熟地提取液對小鼠游泳耐力和SOD含量的影響

【摘要】 目的 探討熟地提取液對小鼠游泳能力和SOD含量的影響。方法 小白鼠20只，隨機分為對照組和實驗組，每組10只，對照組予生理鹽水灌胃0.1 ml/10g，實驗組用熟地提取液(含生藥0.1 ml/10g)灌胃，連續10 d，10 d后讓小鼠負重游泳，觀察負重游泳至力竭持續時間，游泳結束后，即刻頸椎脫臼法，取肝組織制備勻漿液，測定SOD含量。結果 熟地提取液灌胃10 d后明顯延長小鼠游泳至力竭所需的時間(P<0.05)，肝臟組織SOD活性明顯提高(P<0.05)。結論 熟地提取液對小鼠游泳抗疲勞能力和清除自由基均有明顯作用。

【關鍵詞】 游泳運動;超氧化物歧化酶(SOD);熟地提取液;小鼠

文章編號:1003-1383(2009)05-0529-02

中圖分類號:R 285.5 文獻標識碼:A

doi:10.3969/j.issn.1003-1383.2009.05.007

熟地是一種常用的中藥，其功用是滋陰、補腎、補血、調經等，用以治療血量或腎陰不足所致的失眠[1]、心悸、健忘、多夢。研究證實，熟地其主要成分是地黃多糖，具有較好抗氧化，提高造血功能和免疫功能[2]。有關地黃多糖抗氧化作用研究比較多[3]，但是地黃多糖對提升耐力和抗疲勞的效應研究比較少，為了更好揭示熟地中的地黃多糖抗疲勞作用的反應，本實驗用游泳方法來觀察地黃多糖對提高抗耐力的影響，并同時檢測肝臟SOD含量，為熟地的抗疲勞作用提供資料。

資料與方法

1.動物 昆明種小鼠20只，雌雄各半，體重為20～25 g(由廣西醫科大學實驗動物中心提供)，隨機分為兩組，每組10只，一組為對照組(生理鹽水灌胃)，一組為實驗組(用熟地提取液灌胃)。

2.藥品 超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒，組織中蛋白含量與考馬斯亮蘭試劑盒(由南京建成生物工程研究所提供)。

3.熟地提取液制備 取熟地干品100 g，用自來水浸泡4 h，加自來水1000 ml，煮1 h，過濾，取濾渣加水1000 ml再煮1 h，棄濾渣，將兩次提取液的濾液合并，過濾，再濃縮至100 ml備用，所得的提取液為含生藥1 g/ml。

4.實驗步驟 ①將實驗組和對照組的小鼠分籠飼養，自由飲食，溫室(28±2)℃，相對濕度45%～48%，每天晚上9∶00～10∶00灌胃，實驗組熟地提取液0.1 ml/10g體重量灌胃，對照組生理鹽水0.1 ml/10g體重量灌胃，每天1次，連續灌胃10 d。②稱小鼠體重，讓小鼠尾部負重(錫)自身體重的5%，置于直徑40 cm水桶中游泳，水溫控制在(20±2)℃，水深于3倍小鼠尾巴長度，游泳時間選擇在灌胃后30 min進行，以小鼠沉入水底10 s不能自行浮起，翻正反射消失為準，記錄小鼠開始負重游泳至力竭持續時間(s)。③肝組織勻漿制備撈出小鼠，即刻采用頸椎脫臼法致小鼠死亡，迅速取出肝組織，稱重測面積，用冰凍生理鹽水清洗干凈，用濾紙濾干。用勻漿機將肝臟組織制備成10%勻漿液。④測定肝組織SOD活力，用黃嘌呤氧化酶法測定超氧化物歧化酶，測定過程按試劑盒說明書方法進行。組織中蛋白質含量的測定采用考馬斯亮蘭試劑盒進行測定。

5.統計學處理 采用SPSS11.0軟件對實驗結果進行統計學分析，數據以(-±s)表示，組間比較用t檢驗，以P<0.05作為顯著性差異。

結果

1.熟地提取液對小鼠游泳力竭運動所需時間的影響 用熟地提取液灌胃10 d后可以明顯延長小鼠游泳至力竭所需時間(P<0.05)，結果見表1。

2.熟地提取液對力竭運動小鼠肝臟SOD含量的影響 經測定肝臟SOD含量，實驗組較對照組有明顯升高(P<0.05)，結果見表2。

討論

熟地主要成分為地黃多糖，它具有很好的抗衰老作

用[3]，前人研究熟地有滋陰、補腎、補血和調經作用[4]。臨床多用于治療血虛或腎陰不足所致的失眠、心悸、健忘、多夢等。熟地中地黃多糖可提高和增強造血功能，民間常用于治療貧血等，并能誘生人干擾素使之效應明顯提高，從而增加病毒誘生干擾素作用，達到增強機體免疫力的目的。實驗還表明熟地黃還有提高小鼠紅細胞膜、肝細胞膜、睪丸線粒體Na+、KATPase活性，因而是防病治病，延緩衰老的一種用藥[3，4]。我們為了探討熟地中地黃多糖另一種作用即對運動能力的影響以及抗疲勞的效應，采用熟地提取液灌胃的方法實施慢性實驗，然后進行游泳運動耐力實驗和檢測肝組織SOD含量。觀察熟地對小鼠游泳時間的長短，經游泳力竭運動耐力實驗，發現小鼠的游泳運動所需時間明顯延長，檢測肝組織結果SOD含量增加，說明熟地具有提高耐力和清除自由基的作用。提示熟地除了清除自由基功能外，還有提高耐力的功效。

我們認為，游泳是一項高強的運動項目，需要持久的耐力才能完成，而熟地中的地黃多糖具有多方面的功用，它既然有抗衰老提高SOD的含量[3]，就有可能與提高耐力有關，本實驗提示了這一可能。熟地中地黃多糖在提高造血功能和紅細胞膜、肝細胞膜等活性的同時，也提高了運動的耐力，其可能使肝臟糖原合成增強，有能量儲存的作用，為提高肌肉能量的提供保證充足的來源，從而具有抗疲勞之功效。熟地中地黃多糖的抗氧化作用也佐證這一點，另一方面推測，熟地中地黃多糖有可能使乙酰膽堿遞質合成的增加或持續的釋放有關，也有可能熟地中地黃多糖對提高機體的耐力等多方面綜合的結果起作用有關，值得探討。本實驗的研究為熟地藥用增加了另一方面的價值。

參考文獻

[1]黃志杰，俞小平.常用中醫[M].武漢:湖北科學技術出版社，2002，263-533.

[2]凌慶枝，敖宗華，嚴光耀，等.地黃研究概況[J].淮南師范學院學報，2003，5(3):21-23.

[3]苗明三，孔艷紅，方曉艷.(懷)熟地多糖抗氧化作用[J].中國醫藥信息雜志，2002，9(10):32-33.

[4]管家齊，郭艷麗，吳海良，等.地黃藥理研究近況[J].中藥材，2001，24(5):380-382.

(收稿日期:2009-09-03 修回日期:2009-09-25)

(編輯:潘明志)