農(nóng)桿菌介導(dǎo)霞多麗葡萄胚性細(xì)胞系遺傳轉(zhuǎn)化條件的優(yōu)化

摘要：為建立葡萄(Vitis vinifera)遺傳轉(zhuǎn)化技術(shù)體系，以霞多麗葡萄(Chardonnay)胚性細(xì)胞系為靶組織，采用GUS檢測(cè)法，對(duì)影響農(nóng)桿菌介導(dǎo)葡萄遺傳轉(zhuǎn)化效率的主要因素進(jìn)行了研究。結(jié)果表明，超聲波處理時(shí)間長(zhǎng)短對(duì)轉(zhuǎn)化效率有較大影響，在所試的0.5、1、5、10min 4種不同時(shí)間的超聲波處理中，以5min時(shí)轉(zhuǎn)化效率較好，平均達(dá)到9.11個(gè)藍(lán)色斑點(diǎn)；AS濃度對(duì)轉(zhuǎn)化效率有明顯差異，當(dāng)濃度為50μmol/L時(shí)，平均藍(lán)色斑點(diǎn)數(shù)為8.89個(gè)，100μmol/L時(shí)，達(dá)到12.44個(gè)：DTT質(zhì)量濃度對(duì)轉(zhuǎn)化效率也有較大影響，在所試的3種質(zhì)量濃度(1，2，3 mg/L)中，以3mg/L為最佳，有16.67個(gè)藍(lán)色斑點(diǎn)。通過GUS瞬時(shí)表達(dá)檢測(cè)，確立了農(nóng)桿菌介導(dǎo)葡萄胚性細(xì)胞系遺傳轉(zhuǎn)化的幾個(gè)最適影響因素，從而為葡萄遺傳轉(zhuǎn)化技術(shù)體系的建立奠定了基礎(chǔ)。

關(guān)鍵詞：葡萄；農(nóng)桿菌；胚性細(xì)胞系；超聲波；遺傳轉(zhuǎn)化

中圖分類號(hào)：S663.1

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1009—9980(2008)02—236—04