摘 要:醫用生物顯微鏡是醫學形態學實驗教學中重要的實驗室設備,只有熟悉顯微鏡的結構和功能,才能熟練地使用和保養顯微鏡。本文對實驗教學過程中顯微鏡的高效節約使用做了分析。
關鍵詞: 顯微鏡 使用 要求
醫學實驗中有許多形態學的內容,而形態學實驗的主要設備就是顯微鏡。如果學生們對顯微鏡的有關知識一知半解,就達不到相應的的教學要求[1]。所以我們在《組織胚胎學》第一次實驗課中專門安排顯微鏡使用與保養[2,3]的內容,并在后續內容里反復提及,不斷練習,希望學生們在充分認識顯微鏡的結構的基礎上,能夠基本會使用;掌握基本原則,避免損壞顯微鏡和其他器材;熟悉顯微鏡主要性能,提高使用的效率和效果;及時正確維護和保養,延長顯微鏡的使用壽命。
1.了解顯微鏡的一般知識,避免浪費耗材
1.1電光源顯微鏡的底座光源的燈泡使用壽命有限,這是經常要更換的配件,原因就是同學們常開“長明燈”,從上課到下課,燈泡一直處于工作狀態。要盡量減少開燈時間,用鏡之前打開,不用時隨手關閉[4]。另外光線并非越亮越好,要根據放大倍數,適當調節聚光器的高度、光圈大小及底座光源的強度,因為良好的圖像是由主題、背景和對比度決定的。一般底座光源要強檔,這樣發出的是白色光。如光亮度不夠,則應調節光圈和聚光器來適應。
1.2使用香柏油并非越多越好,一般一滴即可,多而無益。將一滴香柏油置于玻片適當位置,油浸鏡頭浸入其中,勿混有氣體,即可調節觀察圖像。隨著鏡頭的移動,香柏油由于粘滯性而緊隨。在轉換物鏡頭時如果不慎將載玻片上的香柏油弄到低倍鏡頭上,要立即擦去。
1.3光學系統的清潔要用清潔液。非油浸鏡頭使用乙醚乙醇混合液,而油浸鏡頭清潔要使用二甲苯清潔液,二者一般不可混用。擦拭油鏡頭時,只需要一張拭鏡紙,在上面滴加二甲苯一滴,即可擦去鏡頭上的油污。這樣不僅節約,而且能減輕較大濃度二甲苯揮發對人體的損害(國際癌癥研究中心公認二甲苯有致癌作用)。在物鏡頭轉換的過程中,如不慎將香柏油玷污到非油浸鏡頭應立即拭去,否則香柏油干結會導致視物模糊。如果使用二甲苯擦拭,則易損傷鏡頭,因為油浸鏡頭與非油浸鏡頭的材質是不同的。
2.掌握顯微鏡的使用原則,較少顯微鏡機械結構的磨損,避免損壞顯微鏡及其他實驗器材
2.1顯微鏡使用的順序一次為調光、對焦、物鏡轉換。按步驟依次進行,不盲目調節顯微鏡。
2.2顯微鏡使用的三大原則是:物鏡頭,先低倍后高倍;載物臺,先高后低(先上后下);調節螺旋,先粗后細。遵守這三大原則,可以快速找到觀察目標,避免壓碎標本,減少機械磨損。操作者在操作過程中極易出現以下錯誤:一是在高倍鏡下直接調焦;二是不管鏡筒上升或下降,眼睛始終在往目鏡中看視野;三是不了解物距的臨界值,物距調到2—3厘米時還在往上調,而且轉動準焦螺旋的速度很快。前兩種錯誤結果往往造成物鏡鏡頭抵觸到裝片,損傷裝片或鏡頭,而第三種錯誤則是操作者使用顯微鏡時最常見的一種現象,使得鏡頭受到機械擠壓。針對以上錯誤,操作者要注意,調節焦距一定要在低倍鏡下調,先轉動粗準焦螺旋,使鏡筒慢慢下降,物鏡靠近載玻片,但注意不要讓物鏡碰到載玻片,在這個過程中眼睛要從側面看物鏡,然后用左眼朝目鏡內注視,并慢慢反向調節粗準焦螺旋,使鏡筒徐徐上升,直當看到物像為止。一般顯微鏡的物距在1厘米左右,所以如果物距已遠超過1厘米,但仍未看到物像,那可能是標本未在視野內或轉動粗準焦螺旋速度過快,此時應調整裝片位置,然后重復上述步驟,當視野中出現模糊的物像時,就要換用細準焦螺旋調節,只有這樣,才能縮小尋找范圍,提高找到物像的速度,減少機械磨損。如果不遵守調節原則,壓碎形態學示教片,不僅是經濟上的損失,而且器材若得不到及時補充,將影響實驗教學。
2.3物鏡轉換的問題。使用低倍鏡后換用高倍鏡,學生們往往喜歡用手指直接推轉物鏡,認為這樣比較省力,但這樣容易使物鏡的光軸發生偏斜,原因是轉換器的材料質地較軟,精度較高,螺紋受力不均勻很容易松脫。一旦螺紋破壞,整個轉換器就會報廢。正確的做法是手握轉換器的下層轉動板轉換物鏡。
3.熟悉顯微鏡的重要性能,提高使用效率和實驗效果[5]
顯微鏡的某些特征性能如眥間距、工作距離、鏡口率、分辨率[6]、定位精度、齊焦精度(等高調焦)、焦點深度(景深)[7]等是衡量顯微鏡好壞的主要指標,熟悉這些指標不僅可以衡量顯微鏡的性能優劣,而且可以提高使用顯微鏡的使用效率和效果。如熟悉定位精度,可以很快找到視野里的目標,減少載物臺上下調節的頻率;熟悉齊焦精度,可以高效地調節圖像清晰度,較少調節旋鈕尤其是微調旋鈕的磨損;在使用油浸鏡頭時,切勿把玻片放反,超出顯微鏡的工作距離。部分學生觀察的圖像效果不佳,或是尋找目標費時費力,或是根本找不到圖像視野,大多原因在此。
4.恰當保養顯微鏡,延長使用壽命
不要輕易打開鏡頭[8],防止水汽和塵埃進入,切忌口吹手抹或用布擦。部分學生覺得好玩,隨意拆卸下顯微鏡的零部件,或是遇到問題,自行擺弄,這是極端錯誤的。正確的做法是:持鏡時必須是右手握臂、左手托座的姿勢,不可單手提取,以免零件脫落或碰撞到其它地方;輕拿輕放,不可把顯微鏡放置在實驗臺的邊緣,以免碰翻落地;保持顯微鏡的清潔,光學和照明部分只能用擦鏡紙擦拭,機械部分用布擦拭;使用完畢后,取下標本片,轉動旋轉器使鏡頭呈八字形,升高鏡臺,放回原處;最后填寫使用登記表,有問題向實驗教師說明情況。
顯微鏡是比較精密而貴重的光學儀器,能夠熟悉顯微鏡的結構并熟練地使用和保養顯微鏡是做好形態學實驗的前提,學生們必須做到:一要嚴格遵守學生實驗守則和實驗室規則,預習有關實驗內容,設計好實驗方案,做到心中有數;二要在教師指導下認證完成實驗內容,親手做實驗,通過實驗,發現問題,解決問題,將理論與實際結合起來,將學習知識、培養能力和提高素質結合起來;三要愛護實驗儀器設備和器材,節約實驗耗材,減少不必要的浪費。只有這樣才能提高顯微鏡的使用效率,降低顯微鏡使用的損耗。
參考文獻:
[1]吳庚利,解穎馨,周伊等.如何保持學生顯微鏡的良好性[J].醫學信息學,2007,20(7):1146-1147.
[2]王峻玉,許平.高師植物學實驗教學改革與實踐[J].生物學雜志,2003,20(3):46-47.
[3]李文娟.淺談顯微鏡電化在實驗教學中的作用[J].內蒙古科技與經濟,2004:14.
[4]劉媛熊建團.淺談醫學院校的顯微鏡管理和維護[J].現代企業教育,2007,3.
[5]申海燕.淺析加強生物顯微鏡維護與管理的方法[J].襄樊職業技術學院學報,2007,6(5):12-13.
[6]俞善丁.臨床基礎檢驗學(專科)[M].人民衛生出版社,北京,1999年第一版:8-12.
[7]李滌生.臨床檢驗基礎,[M].北京:人民衛生出版社,1993年第一版:307.
[8]林和,陳寅山.淺談高校生物顯微鏡的使用與維護保養[J].使用與維修,2007,4:64-65.