調中生血膠囊的制備和質量標準研究

摘 要 目的：制備調中生血膠囊，建立調中生血膠囊（陳皮、降礬）的質量控制標準，并考察制劑的穩定性。方法：將處方中的生藥進行處理后制成硬膠囊劑。采用化學方法鑒別降礬，TLC法鑒別陳皮，HPLC法測定陳皮中有效成分橙皮苷的含量，并進行初步穩定性考察。結果：降礬和陳皮鑒別方法，專屬性強，重現性好，空白無干擾。橙皮苷含量測定方法，在0.119 75～3.097 5 μg進樣量范圍內，線性關系良好，r＝0.999 9；平均回收率為100.04％，RSD＝0.29％（n＝6）。考察3個月，穩定性良好。結論：本研究中建立的定性定量方法操作簡便，專屬性強，準確可靠，可以有效控制調中生血膠囊質量。

關鍵詞 陳皮 降礬 橙皮苷 HPLC 初步穩定性 

中圖分類號：R917 文獻標識碼：B 文章編號：1006-1533(2007)09-0419-03

Study on the preparation and quality standard control of Tiaozhong Shengxue Capsule

Xu Lingling， Wang Ling， Guo Taoying， He Xianping

(Department of Pharmacy， Yueyang Hospital of Chinese Integrative Medicine， Shanghai University of Traditional Chinese Medicine， Shanghai，200437)

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ABSTRACT Objective:

To prepare Tiaozhong Shengxue Capsule and establish the quality control standard for Tiaozhong Shengxue Capsule (Pericarpium Citri Reticulatae and Jiangfan) and investigate the stability of the preparation. Methods: The crude drugs in the prescription was made into hard gelatin capsule. Jiangfan was identified by chemical method. Pericarpium Citri Reticulata was identified by TLC method. The content of hesperidin， an active component of Pericarpium Citri Reticulata， was determined by HPLC method. The primary stability of the preparation was investigated. Results: The method for identification of Pericarpium Citri Reticulatae and Jiangfan had good specificity and repeatability. There was no interference in blank control. The hesperidin determination method had good linearity from 0.119 75 to 3.097 5 μg (r=0.999 9) when the quantity in sampling was at the mug level. The mean recovery rate was 100.04% and the relative standard deviation (RSD) was 0.29% (n=6). The results of the 3 months investigation showed that primary stability was satisfactory.Conclusion: The qualitative and quantitative method is simple， specific， accurate and reliable. It can be used to effectively control the quality of Tiaozhong Shengxue Capsule.

KEY WORDSPericarpium Citri Reticulatae；Jiangfan; Hesperidin; HPLC; primary stability

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調中生血膠囊是由我院復方中藥制劑調中生血丸經劑型改進研制而成，由降礬和陳皮兩味中藥組成。具有補血、生血作用，用于缺血性貧血，癥見頭暈乏力，面色蒼白，心悸少寐。方中降礬主要成分為硫酸亞鐵(作為補鐵劑)，重用陳皮，以理氣健脾，減少鐵劑對腸胃的刺激，調中和胃，促進鐵的吸收。本科制劑室對膠囊制備方法和質量控制進行了研究［1～3］，并對該制劑3個月的初步穩定性進行了考察。

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1 處方與制備方法

處方：陳皮210 g，降礬140 g。

制備方法：取上述2種藥材飲片，粉碎，混勻，過100目篩，置微波處理，干燥，以每粒裝0.35 g的量裝入0號膠囊即得。共制備3批樣品，批號分別為：05033001、05033002和05033003。

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2 質量標準研究

2.1 儀器、試藥和樣品

島津LC-10A高效液相色譜系統：SCL-10A VP控制系統，SPD-10A UV-VIS檢測器，LC-10AT 高壓液相泵（雙泵），CTO-10ASVP柱溫箱；BRANSONB5200S－DT超聲清洗儀；Sartorius BS124S（1/10 000） 天平和Sartorius RC210S（1/10 萬）天平。

橙皮苷對照品（中國藥品生物制品鑒定所提供，供含量測定用，批號：110721-200211）；陳皮對照藥材（中國藥品生物制品鑒定所提供，供鑒別用，批號：120969-200204）；調中生血膠囊樣品（1項下制備的3批樣品）；正己烷、醋酸乙酯、甲醇、冰醋酸、鐵氰化鉀、硫氰酸銨等試劑均為分析純。

2.2 降礬的化學鑒別

取本品0.5 g，加水10 mL，攪拌片刻，過濾，分置4支離心管。一管中加新鮮配制的鐵氰化鉀試液數滴，即顯深藍色沉淀，離心取沉淀，加稀鹽酸，不溶解，加氫氧化鈉試液適量，顯棕色沉淀；一管中加硫氰酸銨試液2～3滴，溶液顯紅色；一管中加氯化鋇試液，產生白色沉淀，離心取沉淀，加鹽酸或硝酸均不溶解；一管中加醋酸鉛試液，產生白色沉淀，離心取沉淀，可溶解于適量氫氧化鈉試液中。同時取缺降礬的空白對照樣品，同法操作，結果空白樣品無干擾。

2.3 陳皮的薄層鑒別

取本品1 g，加甲醇15 mL超聲15 min，過濾，濾液作為供試品溶液。另取陳皮對照藥材0.5 g，加甲醇5 mL，超聲15 min，過濾，取濾液作為對照藥材溶液。再取缺陳皮的空白對照樣品同供試品溶液制備，得空白對照溶液。吸取供試品溶液與空白對照溶液各5 μL，對照藥材溶液1 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷－醋酸乙酯(2∶3)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外燈（365 nm）下檢視，供試品色譜在與對照藥材色譜相應的位置上顯相同顏色的熒光斑點，空白對照無干擾。

2.4 HPLC法測定陳皮中橙皮苷的含量

2.4.1 色譜條件

色譜柱：Diamonsil C18柱（4.6×250 mm，5 μm）；流動相：甲醇-2％冰醋酸溶液（35∶65）；流速：1.5 mL/min；檢測波長：284 nm；柱溫：40 ℃。理論塔板數按橙皮苷峰計算不得低于3 000。

2.4.2 樣品溶液的制備 

取橙皮苷對照品適量，加甲醇，制成每毫升含橙皮苷0.2 mg的溶液，作為對照品溶液。精密稱取本品0.1 g，置20 mL量瓶中，加甲醇至刻度，超聲處理20 min，放冷，用甲醇補足減失體積，搖勻，放置片刻，取上清液，用0.45 μm的膜過濾，取續濾液，作為供試品溶液。取降礬0.04 g，同供試品溶液制備制得空白對照（缺陳皮）溶液。

2.4.3 樣品測定

取2.4.2項下各溶液分別精密吸取5 μL，進樣分析，以外標法計算橙皮苷的含量。空白對照顯示其它成分不干擾橙皮苷的測定。

2.4.4 線性關系考察 

取濃度為0.619 5、0.479、0.191 6、0.095 8、0.047 9、0.023 95 mg/mL的橙皮苷對照品溶液，精密吸取 5 μL，進樣分析，以進樣量為橫坐標，峰面積為縱坐標，作標準曲線，回歸方程為Y＝11 191.7+12 227.8 X， 相關系數為r＝0.999 9。

2.4.5 精密度實驗 

取同一橙皮苷對照品溶液，精密吸取5 μL，連續進樣6次，以峰面積計算日內精密度RSD＝0.41％（n＝6）。

2.4.6 重復性實驗

取同一批樣品（批號：05033001）共6份，按本文所述的擬定方法測定，平均含量為38.87 mg/g ， RSD＝1.05％（n＝6）。

2.4.7 穩定性試驗

取本品（批號：05033001）供試品溶液，放置0、2、4、22、24、27 h后分別測定，峰面積RSD為1.19％，表明供試品液在27 h內基本穩定。

2.4.8 回收率實驗

取已知含量的本品（批號：05033001，含橙皮苷38.87 mg/g）0.05 g，精密稱定，置20 mL量瓶中，共6份，分別精密加入橙皮苷對照品溶液（濃度為0.594 5 mg/mL）各3 mL，按供試品溶液制備方法制備，測定，計算加樣回收率，平均為100.04％，RSD為0.29％（n＝6）。

3 初步穩定性考察

按《中藥新藥研究的技術要求》，擬定臨床試驗用包裝條件，塑料瓶裝，于室溫下進行考察，除當月考察1次外，每月考察1次，連續3個月，結果見表2。考察內容：性狀以觀察結果記錄描述，鑒別和含量測定項目按2項擬定方法檢測，檢查項目水分、崩解時限和微生物限量均參照《中國藥典》2000年版一部附錄有關方法檢測，并判定是否符合規定。

4 討論

1)原調中生血丸為全生藥粉水蜜丸，水分和微生物難以控制，常常出現超標現象，現將其改為硬膠囊劑，并采用快速、高效、節能的微波爐進行加熱，在去除水分同時又有良好的滅菌作用。

2)本膠囊劑制備工藝簡單、快速、容易控制，3個月初步穩定性考察結果表明，其樣品的性狀、鑒別項目、橙皮苷含量、水分、崩解時限、微生物限度檢查均符合規定，除水分可能正值上海地區多雨高溫季節略有增加外，其它項目均無明顯改變，說明本品穩定性良好。

3)降礬為主要含硫酸亞鐵的硫酸鹽礦物，亞鐵鹽和硫酸鹽化學鑒別反應均呈正反應。陳皮鑒別采用薄層層析法，以藥材作為對照，特征斑點明顯，特異性高。HPLC法測定陳皮中的主要有效成分橙皮苷的含量，專屬性強，靈敏快速。其他檢查項目均參照《中國藥典》一部的有關內容要求，為該制劑制定了全面的質量控制標準。

參考文獻

1 苗明三，李振國主編.現代實用中藥質量控制技術［M］.北京：人民衛生出版社，2000：577-588.

2 國家藥典委員會.中國藥典（一部）［M］ .北京：化學工業出版社，2000：148-149.

(收稿日期：2007-07-18)