通腦舒絡膠囊對腦缺血缺氧的保護作用和抗凝抗栓作用

摘要：目的：觀察通腦舒絡膠囊對小鼠腦缺血缺氧的保護作用，及其對大鼠血栓形成和小鼠凝血時間的影響。方法：采用斷頭及雙側頸總動脈合并迷走神經結扎法造成小鼠急性腦缺血模型，采用大鼠動、靜脈吻合法形成血栓和毛細玻璃管法測定小鼠凝血時間，觀察藥物對腦缺血缺氧的保護作用、對血栓形成的抑制作用及對凝血時間的延長。結果：通腦舒絡膠囊能顯著延長腦缺血缺氧小鼠的存活時間，減輕大鼠血栓重量，延長凝血時間。結論：通腦舒絡對腦缺血缺氧具有保護作用，并能抑制血栓形成，延長凝血時間。

關鍵詞：通腦舒絡膠囊；腦缺血缺氧；血栓形成；凝血時間

中圖分類號：R743.31

文獻標識碼：A

文章編號：1007—2349(2007)05—0037—02

心腦血管疾病是目前發病率最高、對人類健康威脅最為嚴重的疾病之一，其中80％以上為缺血性腦血管病。腦缺血性疾病發生在局部腦血流減少甚至完全喪失的基礎上，目前對其治療主要以溶栓恢復缺血組織血液灌流為主。

通腦舒絡膠囊是江蘇省中醫藥研究院根據名醫驗方制作而成，有多年的臨床應用基礎，具有很好的臨床療效，主要用于腦中風治療。本文采用斷頭及雙側頸總動脈合并迷走神經結扎法造成小鼠急性腦缺氧缺血模型，大鼠動、靜脈吻合法形成血栓等方法，觀察通腦舒絡膠囊對腦缺血的保護作用及其對血栓形成和凝血時間的影響，為中藥驗方提供理論依據和實驗數據。

1、實驗動物及材料

1.1 實驗動物昆明種小鼠，18～22g；SD清潔級大鼠，體重280～320g，購于上海斯萊克實驗動物有限公司，合格證號：SCXK(滬)2003—0003，飼養環境清潔級，合格證號：SCXK(蘇)2002—0052。

1.2材料 通腦舒絡膠囊混懸液，蒸餾水稀釋至所需濃度；尼莫地平片，廣州華南藥業有限公司生產，20mg／片，批號060201；阿司匹林腸溶片，南京白敬宇制藥有限公司，25mg／片，批號060601。

2、方法

2.1 對小鼠急性腦缺氧的保護作用 昆明種小鼠70只，體重18～22g，雌雄各半，將小鼠隨機分為5組，即對照組、陽性藥組和給藥高、中、低劑量組。給藥組分別灌胃給予通腦舒絡膠囊混懸液11、5.5、2.75g生藥／kg，對照組灌胃給予同體積的蒸餾水，陽性藥組灌胃給予尼莫地平20mg／kg，灌胃給藥7d，于末次給藥后1h，參照文獻方法將小鼠雙耳后頸部逐只斷頭，立即按秒表記錄小鼠斷頭后至張口喘氣停止的時間。

2.2雙側頸總動脈合并迷走神經結扎致小鼠腦缺血 昆明種小鼠70只，體重18～22g，雌雄各半，分組同2.1，灌胃給藥7d，于末次給藥后1h，清醒狀態下仰位固定，頸部正中切口，分離雙側頸總動脈合并迷走神經，以0號手術線，在近心端和遠心端分別穿線，結扎同時開始計時，剪斷雙側頸總動脈合并迷走神經，完全阻斷大腦血流。記錄各組小鼠的存活時間(以小鼠末次腹式呼吸為觀察指標)。

2.3大鼠體內血栓形成(動靜脈旁路法) 雄性SD大鼠50只，280～380g，隨機分為5組，每組10只。即對照組、陽性藥組和給藥高、中、低劑量組。給藥組分別灌胃給予通腦舒絡膠囊混懸液5.5、2.75、1.375g生藥／kg，對照組灌胃給予同體積的蒸餾水，陽性藥組灌胃給予阿司匹林30mg／kg。大鼠以20％烏拉坦(6ml／kg，ip)麻醉后，分離右頸內動脈及左頸外動脈，以置入6cm 4～0手術絲線的聚乙烯管連通，形成動靜脈旁路。分別舌下靜脈給藥15min后，開放血流15min，取出絲線稱重，總重減去絲線重即為血栓濕重。按下式計算抑制百分率，抑制率(％)=(對照組血栓濕重一給藥組血栓濕重)／對照組血栓濕重×100。

2.4小鼠凝血時間測定 昆明種小鼠70只，體重18～22g，雌雄各半。將小鼠隨機分為5組，即對照組、陽性藥組和給藥高、中、低劑量組。給藥組分別灌胃給予通腦舒絡膠囊混懸液11、5.5、2.75g生藥／kg，對照組灌胃給予同體積的蒸餾水，陽性藥組灌胃給予阿司匹林60mg／kg，灌胃給藥6d。末次給藥后1h，眼后靜脈叢取血，以毛細管法測定凝血時間(CT)L3J。

2.5統計學方法 所有結果以均數±標準差(x±s)表示。組間比較采用t檢驗，組間率的比較采用x²檢驗。

3、結果

3.1對小鼠急性腦缺氧的影響與對照組比較，通腦舒絡膠囊中、高劑量組能明顯延長小鼠斷頭喘氣時間(P<0.05或0.01)。見表1。

與對照組相比，*P<0.05，**P％0.01

3.2對雙側頸總動脈合并迷走神經結扎小鼠存活時間的影響與對照組比較，通腦舒絡膠囊中、高劑量組能明顯提高雙側頸總動脈合并迷走神經結扎小鼠的存活時間(P<0.05或0.01)。見表2。

4、討論

腦是高級神經中樞，對血供的需求很大，腦重只占體重的2％～3％，卻利用了全身耗氧量的20％～25％，葡萄糖的75％。腦組織的氧、葡萄糖的儲備極少，一旦血流完全阻斷，6秒鐘內神經細胞代謝即可受到影響，幾分鐘內能量代謝和離子平衡就發生紊亂，因此腦血流的充足供應是腦功能正常和結構完整的首要條件Ⅲ。小鼠顱內腦血管之間有吻合枝，單獨結扎雙側頸總動脈不出現明顯腦缺血癥狀，當將迷走神經和頸總動脈一起結扎時，則迷走神經受到刺激引起血壓下降，可產生腦缺血。在同時結扎雙側頸總動脈和迷走神經后，大腦因為血流供應的減少出現供氧減少而出現明顯缺氧癥狀，模型動物絕大多數在內死亡。在斷頭實驗中，腦血液供應中斷，但腦中原有的血和營養物質尚能使腦功能維持一段時間，表現為小鼠規律地喘氣，當能量耗至一定程度，活動終止。實驗表明通腦舒絡膠囊3個劑量組均可延長結扎雙側頸總動脈小鼠的存活時間，通腦舒絡膠囊高、中劑量能顯著延長斷頭小鼠的喘息時間，使腦耗氧量降低，增加神經細胞耐缺氧能力，對急性腦缺血缺氧有明顯的拮抗作用，提示該藥能具有提高機體的血氧利用率，降低機體的耗氧量，增加動物血管動靜脈血氧量，從而提高組織利用氧的能力，促進對動物心腦等重要器官的供氧需求，對腦組織有明顯的保護作用。

凝血系統和纖維蛋白溶解系統的動態平衡，既保證了血液有潛在的可凝固性，又始終保證了血液的流體狀態。然而，有時在某些能促進凝血過程的因素作用下，打破了上述動態平衡，觸發凝血過程，血液便可在血管腔內凝固，形成血栓。腦缺血時，血液處于高凝、高粘、高聚狀態，血栓的形成是其重要的生理病理過程之一。實驗表明通腦舒絡膠囊各劑量組能顯著抑制大鼠動靜脈旁路血栓的形成，提示能夠對抗血栓的形成。缺血性心腦血管病的病理生理過程中存在著凝血一纖溶的異常變化。而凝血過程是一個多因子參與的復雜過程，既可由血管內膜損傷激活的“內源途徑”引發，也可由血管外的凝血因子與血液接觸而啟動的“外源途徑”引發。實驗表明通腦舒絡膠囊中、高劑量能顯著延長小鼠凝血時間，從而也有對抗血栓生成的作用。

本文初步證實通腦舒絡膠囊能夠保護腦缺血缺氧，延長凝血時間，抑制血栓形成，其作用機制有待進一步探討。