中國野生葡萄醛脫氫酶基因在擬南芥中的過量表達

摘要：將質粒pWR306中包含ED35s啟動子、Qmega元件及TNOS終止子的一段核苷酸序列定向克隆到質粒pCAMBIA1300，構建了植物中間表達載體pwR－Ⅱ；將重組質粒pGEM—T－ALDH的醛脫氫酶(ALDH)基因片段定向克隆到pWR-Ⅱ，構建了葡萄ALDH基因的植物過量表達載體pwR－Ⅱ-ALDH。采用改進凍融法將其導入農桿菌EHA105，采用花序浸蘸法轉化擬南芥，獲得了潮霉素抗性的轉化擬南芥植株。PcR檢測證明外源基因已整合進擬南芥基因組，Real-time PcR結果表明ALDH基因在轉化植株的表達量遠高于野生種。轉化植株和野生植株在形態上有一定的差異，說明葡萄ALDH基因在擬南芥中表達對其生長發育有一定影響。