膠體金快速檢測試劑在農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全上的應(yīng)用

張　浩　羅來成　劉若森

摘要隨著國內(nèi)外對農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全問題和無公害食品的日益重視,農(nóng)產(chǎn)品快速檢測技術(shù)的研究已經(jīng)成為當(dāng)前中國生物技術(shù)研究領(lǐng)域的的一大熱點。介紹了膠體金快速檢測在農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測領(lǐng)域應(yīng)用和技術(shù)特點。

關(guān)鍵詞農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全;膠體金;快速診斷

中圖分類號TS201.6文獻標(biāo)識碼B文章編號 1007-5739(2009)19-0338-01

膠體金快速診斷試劑是近年來的生物產(chǎn)業(yè)化最成功的產(chǎn)品之一,近年來,隨著國內(nèi)外對食品安全問題和無公害食品的日益重視,食品的快速檢測技術(shù)的研究已經(jīng)成為當(dāng)前中國生物技術(shù)研究領(lǐng)域的的一大熱點。快速膜檢測需求廣泛,可以應(yīng)用于臨床醫(yī)用、食品安全、動植物疾病和環(huán)境污染等諸多領(lǐng)域。目前,有禽流感、家畜疫病、農(nóng)藥殘留、食品藥物殘留等多個方向,市場也比較空白,因此發(fā)展前景非常好。

1農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全快速檢測

目前,“食品安全關(guān)鍵技術(shù)”課題專項已列入我國“十五”國家重大科技項目,“農(nóng)藥、獸藥殘留檢測技術(shù)”作為其關(guān)鍵課題之一,以提高食品質(zhì)量水平,保障人民身體健康,提高我國農(nóng)業(yè)和食品工業(yè)的市場競爭力及我國食品安全科技工作在國際上的影響力。其中氯霉素等農(nóng)獸藥殘留快速檢測方法、試劑盒及相關(guān)設(shè)備已作為其重要研究內(nèi)容,受到廣泛關(guān)注。目前免疫膠體金快速檢測已經(jīng)占據(jù)整個檢測市場20%,預(yù)計在2010年將達(dá)到40%～50%。

快速檢測,顧名思義是在短時間內(nèi)提供結(jié)果,準(zhǔn)確的說是在幾分鐘內(nèi)。這種檢測法是一種廉價的、一次性的基于膜的檢測方法,它能提供分析物存在于液體樣品的視覺證據(jù),這種檢測可以是獨立的試紙條,也可以以裝在塑料盒中的形式進行。總的來說,做此項檢測至少需要200μL的液體標(biāo)本,可在5～10min內(nèi)完成。在臨床檢測中,樣品可能有尿、血液、血清、唾液或其他體液。在非臨床檢測中,樣本可能是由土壤、粉塵、植物或者食品制備的微量溶液。

2膠體金快速診斷技術(shù)特點

目前,隨著現(xiàn)代單克隆抗體技術(shù)、膠體金免疫層析技術(shù)和新材料技術(shù)的發(fā)展,新興了一種新型檢測技術(shù)——膠體金免疫層析法(Colloidal Gold Immunochromatographic Strip Assay,GICA),該方法具有操作簡單、特異性強、不需要添加額外設(shè)備、快速(5～10min即可得到檢測結(jié)果)等特點,其反應(yīng)所需要的原料的全部或大部分均已整合到試劑中,當(dāng)待測樣品(尿液、血清或組織樣處理液)加入到樣品膜上后,由于微孔濾膜的毛細(xì)管作用,使抗原抗體反應(yīng)在固相膜上快速進行,反應(yīng)通常只需數(shù)分鐘,測試結(jié)果以肉眼可見的顯色條帶來判斷。其顯色反應(yīng)是由于所標(biāo)記的有顏色的顆粒在反應(yīng)區(qū)域聚集而形成的。目前在臨床診斷中得到了廣泛應(yīng)用,如傳染病、早孕、癌癥等檢測。近年來,膠體金檢測技術(shù)已開始應(yīng)用于小分子物質(zhì)的檢測,如毒素、藥殘留、環(huán)境監(jiān)測等非臨床檢測領(lǐng)域,目前國外已經(jīng)開發(fā)出用于鏈霉素、磺胺嘧啶等獸藥殘留檢測的試劑條。

膠體金快速檢測試劑采用了免疫膠體金技術(shù),將特異性抗原結(jié)合物和抗體分別固定于硝酸纖維膜上,并與膠體金標(biāo)記的抗單克隆抗體及其他試劑組裝成膠體金快速檢測試劑板,應(yīng)用層析式免疫競爭原理,特異性檢測牛奶、水產(chǎn)品、動物性肌肉組織等樣品中的農(nóng)獸藥殘留。根據(jù)靈敏度的質(zhì)量要求,基層檢測單位、水產(chǎn)和禽畜養(yǎng)殖企業(yè)及牛奶、蜂制品加工企業(yè)大規(guī)模樣本篩選的實際情況,將試劑盒的靈敏度定為1～5ng/g(ng/mL),作為樣品定性或半定量檢測之用。

3膠體金快速檢測試劑特點

相比目前其他檢測試劑,包括:ELISA檢測試劑盒、乳膠凝集法、放免法(RIA)、HPLC、質(zhì)譜法等,膠體金快速檢測試劑具有以下優(yōu)點。一是價格低。產(chǎn)品生產(chǎn)流程簡單,生產(chǎn)成本低。二是質(zhì)量高。膠體金方法制備而成的試劑特異性強、靈敏度高、重復(fù)性好。三是靈活可靠。大量多樣化的測試片或試劑盒檢測的產(chǎn)生,適用的環(huán)境范圍較寬松,其能提供變異系數(shù)在5%或更小范圍的可靠結(jié)果。四是操作簡便。膠體金方法制備而成的試劑以膠體金作為指示標(biāo)記,定性結(jié)果準(zhǔn)確、快速,操作簡便,可分批或單個樣品及時檢測。五是易于推廣使用。試劑易保存,操作人員無需專業(yè)培訓(xùn),不需要配備專門的儀器設(shè)備,按說明書即可完成操作。

4結(jié)語

總之,由于精良的膠體金試劑有更大的敏感性和特異性的需求,對膠體金的生產(chǎn)和使用嚴(yán)格的操作才可能取得成功,在大量快速檢測設(shè)計中對更高敏感性、可靠性及重現(xiàn)性要求的增加使得膠體金作為農(nóng)副產(chǎn)品中農(nóng)藥、獸藥殘留量的檢測首選。

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