金銀花的有效成分及其提取工藝研究

摘 要：本文通過對大量文獻(xiàn)的總結(jié)，對金銀花的分布、藥用價(jià)值及化學(xué)成分作了詳細(xì)的闡述；對金銀花的有效成分綠原酸作了介紹，并對綠原酸的提取、分離、純化方法作了描述和對比，為工業(yè)上綠原酸的制備提供了參考。

關(guān)鍵詞：金銀花 提取工藝 綠原酸 藥用價(jià)值

金銀花為忍冬科植物忍冬(Lonicera japonica Thunb)、紅腺忍冬(Lonicera Lypoglauca Miq)、山銀花(Lonicera confusa DC)或毛花柱忍冬(Lonicera dasystyla Rehd)的干燥花蕾或帶初開的花。全世界忍冬植物大約200種，我國有98種，分布于全國各地，其中供藥用的達(dá)47種。金銀花為中醫(yī)常用藥，其味甘、寒，歸肺、心、胃經(jīng)，具有清熱解毒、涼散風(fēng)熱之功效，主治癰腫疔瘡、喉痹、丹毒、熱毒血痢、風(fēng)熱感冒、溫病發(fā)熱等癥，應(yīng)用歷史悠久。

1 理化成分

1.1 揮發(fā)油：揮發(fā)油是金銀花的有效成分之一［１］。目前在金銀花揮發(fā)油中鑒定出的化學(xué)成分多達(dá)近70種。主要含芳樟醇、棕櫚酸，其他化學(xué)成分為醇、醛、酯、酮、烷、烯、炔等有機(jī)化合物。

1.2 有機(jī)酸類：綠原酸類化合物也是金銀花有效成分之一。包括綠原酸(Chlorogenic acid) 和異綠原酸(isochlorogenic acid)［２］，其他有機(jī)酸還有咖啡酸(coffeic acid)和棕櫚酸(Palmitic acid)。

1.3 黃酮類化合物：1949年沖七太郎首先從金銀花中分離出木犀草素(luteolin)，后又得忍冬苷(lonicerin)，1995年高玉敏等首次從金銀花中分離出四個(gè)黃酮類化合物；1996年黃麗瑛等［３］首次分離出corymbosin和5-羥-3’-4’-7-三甲基黃酮(5-hydroxy-3’-4’-7-t rimethoxy flavone) 。

1.4 三萜類：婁紅祥等從金銀花水溶性部分中分離得到3種具有保肝活性的三萜皂苷［４］；陳昌祥從金銀花花蕾中分離得到了6個(gè)化合物，其中有一新化合物，命名為新長春皂苷F［５］。

1.5 無機(jī)元素：金銀花含微量元素共有15種：Fe，Mn，Cu，Zn，Sr，Ti，Mo，Ba，Ni，Cr，Pb，V，Co，Li，Ca［６］。

1.6 醇類：金銀花中鑒定出的醇類主要包括：β-谷甾醇，肌醇，二十九烷醇等［７］。

2 金銀花的有效成分——綠原酸

金銀花的主要有效成分之一為綠原酸。綠原酸是咖啡酸與奎寧酸（1－羥基六氫沒食子酸）的酯，分子中具有羧基、酯鍵以及多元醇和多酚結(jié)構(gòu)，是一種苯丙素類化合物，化學(xué)名為3-O-咖啡酰奎寧酸，結(jié)構(gòu)式如圖1所示。

綠原酸的藥用歷史悠久，具有抗菌、抗病毒等作用，對消化、血液系統(tǒng)和生殖系統(tǒng)疾病均有療效。近年，綠原酸及其衍生物被確認(rèn)是大鼠肝微粒體中葡萄糖-6-磷酸位移酶的特效性抑制劑，顯示出其在治療糖尿病方面的良好前景。綠原酸也是某些中藥制劑質(zhì)量控制的重要指標(biāo)［８］。

3 綠原酸的提取工藝

正是由于綠原酸良好的藥用價(jià)值以及良好的應(yīng)用前景，國內(nèi)外已有不少文獻(xiàn)［９］對金銀花中綠原酸的分析、測定及提取工藝的研究，但提取方法各不相同。主要流程大致可以分為粗提、分離純化、成品的制備等步驟，其中粗提方法很多。

3.1 綠原酸的提取方法

3.1.1 回流提取法：稱取原料適量，在一定pH值和溫度下，加入定量的提取溶劑，回流提取，過濾、濾渣，再用相同的提取溶劑在相同的條件下提取、過濾，將濾液合并并進(jìn)行真空干燥至粉末。

3.1.2 超聲提取法：稱取原料適量，在一定pH值和溫度下，加入定量的提取溶劑，超聲波處理，過濾、濾渣，再用相同的提取溶劑在相同的條件下處理、過濾，將濾液合并并進(jìn)行真空干燥至粉末。

3.1.3 微波提取法：稱取原料適量，在一定pH值和溫度下，加入定量的提取溶劑，置微波爐中處理一定的時(shí)間，取出冷卻，再置微波爐中同樣條件處理，如此重復(fù)6次，過濾，真空干燥至粉末。

3.1.4 滲漉法提取：稱取原料適量，在一定pH值和溫度下，加入定量的提取溶劑，置冰箱冷卻，待結(jié)冰后取出，冰融化后裝入滲漉筒，收集滲漉液真空干燥至粉末。

3.1.5 煎煮法提取：稱取原料適量，加入適量80%工業(yè)乙醇(pH值為2.5)，煎煮一定的時(shí)間，過濾、濾渣，再用同樣的方法煎煮相同時(shí)間，過濾，合并濾液真空干燥至粉末。

3.1.6 浸提法提取：稱取原料適量，加入適量80%工業(yè)乙醇(pH值為2.5)，室溫靜置24h，過濾，濾液真空干燥至粉末。

4 綠原酸的分離、純化工藝

將提取液過濾，濃縮，拌入聚酰胺，真空烘干，研磨，過篩，得粗品，經(jīng)聚酰胺柱層析分離，得產(chǎn)品得率和產(chǎn)品純度(綠原酸含量)。另外可以綠原酸含量為指標(biāo)，分別考察聚酰胺目數(shù)、洗脫劑、物料比、柱徑與柱長比、流速、洗脫劑用量等影響因素，優(yōu)化出最佳的分離工藝參數(shù)。對分離后的產(chǎn)品，選用不同的溶劑進(jìn)行重結(jié)晶，從中選出最佳的溶劑進(jìn)行精制，得到綠原酸精品。當(dāng)然，分離純化還有很多方法，比如利用大孔樹脂也同樣可以純化綠原酸。

5 綠原酸的含量測定

精確稱取原料1.00g，加入30mL95%乙醇溶液，置于索氏提取器中回流提取，55℃回流提取4h，放置冷卻至室溫，過濾，定容至50 mL，搖勻，精確吸取提取液0.1 mL，稀釋至4 mL，以95 %乙醇作對空白，在紫外分光光度計(jì)331 nm處測定吸光度A值，按綠原酸的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算其綠原酸的含量。

6 綠原酸的提取工藝對比

6.1 提取溶劑的選取：提取溶劑主要有兩種，即水和乙醇（工業(yè)乙醇），不同的提取方法可以采用不同的提取溶劑。乙醇的提取效果明顯好于水，但水作為溶劑，雖然提取率相對較低，但對環(huán)境無污染，生產(chǎn)成本相對較低，工業(yè)生產(chǎn)切實(shí)可行，所以目前仍然是大工業(yè)生產(chǎn)普遍采用的提取方法。

6.2 提取方法的選取：采用相同的溶劑、不同的提取方法對綠原酸進(jìn)行提取，提取率最高的方法為超聲波法，其次為煎煮法、微波法、浸提法等［９］。

參考文獻(xiàn)：

［1］張玲.山東金銀花干花及鮮花揮發(fā)油成分研究.西北藥學(xué)雜志，1998，13(6)：249-250.

［2］劉祥蘭，劉重芳，張英等.金銀花中綠原酸提取工藝的比較和優(yōu)化研究.中成藥，2000，22(6)：402.

［3］黃麗瑛.中藥金銀花化學(xué)成分的研究.中草藥，1996，27(11)：645-647.

［4］婁紅祥，郎偉君，呂木堅(jiān).金銀花水溶性化合物的分離與結(jié)構(gòu)確定.中草藥，1996，27(4)：195.

［5］陳昌祥，王薇薇，倪偉等.金銀花花蕾中三萜皂甙.云南植物研究，2000，22(2)：201-208.

［6］吳二喜.忍冬與灰氈毛忍冬微量元素的分析.中草藥，1998，19(6)：45-47.

［7］李永梅，王天志，王志霄.細(xì)氈毛忍冬花蕾化學(xué)成分研究.中國中藥雜志，2001，26(1)：45-47.

［8］符史良，鐘杰平，李海霞等.從金銀花中提取綠原酸的工藝研究.廣東海洋大學(xué)學(xué)報(bào)，2007，27(4)：70-73.

［9］鄧素蘭，余繼宏，鄧芳琴.金銀花中綠原酸提取工藝的對比.吉首大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)，2007，28(2)：109-112.