意義（P＞0.05）（表2）。有毛刺組中，＜1 mm 微毛刺患者74 例，1～2 mm 毛刺征患者59 例，＞2 mm毛刺征患者19 例，且1～2 mm 基底寬度毛刺征患者的ER、PR 陽性表達率最高，差異有統計學意義（P＜0.05）（表3）。

表2 兩組患者免疫組化的比較[n（%）]

表3 不同基底寬度毛刺征的ER、PR 陽性表達率比較[n（%）]

圖1 無毛刺及不同基底部寬度的毛刺征的超聲圖像

圖2 ER（弱+5%）及PR（強+70%）的免疫組化（100×）

3 討論

乳腺癌嚴重威脅女性健康及生命安全，因此早期發現、早期診斷至關重要。研究表明早期發現和早期治療可以明顯降低乳腺癌患者的死亡率[13]。鑒別乳腺腫瘤常用的方法包括：臨床檢查、乳腺超聲、鉬靶、粗針穿刺等。粗針穿刺可做組織學活檢，是“金標準”。但粗針穿刺也有局限，首先對穿刺者經驗、樣本量要求較高，對于一些病理形態較復雜的病灶會造成偏差甚至低估某些惡性病變。另外粗針穿刺為有創檢查，患者接受程度較低，因此乳腺超聲已經成為目前中國女性篩查和檢查的首選方法。據近年諸多文獻報道，將影像學檢查和生物學標記物檢測技術相結合，對乳腺癌的病理分型和診斷具有重要的臨床價值[14]。

乳腺癌超聲征象與病理組織學特征關系密切，病理組織學特征是超聲征象的基礎，聲像圖表現基本上可以間接提示乳腺癌的大體病理形態[15-16]。乳腺癌二維聲像圖大多顯示形態不規則，邊緣不規整，無包膜，后方回聲衰減，呈毛刺樣或蟹足樣改變。其中腫塊邊緣的不規整是典型乳腺癌常見的超聲表現。惡性腫瘤以浸潤性生長為主，在超聲影像上，腫塊向周圍組織浸潤，邊緣不規整，從腫塊表面呈輻射狀排列的高回聲與低回聲線，這一特征稱為邊緣毛刺征。邊緣毛刺征是超聲診斷中鑒別乳腺腫瘤良、惡性的重要信息，也是超聲診斷乳腺癌的經典指標。毛刺征的病理形成基礎為乳腺癌細胞直接向外浸潤腫塊周圍間質、導管、淋巴管和供血血管所致。

ER、PR 正常存在于乳腺細胞中，PR 的形成主要受到ER 的調節與控制，進而可用于指導乳腺癌對激素治療的反應性及后續的內分泌治療。Ki-67 可用于輔助判斷乳腺癌的增殖活性及病變的良惡性程度。此外，可通過檢測其Her-2 表達水平對疾病預后風險進行評估，其過量表達提示細胞的增殖能力有所提高[17]。有報道指出ER、PR 表達陽性的乳腺癌患者絕大部分適合內分泌治療[18]，這些患者治療后生存率可以大大提高，且腫瘤復發及遠處轉移概率均降低。

研究發現，即使是具有相同解剖和病理危險因素的患者，其自然疾病史和治療反應，大多數是由于分子異質性。因此，對分子標記物的探索已成為目前乳腺癌診治的主要焦點。評估這些分子標志物預測治療的預后和反應的能力，以幫助開發針對乳腺癌患者的個性化治療選擇。目前對于免疫組化指標的檢測僅限于大體病理切片，是否可以通過超聲影像來反映ER、PR、HER-2 及KI-67 等分子生物學指標的表達有待探討。具有邊緣毛刺征的乳腺癌細胞具有較低的侵襲能力，其顯示的ER、PR 陽性率與無邊緣毛刺征比較，明顯處于較高水平[19]。分析其原因，ER、PR 陽性表達可刺激病灶邊緣的腫瘤細胞向周圍正常乳腺腺體或脂肪結締組織浸潤蔓延，引起間質反應形成不規則的界面。通過提示邊緣毛刺征及不同分類的毛刺征，可評價相關生物分子學指標的表達，以判斷乳腺癌的預后情況[20-21]。本研究中，不同基底寬度毛刺征的ER、PR 陽性表達率比較，差異有統計學意義（P＜0.05），提示毛刺征與分子生物學指標均有一定的相關性，其可用于對病情嚴重程度及預后進行間接評價，可能隨著毛刺征出現，ER、PR 陽性率逐漸提高，這可能由于當ER、PR 表達陽性時，腫瘤成分沿導管向周圍組織蔓延浸潤，新生血管形成速度快于腫瘤生長速度，致其從腫瘤實質穿入周圍織，且腫瘤新生血管近腫瘤處內徑較寬，在穿入周圍組織過程中逐漸變細，形成寬基底的“毛刺征”，然而此種特點有待進一步深入研究。因此本研究認為，超聲毛刺征結合生物指標表達可為臨床評估患者病情及治療提供更多依據。

綜上所述，乳腺癌超聲毛刺征與分子生物學指標有一定相關性，可將其作為診斷乳腺癌的獨立風險因素，尤其根據基底部寬度分類后的診斷價值能進一步提高，值得臨床上進一步的研究。