中國櫻桃Ｓ－ＲＮａｓｅ基因ＰＣＲ擴(kuò)增技術(shù)體系的建立

摘要：通過對(duì)TaqDNA聚合酶、Mg²⁺、dNTP、通用引物、模板DNA濃度等反應(yīng)參數(shù)的系統(tǒng)研究，建立了中國櫻桃S-RNase基因特異PCR擴(kuò)增體系。該體系反應(yīng)的總體積25μL，其中Taq酶1.25U，MgCl₂2.5mmol/L，dNTP0.15mmol/L，通用引物0.25μmol/L，模板DNA 50 ng。反應(yīng)程序?yàn)椋?4℃預(yù)變性3 min；33個(gè)循環(huán)的94℃變性1 min，56℃退火45 s，72℃延伸1.5 min：最后72℃延伸10 min。利用優(yōu)化的擴(kuò)增體系在中國櫻桃的不同品種中獲得有效擴(kuò)增，進(jìn)一步證明了該體系具有良好的穩(wěn)定性和重復(fù)性。

關(guān)鍵詞：中國櫻桃；S—RNase基因；PCR擴(kuò)增體系

中圖分類號(hào)：S662.5 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1009—9980(2008)02—277—04