注射用三磷酸胞苷二鈉的處方設計及穩定性考察

摘 要 目的：研究注射用三磷酸胞苷二鈉的生產處方并考察其穩定性。方法：采用單因素輔料篩選和對比試驗法，對注射用三磷酸胞苷二鈉的處方進行優化，并采用高效液相色譜法測定其含量并考察其穩定性。結果：注射用三磷酸胞苷二鈉的處方為三磷酸胞苷二鈉40 mg，甘露醇20 mg，甘氨酸20 mg，注射用水1 mL，冷凍干燥。結論：該處方設計合理，制劑穩定性好。

關鍵詞 三磷酸胞苷二鈉 篩選 對比試驗法 穩定性

中圖分類號：R97 文獻標識碼：B 文章編號：1006-1533(2008)05-0224-03

三磷酸胞苷二鈉為腺苷酸類藥物，可促進神經細胞內磷脂、核酸和蛋白質的合成代謝，調節神經細胞生物膜的合成，增強神經細胞抗損傷能力，營養神經細胞，延緩神經細胞凋亡。臨床上主要用于治療腦梗死、充血性心力衰竭、急性腦血管病、新生兒缺氧缺血性腦病和糖尿病周圍神經病變等［1～3］。

由于三磷酸胞苷二鈉對溫度較敏感，在常溫下易分解為二磷酸胞苷二鈉和一磷酸胞苷二鈉。為增強其穩定性，筆者將該品經過處方優化并制成凍干粉針劑，對注射用三磷酸胞苷二鈉的處方工藝和穩定性進行了研究。

1 儀器與試藥 

1.1 儀器

SPD-10Avp高效液相色譜儀(日本島津公司)；pHSJ-3FpH計（上海精密科學儀器有限公司）；Lyo-1真空冷凍干燥機（上海東富龍科技有限公司）；SHH-250JS恒溫恒濕箱（重慶市永生實驗儀器廠）。

1.2 試藥

三磷酸胞苷二鈉（杭州美亞生物技術有限公司，批號：050402）；甘露醇（上海長征富民藥業有限公司，批號：05082701）；右旋糖酐40(六安華源制藥有限公司，批號：05083002)；甘氨酸（協和氨基酸有限公司，批號：K469194）；注射用三磷酸胞苷二鈉（見工藝驗證項下，批號：060301、060302、060303）。

2 方法與結果

2.1 處方設計

2.1.1 溶劑的確定

根據三磷酸胞苷二鈉易溶于水的特點，經過溶解試驗，40 mg三磷酸胞苷二鈉可在0.5 mL的注射用水中完全溶解，且放置數日不析出。因此，選擇注射用水為本品的溶劑。

2.1.2 凍干體積的確定

為了保證主藥的溶解且凍干易于成型，經試驗，確定凍干體積為1 mL。

2.1.3賦形劑的篩選

合適的賦形劑可以使制劑易于凍干并能保持較好的外觀性狀。本實驗選擇甘露醇和右旋糖酐40分別制備樣品，考察樣品的干燥失重、外觀性狀、復溶性，從而篩選出最合適的賦形劑，結果見表1。

從表1可見，用甘露醇作賦形劑時，凍干品的干燥失重、外觀性狀及復溶性均優于右旋糖酐40。因此，選擇甘露醇作為本品的賦形劑。

2.1.4 處方篩選

凍干制劑要求骨架成型且較牢固，外觀光平細密，含水分低，復溶性好。在確定溶劑、凍干體積、賦型劑的基礎上選用甘氨酸為穩定劑。處方組成見表2。

按上述處方組成配成藥液，過濾，灌裝于管制瓶中，每瓶1 mL，半加塞入凍干箱凍干。對制得的樣品進行評價，考察外觀性狀、干燥失重、復溶性、澄清度、含量及有關物質，結果見表3。

從表3可見，各處方的外觀性狀無明顯差異；隨著甘露醇用量的增加，干燥失重逐漸降低；而隨著甘氨酸用量的減少，含量逐漸降低。綜合考慮，可選擇處方D作為最優處方。

2.2 工藝驗證

按上述最優處方稱取處方量三磷酸胞苷二鈉、甘氨酸及甘露醇，加入冷的注射用水中攪拌溶解，用2 mol/L 氫氧化納調pH至5.5~6.5，用冷注射用水定容，用0.22 μm微孔濾膜無菌過濾，凍干，制備3批中試樣品（批號：060301、060302、060303）。結果，所制備的3批樣品的性狀均為白色凍干塊狀物，干燥失重分別為3.5%、3.2%和2.9%，均小于7.0%；含量分別為98.3%、101.6%和102.1%，含量在95 .0％～105.0％之間；有關物質分別為1.7%、1.5%和1.9%，均小于5.0％。

2.3 質量控制

2.3.1 干燥失重

取本品，以五氧化二磷為干燥劑，60 ℃減壓干燥至恒重，失重不得超過7.0%［4］。3批樣品干燥失重分別為3.5%、3.2%和2.9%，均小于7.0%。

2.3.2 含量測定

總核苷酸：用分光光度法測定［4］，在280 nm波長處測定吸收度，按C9H14N3Na2O14P3的吸收系數為243計算。

三磷酸胞苷二鈉的重量比：用高效液相色譜法測定［4］。用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以0.2 mol/L 磷酸鹽緩沖液（取磷酸氫二鈉35.8 g，磷酸二氫鉀13.6 g，加水900 mL溶解，用1 mol/L氫氧化鈉溶液調節pH至7.0，加入四丁基溴化銨1.61 g，加水至1 000 mL搖勻。甲醇∶水（95∶5）為流動相；柱溫為35 ℃，檢測波長為271 nm；理論板數按三磷酸胞苷二鈉峰計算應大于1 500；各色譜峰的分離度應符合規定。出峰次序依次為一磷酸胞苷、二磷酸胞苷與三磷酸胞苷。三磷酸胞苷二鈉含量（%）=總核苷酸×三磷酸胞苷二鈉的重量比。結果，3批樣品的含量分別為98.3%、101.6%和102.1%。

2.3.3 有關物質檢查

按照含量測定項下三磷酸胞苷二鈉的重量比的方法測定，有關物質不得超過5.0%。結果，3批樣品的有關物質分別為1.7%、1.5%和1.9%。

2.4 穩定性研究［4］

根據三磷酸胞苷二鈉對溫度比較敏感的特點，將3批樣品（批號：060301、060302、060303）按市售包裝，在溫度為（30±2）℃、相對濕度（65±5）％的加速試驗條件下放置，分別于1、2、3、6個月取樣分析各項指標，結果見表4。按市售包裝，在溫度為（25±2）℃、相對濕度（60±10)％的長期試驗條件下放置，分別于3、6、9、12個月取樣分析各項指標，結果見表5。

加速及長期試驗結果表明，在溫度為（30±2）℃、相對濕度（65±5）％加速試驗條件下，干燥失重、含量、有關物質等各項指標均符合質量標準要求。在溫度為（25±2）℃、相對濕度（60±10）％長期試驗條件下，干燥失重、含量、有關物質等各項指標均符合質量標準要求。

3 結論

三磷酸胞苷二鈉原料藥在常溫條件下具引濕性，易降解。通過制劑處方篩選，得到了一種能顯著改善該品穩定性的處方工藝，使注射用三磷酸胞苷二鈉的各項指標能達到質量標準要求。

采用高效液相色譜法能同時準確測定本品中三磷酸胞苷二鈉的含量及有關物質，具有快速、重現性好、準確的優點。經6個月加速和12個月長期穩定性考察，本品性狀、干燥失重、含量、有關物質等指標均無明顯變化。說明本處方工藝合理，產品質量穩定。

參考文獻

1 黃經璋，王嗣春，史孟松.三磷酸胞苷二鈉治療急性腦梗塞的臨床療效觀察［J］.臨床和實驗醫學雜志，2004，3(3):155－157.

2 馮永歌，劉建軍，申敏，等.三磷酸胞苷二鈉治療新生兒缺氧缺血性腦病34例［J］.河南醫科大學學報，2001，36(4):494－495.

3 武順，孫中安，任冬梅.三磷酸胞苷治療糖尿病周圍神經病變的臨床觀察［J］.臨床軍醫雜志，2003，31(6):30－31.

4 國家藥典委員會編.中華人民共和國藥典二部［M］.2005年版.北京:化學工業出版社，2005:附錄176.

(收稿日期：2008-02-22)