品種純度鑒定技術及其發展等

李　蓉　煙　彬　邢惠梅　茹　鮮　曉　剛　艾合買提

20世紀50年代以前，品種純度鑒定技術發展到了田間小區鑒定和田間檢驗方法。50年代后，國際種子檢驗協會開始提出種子檢驗室鑒定品種的可能性和價值。70和80年代發展了電泳技術、幼苗鑒定技術和快速鑒定技術。90年代開始注意計算機模擬分析系統和分子技術的應用。

1形態鑒定技術

1．1種子形態鑒定通過種子形狀、大小、色澤、質地、表面的光與毛以及種子外表各部位的特征加以鑒別，以區分本品種與異品種。如，小麥可根據種子籽粒形狀和顏色、粒質胚部性狀、頂端茸毛的有無及分布，籽粒皺痕等來鑒別；玉米種子根據粒形、粒色、粒質、正面的長寬比及胚的凹陷程度來鑒別；棉花種子根據纖維長度、整齊度、棉籽形狀、大小、顏色、短絨有無及多少等來鑒別。隨著現代育種科學的發展，不同品種間種子外觀形態的差異越來越小，靠區別種子形態上的差異來鑒定種子純度也變得越來越困難。

1．2幼苗形態鑒定根據不同品種幼苗的獨特性狀進行檢驗，如幼苗芽鞘顏色、幼苗生長錐、子葉的形狀、顏色、大小等。

鑒定途徑有兩種，一種是提供給植株以加速發育的條件(類似于田間小區鑒定，只是所需時間較短)，當幼苗達到適宜評價的發育階段時，對全部或部分幼苗進行鑒定；另一種途徑是讓植株生長在特殊的逆境條件下，測定不同品種對逆境的不同反應來鑒別不同品種。該法簡便、省時，比種子形態法的使用范圍明顯擴大，但能用于鑒別的性狀仍不夠多，且受環境影響較大，因此無法鑒別性狀差異不明顯的品種。

1．3植株形態鑒定(田間小區種植鑒定)該法是將一定量的作物種子在田間種植一個小區，單粒播種，不間苗、不定苗。設有標準樣品作對照，在檀株的不同發育時期與標準樣品進行比較對照。主要根據株形、株高片數、葉色、葉片寬窄、花藥顏色等做出評判，從而對不同品種加以鑒別。田間小區種植鑒定方式多種多樣，可在當地同季、當地異季或異地異季種植鑒定。該方法能夠觀察、比較的性狀較多。結果準確、可靠。是目前解決種子質量糾紛中最具有法律效力的檢測方法。缺點是費工、費時、鑒定周期長、費用高，而且此法受環境和人為影響較大，鑒定者的觀察經驗也制約著鑒定的準確性。

2快速鑒定技術

2．1苯酚染色法適用于小麥、大麥、燕麥、水稻等。將種子用苯酚染色，根據染色程度的差異來區分出不同品種。小麥根據穎果染成的顏色，大麥、燕麥觀察內外稃染色深淺，水稻根據谷粒或米粒染色程度，來判定是本品種還是異品種。

2．2愈傷木酚專門用于大豆品種鑒別的方法。大豆種皮內具有過氧化物酶，不同品種由于遺傳基礎不同，過氧化物酶的活性不同，在一定條件下，溶液染色的深淺不同，依此區分不同品種。

2．3高粱種子氫氧化鉀一漂白粉測定法根據高粱種皮或種皮下黑色素(單寧酸)有無的差異，區分高粱品種的方法。

2．4小麥種子的氫氧化鈉測定法當紅白皮不易區分(尤其是經殺菌劑處理的種子)時，可用氫氧化鈉處理，根據種子淺色和深色加以區別。

2．5燕麥種子氯化氫測定法將燕麥種子放入氯化氫溶液浸泡，根據棕褐色(熒光種子)或黃色(非熒光種子)來鑒別不同品種的種子。

2．6燕麥種子熒光測定法應用波長360A紫外光照射，根據內外稃有無熒光或強弱進行鑒定。

3生化鑒定技術

目前，生化鑒定技術有蛋白質電泳法、色譜法鑒定、免疫鑒定技術等。其中，電泳法是品種純度測定中較為快速準確的方法，是指利用電泳技術對供檢樣品的種子或幼苗的蛋白質進行分離、染色。形成電泳譜帶的差異，并與標準品種相比較，從而鑒定品種純度的一種方法。該法快速、穩定、重演性好，具有一定的使用價值，特別是作為種子營銷過程的品種純度快速驗證方法。但對于某些遺傳組成非常接近的品種，不易找到特異蛋白，采用蛋白質電泳難以發現特征帶，不容易鑒別。

3．1同工酶電泳技術酶是生物代謝申的一種特殊蛋白質．同工酶是指同一生物體或同一組織中催化相同化學反應，結構不同的一類酶。其結構的差異來源于基因型的差異。在作物種子純度鑒定中，常用的是多態性較強的脂酶和過氧化物酶，所用方法多為聚丙烯酰胺凝膠電泳法。該方法的缺點是，同工酶往往具有組織或器官特異性，即同一時期不同器官內同工酶的數目不同，某些同工酶在種子貯藏和萌發過程中，種類數目易隨生活力和發育進程的變化而變化，加之種子萌發速度不一致，所以對品種純度鑒定不利。此外，酶的提取和電泳條件較蛋白質要求嚴格，需在低溫下進行。

3．2種子貯藏蛋白電泳技術種子中所含的貯藏蛋白質可分為清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白、谷蛋白等。目前鑒定品種的常用電泳方法有：鑒定小麥和大麥品種醇溶蛋白聚丙烯酰胺凝膠電泳標準程序；鑒定小麥谷蛋白、豌豆屬和黑麥草屬的SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳標準方法等。我國GB/T3543“農作物種子檢驗規程”已將“國際種子檢驗規程”的鑒定小麥和大麥品種的聚丙烯酰胺凝膠電泳標準參照方法列入應用。2001年農業部頒布了“玉米種子純度鹽溶蛋白電泳鑒定方法”(NY/T449－2001)。

4DNA分子標記鑒定技術

通過對品種DNA的多態性即DNA堿基序列的差異進行分析，從而鑒別不同品種。其檢測對象是種子的DNA片段(基因)，沒有器官的特異性，在植物體的各個組織、各個發育時期均可檢測；不受環境的影響，不存在表達與否的問題；數量極多，遍及整個基因組，多態性豐富；準確性高；重復性好；分離出的樣品DNA在適宜條件下可長期保存，這對進行追溯性或仲裁性鑒定是非常有利的。但DNA分子標記技術因所需儀器精密、藥品昂貴，程序復雜等，還沒有大規模的應用于品種純度鑒定。

辣椒的貯藏保鮮技術

張彥生

由于辣椒生產的季節性，使得淡旺季矛盾較為突出，因此，搞好辣椒貯藏不僅可以調節市場的產銷矛盾，也可增加經濟收入。

1貯藏特性

1．1對低溫的敏感性辣椒果實對低溫比較敏感，當環境溫度低于6℃時，若長期貯藏就可能產生冷害。辣椒受到冷害后，種子和花萼發生褐變，果皮色澤變暗，產生不規則的凹陷斑點，不能正常后熟，繼而感染病菌，造成腐爛。

1．2對二氧化碳的敏感性一定濃度的二氧化碳對辣椒有保鮮、保綠作用，當二氧化碳濃度超過一定濃度時就會引起傷害，造成萼片褐變和果肉腐爛。不同品種以及不同產地的辣椒對二氧化碳的忍耐力不同，在實際操作中應掌握在2％以下為安全范圍。

1．3易失水收獲后的辣椒極易失水，使得果梗變干，果皮皺縮，所以要求貯藏過程中采取保濕措施。但是如果貯藏環境中濕度過大，特別是結露水過多，極易引起辣椒腐爛變質。

1．4易轉紅辣椒采收后有后熟過程，即山青綠色轉為紅色和黃色，由硬變軟。控制轉紅的關鍵措施是控制溫度。

2對貯藏條件的要求

2．1溫度溫暖潮濕地區種植的辣椒比寒冷干燥地區的辣椒對低溫更敏感，同樣晚秋季節采收的辣椒比夏季采收的辣椒耐低溫能力強。晚熟品種比早熟品種耐低溫。貯藏溫度可根據不同地區而定，寒冷、干燥和晚熟品種一般可控制在7－8℃，夏季和潮濕地區采收的辣椒貯藏一般不低于9℃。相對濕度90－95％，過低果實易失水、萎蔫、果皮皺縮；過高又易引起腐爛。

2．2氣體成分在實際貯藏中，可通過選擇透氣性好的保鮮膜和控制裝果數量，來控制氧和二氧化碳的濃度，一般維持氧2－5％，二氧化碳1－2％，過量的二氧化碳可用消石灰來吸收。

3影響辣椒耐貯性的因素

3．1品種選擇辣椒品種間耐貯性差異較大。果皮厚、表皮光亮、褶皺少、果實干物質含量較高、色澤濃綠的晚熟品種較耐貯藏，如茄門、世界冠軍、巴彥、中椒4號等，早中熟尖椒類不耐貯藏。

3．2栽培管理果實采收后的生理狀態，包括耐貯性和抗病性，是在田間生長條件下形成的。果實的生育特性、地區氣候、土壤條件和管理措施等，都會對果實的品質及貯藏特性產生直接或間接的影響。因此，辣椒防腐必須從田間種植開始，在采收前的10－15天可噴施適當的殺菌劑，如甲基托布津、克菌丹、乙磷鋁、代森錳鋅等，盡可能地消除從田間帶來的病菌。

3．3采收期的確定和采收技術采收期對辣椒的耐貯性有較大影響，9月下旬(霜前一周)采收的果實較耐貯藏，可貯兩個月以上。而8月份正值高溫多雨季節，田間帶病較多，這時采收的果實只能貯一個月左右。長期貯藏的辣椒要選果實充分膨大、果肉厚而堅硬、光亮而未轉紅的綠熟果。采收應在晴天早晨氣溫較低對進行，戴絨線手套握住果梗采摘，防止果實和果柄受傷，也可用平頭鋒利的剪刀采摘。輕拿輕放，盡量避免機械傷的產生。

4貯藏技術

4．1貯前準備及預冷

貯前準備包括貯藏架及塑料箱、紙箱和保鮮膜袋等。架子可選用平架或立架兩種。平架要離開地面20cm，立架則要分層搭起，搭架材料最好選用角鐵，架寬為60em－1.2m，層高40－50cm，長和高視庫位而定，架與架之間要留50－70cm，架子要保持堅固平穩。搭架后，選用庫房專用煙霧消毒劑或硫磺點燃密閉24小時，打開庫門窗排出庫內殘留霧。貯藏用具包括塑筐、紙箱等，要進行消毒處理。在辣椒入貯前應開機降溫。采收后的辣椒，在低于貯藏溫度1℃的條件下預冷1－2天，以減少呼吸消耗，保持新鮮，同時還可避免裝袋后結露，減少腐爛。剔除紅果、病果、蟲果及傷果。

4．2保鮮庫貯藏法

4．2．1大帳貯藏將預冷好的辣椒裝入消過毒的箱內，每箱5－10kg,放入架上。在上架前將備好的2.3－3nma透氣性好的塑料膜將架底鋪好，辣椒上架冷透后要迅速扣帳密封，并在帳的四周開幾個8－10cm的小窗，便于通風補氧，降低二氧化碳濃度。一般貯藏前期15－20天補氧一次，后期7－10天補氧一次(每1次補氧5－10分鐘)。為防止下部二氧化碳積聚，引起傷害，可在帳內撒一些消石灰，來吸收多余的二氧化碳。

4．2．2小包裝平架貯藏將預冷好的辣椒裝入箱內，每箱不超過5kg，把透氣性好的保鮮袋套在箱子的外圍，注意裝箱易少不易多，過多會引起二氧化碳積聚，造成腐爛。碼垛時，垛與垛之間要留5-10cm的空隙，庫頂要留50－70cm，架底要撒一層消石灰。在貯藏時最好使用辣椒防瘋劑，嚴格把關，可貯60－70天。

4．3民間土藏法

4．3．1溝藏在背陰處挖寬和深各1m，長依地形而定。將采收后的辣椒直接放人溝內，厚度不超過50cm，在溝底鋪一層沙子，將辣椒散放于上，上面蓋一層稻殼或沙子，頂上要蓋草簾等保溫防寒物。此法可貯40－50天。

4．3．2窯洞貯藏采用筐裝的形式，每筐容量以10－15kg為宜。先在筐內襯一層薄紙，裝滿辣椒后上面蓋一層紙，加蓋，成“晶”字形堆碼，這種方法容易失水，要注意保持窯洞內的濕度，10天左右檢查一次，挑出紅果和腐爛果。夜間氣溫低時打開窯洞門通風降溫，要保持濕度注意加濕。

4．3．8帶秸稈民宅貯藏晚秋辣椒基本成熟后，將帶秸稈的辣椒用鐮刀從根部割起。運輸時輕裝、輕拿。先用0.5％的漂白粉水噴灑房內的墻壁和地面進行消毒，然后將帶秸稈的辣椒整齊地碼在房內，最好垛與垛之間留50－70cm人行道。等外界氣溫過低時要堵好門窗，注意保溫加濕(加濕可用濕草簾覆蓋)，這樣也可貯藏40－50天。