布渣葉水提物解熱退黃作用的實(shí)驗(yàn)研究Δ

曾聰彥，梅全喜，高玉橋，戴衛(wèi)波，林 慧，鐘希文，馮劍威，胡 瑩（廣州中醫(yī)藥大學(xué)附屬中山中醫(yī)院藥學(xué)部，中山市 528400）

布渣葉又名蓑衣子、破布葉、麻布葉、爛布渣、布包木等，為椴樹科植物破布葉Microcos paniculata L.的干燥葉，具有清熱消滯、利濕退黃之功效，用于感冒、濕熱食滯之脘腹痛、食少泄瀉、濕熱黃疸[1]。布渣葉藥用歷史并不長，古代和現(xiàn)代的臨床應(yīng)用也比較少，主要在廣東民間煲涼茶的原料中出現(xiàn)，其保健作用廣為認(rèn)可[2]。現(xiàn)代研究表明，布渣葉含有揮發(fā)油、黃酮類、生物堿、三萜類、有機(jī)酸、氨基酸、蒽醌、強(qiáng)心苷等成分[3]。藥理研究表明，本品有降血脂、抗衰老及殺蟲作用[4]，而針對本品具有清熱消滯、利濕退黃功能的藥效學(xué)研究則未見有報(bào)道。因此，筆者根據(jù)布渣葉的功能主治對其進(jìn)行解熱退黃藥效學(xué)研究，為以后更好開發(fā)應(yīng)用布渣葉提供理論依據(jù)。

1 材料

1.1 儀器

TD25-WS型48孔多管架自動(dòng)平衡離心機(jī)（長沙湘儀離心機(jī)儀器有限公司）；S648型三用水浴箱（汕頭市第二醫(yī)療器械廠）；7170A型全自動(dòng)生化分析儀（日本日立公司）；微量移液器（上海求精生化試劑儀器有限公司）；BS224S型電子天平（北京賽多利斯儀器有限公司）。

1.2 試藥

布渣葉（購于廣東省中山市香山藥業(yè)有限公司，經(jīng)廣東中山市藥品檢驗(yàn)所鑒定為真品）；吲哚美辛片（上海信宜九福藥業(yè)有限公司，批號：070302）；α-萘異硫氰酸萘脂（ANIT，北京恒業(yè)精細(xì)化學(xué)品有限公司）；干酵母（深圳稻香村食品有限公司）；生理鹽水、蒸餾水（廣州中醫(yī)藥大學(xué)附屬中山中醫(yī)院制劑室自制）。

1.3 動(dòng)物

SD大鼠，♀♂兼半，體質(zhì)量180～220 g；SPF級昆明種小鼠，♀♂兼用，體質(zhì)量（20±2）g，均由廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供（動(dòng)物合格證號：SCXK（粵）2003-0002）。

2 方法

2.1 布渣葉水提物的制備

取布渣葉藥材2.34 kg，加水，煎煮2次，合并濾液，濃縮成1500 mL，加適量防腐劑，放冷，貯藏于冰箱中，臨用前配制成所需濃度。

2.2 布渣葉水提物的解熱作用[5]

選用SD大鼠60只，♀♂兼半，測量其基礎(chǔ)肛溫。選出9只做預(yù)實(shí)驗(yàn)，觀察酵母混懸液致大鼠發(fā)熱時(shí)間段以及選擇酵母的劑量。將余下的SD大鼠51只稱重，隨機(jī)分為5組，即空白（生理鹽水）、吲哚美辛（0.00225 g·kg-1）及布渣葉水提物高、中、低劑量（16.8、8.4、4.2 g·kg-1）組。各組大鼠連續(xù)ig 3 d，第3天ig后立即sc 20%酵母混懸液0.8 mL·100 g-1。測定大鼠注射酵母混懸液后4、5、6、7、8、9 h的肛溫，記錄體溫變化，比較組間差異。

2.3 布渣葉水提物的退黃作用[6]

取昆明種小鼠65只，♂30只，♀35只，隨機(jī)分成5組，即空白（生理鹽水）、模型（生理鹽水）及布渣葉水提物高、中、低劑量（23.4、11.7、5.58 g·kg-1）組。ig 給藥，每天1次，連續(xù)15 d。除空白組外，其余各組分別于第13天ig后2 h ig ANIT花生油溶液60 mg·kg-1。所有小鼠處死前禁食12 h，第15天斷頭取血，以3500 r·min-1離心10 min，測總膽紅素（T-Bil）、直接膽紅素（D-Bil）含量及堿性磷酸酶（ALP）、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）活性。

2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

3 結(jié)果

3.1 布渣葉水提物的解熱作用

注射酵母后7 h，空白組大鼠體溫變化升到最大值；與空白組比較，布渣葉水提物高、中劑量組大鼠體溫顯著降低（P＜0.05），且溫度變化接近正常基礎(chǔ)體溫水平。在5 h段，空白組大鼠體溫變化降低到比較低的水平；與空白組比較，布渣葉水提物中、低劑量組大鼠體溫顯著降低（P＜0.05），且體溫變化接近正常基礎(chǔ)體溫水平。結(jié)果表明，布渣葉水提物有較好的解熱作用，并能促使干酵母致大鼠體溫波段變化維持在正常水平。布渣葉水提物對發(fā)熱模型大鼠的解熱作用見表1。

3.2 布渣葉水提物的退黃作用

表1 布渣葉水提物對發(fā)熱模型大鼠的解熱作用（）Tab 1 Antipyretic effect of water extract of M.paniculata in febrile model rats（）

表1 布渣葉水提物對發(fā)熱模型大鼠的解熱作用（）Tab 1 Antipyretic effect of water extract of M.paniculata in febrile model rats（）

與空白組比較：＊P＜0.05vs.blank group：＊P＜0.05

組別空白組吲哚美辛組布渣葉水提物高劑量組布渣葉水提物中劑量組布渣葉水提物低劑量組劑量/g·kg-1－0.0022516.88.44.2 n 注射酵母后不同時(shí)間大鼠體溫變化/Δ℃基礎(chǔ)體溫/℃37.2±0.3536.9±0.4037.3±0.6637.3±0.4437.0±0.5410101010114 h-0.34±0.420.24±0.54＊-0.63±0.70-0.38±0.830.02±0.535 h-0.28±0.330.33±0.71＊-0.35±0.660.44±0.39＊0.43±0.75＊6 h 0.32±0.620.2±0.850.53±0.550.55±0.340.66±0.727 h 1.14±0.480.40±0.52＊0.51±0.66＊0.44±0.30＊0.84±0.688 h 0.68±0.650.01±0.49＊0.43±0.830.43±0.480.90±0.719 h 0.41±0.91-0.32±0.91＊-0.03±0.69-0.01±0.791.28±0.52＊

與模型組比較，布渣葉水提物高、中、低劑量組小鼠血清中T-Bil與D-Bil的含量顯著降低（P＜0.05），ALP、AST和ALT的活性顯著降低（P＜0.05），說明布渣葉水提物有顯著的退黃與改善肝功能的作用。布渣葉水提物對模型小鼠血清T-Bil、D-Bil、ALP、AST和ALT的影響見表2。

4 討論

表2 布渣葉水提物對模型小鼠血清T-Bil、D-Bil、ALP、AST和ALT的影響（）Tab 2 Effects of water extract of M.paniculata of T-Bil，D-Bil，ALP，AST andALT in mice serum（）

表2 布渣葉水提物對模型小鼠血清T-Bil、D-Bil、ALP、AST和ALT的影響（）Tab 2 Effects of water extract of M.paniculata of T-Bil，D-Bil，ALP，AST andALT in mice serum（）

與空白組比較：＊P＜0.05；與模型組比較：#P＜0.05vs.blank group：＊P＜0.05；vs.model group：#P＜0.05

組別空白組模型組布渣葉水提物高劑量組布渣葉水提物中劑量組布渣葉水提物低劑量組劑量/g·kg n－－23.411.75.851313101013 T-Bil/umol·L-1 1.17±0.2658.58±49.36＊9.61±23.41#12.62±24.24#1.38±1.38#D-Bil/μmol·L-1 0.12±0.0643.41±37.09＊6.69±17.34#9.00±18.76#0.11±0.04#ALP/IU·L-1 204.9±40.1670.1±648.68＊240.6±209.6#229.4±129.3#209.2±65.5#AST/IU·L-1 313.3±145.11321.4±706.6＊438.1±523.4#567.9±574.4#291.4±115.1#ALT/IU·L-1 40.6±8.5640.2±461.6＊175.1±340.4#133.6±176.6#64.6±59.3#

布渣葉為嶺南習(xí)用草藥，盛產(chǎn)于我國南方，特別是兩廣地區(qū)，資源極其豐富。本品味酸，性平，無毒，民間常采葉曬干泡水當(dāng)茶飲，有清熱解毒、消食積及解渴開胃的功效，常用于治療感冒、咽喉痛、食滯腹脹、黃疸、蜈蚣咬傷等。布渣葉也是著名成藥“廣東涼茶”、“甘和茶”、“六和茶”、“十味溪黃草顆粒”、“王老吉”和“仙草爽涼茶”等的主要組成藥物之一，其清熱退黃作用廣為認(rèn)可。為更好印證其臨床效果，本研究采用酵母致大鼠發(fā)熱的影響實(shí)驗(yàn)和ANIT致黃疸型小鼠血清學(xué)指標(biāo)變化實(shí)驗(yàn)，觀察布渣葉水提物解熱、退黃藥理作用。

解熱實(shí)驗(yàn)是用20%酵母液sc大鼠，通過機(jī)體生成及釋放內(nèi)致熱原，最終導(dǎo)致體溫調(diào)節(jié)中樞的體溫調(diào)節(jié)點(diǎn)上移，從而使機(jī)體產(chǎn)熱加強(qiáng)、散熱降低、體溫升高。在解熱實(shí)驗(yàn)的預(yù)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，大鼠sc酵母混懸液后，體溫是先降后升，約在4 h后出現(xiàn)較明顯的體溫升高現(xiàn)象，于9 h后體溫曲線平緩并呈回落趨勢，故筆者選取4～9 h作為觀察大鼠體溫變化的時(shí)間段。研究表明，布渣葉有比較好的解熱作用，并能促使干酵母致大鼠體溫波段變化維持在正常水平。

布渣葉水提物對ANIT所致黃疸模型小鼠血清中T-Bil與D-Bil的含量有非常明顯的降低作用，同時(shí)能顯著抑制ALP、AST和ALT的活性，說明布渣葉水提物的退黃與改善肝功能作用非常明顯。

本研究初步證實(shí)，布渣葉水提物具有較好的解熱和非常明顯的退黃作用，但其有關(guān)作用機(jī)制有待進(jìn)一步研究。筆者下一步將對其水提物的不同極性溶劑萃取分離部位作進(jìn)一步藥效學(xué)研究，以便找出藥理活性明顯的有效部位，從而可望獲得活性更強(qiáng)的有效成分。

[1]廣東省食品藥品監(jiān)督管理局.廣東省中藥材標(biāo)準(zhǔn)[S].廣州：廣東科學(xué)技術(shù)出版社，2004：66.

[2]曾聰彥，吳惠妃，郭展榮.布渣葉化學(xué)成分定性鑒別的實(shí)驗(yàn)研究[J].世界中西醫(yī)結(jié)合雜志，2009，4（3）：175.

[3]曾聰彥，梅全喜.布渣葉的藥用歷史及現(xiàn)代研究概述[J].中國藥房，2008，19（增刊）：25.

[4]田素英，曾聰彥，梅全喜，等.布渣葉的化學(xué)成分、藥理作用與臨床研究進(jìn)展[J].亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥，2009，5（1）：134.

[5]陳 奇.中藥藥理研究方法學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，1993：296.

[6]王永新.退黃合劑對藥物誘發(fā)急性肝損傷小鼠保肝退黃作用的研究[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2001，7（4）：38.