淺談高效液相色譜法在藥品檢驗中的體現

摘 要：目的：分析在藥品檢驗過程中應用高效液相普法的檢驗效果。方法：將銀杏葉中提取的銀杏黃銅藥物當作研究的對象，均分成研究組與常規組，稱取0.2克的樣品量，常規組通過薄層的色譜（TLC）方式來檢測，研究組通過高效液相色譜方法（HPLC）來檢測，對比分析兩種檢驗方法下，產品的回收率、分離率以及純度。結果：研究組中槲皮素、山萘素以及異鼠李素的分離率、純度明顯高于常規組，對比差異顯著（P<0.05）；常規組中山萘素加入量為2毫克，檢測量為1.7毫克，回收率為85.0%，研究組中山萘素加入量為2毫克，檢測量為1.99毫克，回收率99.5%，研究組中山萘素回收率明顯比常規組高，對比差異顯著（P<0.05）。結論：高效液相色譜方法可以高效率、有效與準確的測定藥品含量，同時可以檢查藥物中的相關物質；并且在藥物回收率、精準度以及純度方面的檢測效果比較好，具有應用的價值。

關鍵詞：高效相色譜法；藥品檢驗；應用效果

現階段高效液相色譜方式在藥物分析過程中較為常用，這種分析方式主要優勢是比較快捷與高效。在長時間發展過程中，高效液相譜方法在操作的自動化、分析速度、檢測的靈敏度以及分離效能方面均得到較好的發展，同時還保留經典的液相色譜法中：方便色譜制備、樣品的適用范圍比較廣以及流動相比較多等優勢，廣泛應用在石油化工、生物工程、食品工業以及制藥工業等領域中。在高效液相色譜的技術不斷發展的背景下，漸漸用于藥品的檢驗中，并且作用也日漸彰顯，在大多數藥品檢驗中都應用這種檢驗的方式。文章分析了在藥品檢驗過程中應用高效液相普法的檢驗效果，總結如下：

1 主要的試劑以及儀器

1.1 主要試劑、藥品

選取銀杏葉的提取物，該藥物主要生產于EGb德國威瑪舒培博士的藥廠中，其注冊的證號主要是H20090296；重蒸水，這種水經過超純水儀器濾膜的過濾；甲醇，分析純AR，該藥物生產于深圳市華昌化工的有限公司；磷酸，分析純，這種藥物主要生產于深圳市華昌化工的有限公司；黃酮貳元中槲皮素的對照品，生產于上海亞培生物科技的有限公司。

1.2 儀器

高效液相色譜的儀器SP8800泵，生產于美國光譜的物理公司；54400型的積分儀、ChromDe的脫氣機，Spheri-5RP-18（5um）的色譜柱（220mm×4.6毫米），配10uL定量管的進樣器。

1.3 檢驗的方法

將銀杏葉中提取物銀杏黃銅藥物當作研究的對象，均分成研究組以及常規組，稱取0.2克的樣品量。常規組使用薄層色譜（TLC）方式實施檢測，研究組通過高效液相譜方法（HPLC）實施檢測，經檢測以后，對兩組研究對象山萘素的產品回收情況、分離率、精密度以及純度進行分析。

1.4 制備樣品

稱取銀杏葉的提取物0.2克，然后加入甲醇40毫升，輕微震蕩混合均勻，確保提取物徹底溶解，加入40毫升濃度為1.5mol/L鹽酸溶液，輕微搖勻，放在37攝氏度水浴鍋之中進行加熱，加熱時間為兩個小時。加熱完成并冷卻以后，放在50毫升的容量瓶之中，應用甲醇定容，然后放置在室溫下備用。

1.5 高效液相色譜方法（HPLC）的條件

流動相：0.4%磷酸溶液與甲醇比為45：55；流速：每分鐘流動的量為1毫升；柱溫為25攝氏度；進樣的體積為10uL；波長為360納米。

1.6 統計的方法

應用SPSS18.0統計軟件來分析與處理數據，用均數±的標準差（x±s）來表示計數資料，并用x2來檢驗計數資料，用P<0.05表示差異存在統計學方面的意義。

2 結果

2.1 兩組檢測方式下精密度、分離率以及純度比較

常規組中槲皮素的分離率為89.8%、純度為89.2%；山萘素的分離率為92%、純度為89.0%；異鼠李素的分離率為88%、純度為89.1%。研究組中槲皮素的分離率為99.2%、純度為99.8%；山萘素的分離率為99.1%、純度為99.9%；異鼠李素的分離率為98.9%、純度為99.9%。研究組中槲皮素、山萘素以及異鼠李素的分離率、純度明顯高于常規組，對比差異顯著（P<0.05）。

2.2 在兩種檢測方式下山萘素回收率

常規組中山萘素加入量為2毫克，檢測量為1.7毫克，回收率為85.0%，研究組中山萘素加入量為2毫克，檢測量為1.99毫克，回收率99.5%，研究組中山萘素回收率明顯比常規組高，對比差異顯著（P<0.05）。

3 討論

3.1 高效液相普方法的特點

高效液相色譜法主要將液體當作流動相，同時應用高壓輸液的系統進行檢測，是色譜方法中的一個重要分支[1]。高效液相譜方法使用高壓的輸液泵，把不同比例成分的混合溶劑、不同極性的溶劑等流動相，泵進固定相色譜柱中，經過進樣閥將檢測樣品注入其中，經流動相進入柱內，當柱內各個成分被完全分離以后，再依次泵入檢測器中進行相關的檢測，以便分析試樣中的化學成分。就原理方面來講，高效液相色譜與經典的相色譜法相比，并沒有本質區別，但是高效液相普法使用了高效微粒的固定相、新型高壓的輸液泵以及高靈敏度的檢測器。高效液相色譜方式使用了極細小高效色譜的填料以及小口徑柱，應用高壓的輸液泵讓溶劑高速流過色譜柱，與經典柱的色譜法相比，速度比較快，并且有高靈敏度、高壓、高效以及高速的特點[2]。

3.2 高效液相色譜在藥品檢驗中的應用

近年來，高效液相色譜法（HPLC）逐漸應用在食品、藥品等監測的工作中，這種方式在曲安奈德與頭炮拉定等藥物的鑒別中有著良好效果。此外，在難以區分相似藥名時，經常會使用液相色譜方法進行監測，例如：云防風、水防風以及川防風等藥物名字差異不大，但是臨床的藥理具有巨大差異[3]。尤其近年來一些保健品以及藥品中會添加違禁藥品，嚴重影響了患者生命安全，因此，需要使用高效液相色譜方法對這些藥品進行監測，有效保障藥物的安全性。而文章主要通過高效液相色譜方法來分析銀杏葉中提取銀杏黃銅藥物，而且，高效液相色譜方式監測，可以清楚了解黃銅藥物中的各個組成部分。經研究發現，研究組中槲皮素、山萘素以及異鼠李素的分離率、純度明顯高于常規組，對比差異顯著（P<0.05）。常規組中山萘素加入量為2毫克，檢測量為1.7毫克，回收率為85.0%，研究組中山萘素加入量為2毫克，檢測量為1.99毫克，回收率99.5%，研究組中山萘素回收率明顯比常規組高，對比差異顯著（P<0.05）。

綜上，高效液相色譜方法可以高效率、有效與準確的測定藥品含量，同時可以檢查藥物中的相關物質，嚴格監測抗生素以及藥物中的違禁成分；并且在藥物回收率、精準度以及純度方面的檢測效果比較好，值得進一步在臨床上推廣與應用。

參考文獻

[1]劉平懷，吳曉娜，陳晨.高效液相色譜法測定藥品中的乙二醇二乙醚二胺四乙酸[J].色譜，2015，12（4）：419-422.

[2]王婧菲，于泓，卜文.離子液體作高效液相色譜流動相添加劑分離測定芳香族羧酸[J].分析測試學報，2014，21（5）：533-538.

[3]筆雪艷，張勝波，張清波.用超高效液相色譜蒸發光散射檢測桔梗流浸膏指紋圖譜的研究[J].藥學實踐雜志，2015，12（3）：153-155.