山楂ＩＳＳＲ分析體系的建立和優化
2007-01-01 00:00:00代紅艷張志宏周傳生李賀郭修武
果樹學報 2007年3期
摘 要：為在DNA分子水平上對山楂種質資源進行分析奠定基礎，對退火溫度、循環次數、DNA模板質量、Mg2+濃度、Taq DNA聚合酶的種類和濃度等影響ISSR反應的因素進行研究，建立并優化了山楂的ISSR分析體系。優化的山楂ISSR分析體系為：采用改進的CTAB法或QIACEN試劑盒法提取總DNA；PCR反應體積為20μL，內含1XPCR反應緩沖液(Promega公司)，3.0mmol/L MgCl2，0.2mmol/L dNTP，0.3μmol/L引物，0.5U Taq DNA聚合酶(天根公司)，50ng總DNA；擴增程序為94℃3min；94℃ 30s，退火溫度1min，72℃2min，38個循環，72℃ 7min。篩選出了10個適宜山楂遺傳分析的ISSR引物。
關鍵詞：山楂；ISSR；優化
中圖分類號：S661.5
文獻標識碼：A
文章編號：1009—9980(2007)03—313—06
